细胞外基质和胶原的结构:细胞外基质(extrcellulrmtrix,ECM)分为可溶性基质和不溶性基质。不溶性基质由糖蛋白(glycoprotein)和蛋白多糖(proteoglycn,PG)交联在一起构成细胞外基质的骨架结构。可溶性基质由胶原蛋白组成,附着于不溶性基质上。随着创伤愈合研究的深人,发现ECM不仅是维持组织结构的完整性所必...
查看详细 >>如何高效率实现细胞转染:DNA转染导入细胞胞浆内的DNA不能穿过细胞核的核膜("核屏障")。在细胞有丝分裂过程中核膜溶解,DNA进入细胞核才有可能。为此,细胞处于分裂期对DNA转染是至关重要的,并且处于分裂期的细胞比例必须尽可能大才能实现高效转染。DNA转染机制示意图如下所示:转染RNA(siRNA/miRNA/mRNA)对于RNA转染是...
查看详细 >>PAS染色的临床意义①帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞或Reed-Sternberg细胞,前者呈强阳性反应,后者呈弱阳性或阴性反应。②帮助鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞,前者呈强阳性反应,后者呈弱阳性反应,且空泡中心为阴性反应。③帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞,后者呈强阳性反应,阳性反应物质为红色细颗粒状或粗颗粒状,有时呈红色块状...
查看详细 >>细胞转染的原理、操作步骤以及小技巧:一、脂质体(Liposome)转染方法原理脂质体作为体内和体外输送载体的工具,已经研究的十分普遍,中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附...
查看详细 >>注意事项:染色时:①染色时必须严格按照染色操作说明书进行染色。②在染色过程中,前一个染液浸染完成后,在进行下一个染液的步骤之前,必须彻底充分水洗,使前一个染液冲洗干净后再进行下一步骤。③每次滴加染液前,务必吸干组织上多余的水分,避免多余的水把染液稀释了,造成染色不佳。④在滴加染液时,务必使染液完全覆盖组织,但不能溢出圈外,避免浪费试剂。在...
查看详细 >>中文名细胞外基质英文名extracellularmatrixc,ECM主要成分多糖和蛋白物质构成网架结构特性不属于任何细胞1成分2构成纤粘连蛋白糖▪弹性蛋白3作用4医学5译名细胞外基质成分编辑细胞外基质的组成可分为三大类:①糖胺聚糖(glycosaminoglycans)、细胞外基质蛋白聚糖(proteoglycan),它们能够形成水性的...
查看详细 >>细胞转染的注意事项:1.细胞铺板密度用于转染的较佳细胞密度根据不同的细胞类型或应用而异。因转染试剂对细胞有毒害作用,细胞太少,容易死。一般转染时,贴壁细胞密度为70%-90%,悬浮细胞密度为2-4×106细胞/ml,确保转染时细胞没有长满或处于静止期。因为转染效率对细胞密度很敏感,所以在不同实验间保持一个基本的传代步骤很重要。铺板细胞数目...
查看详细 >>转染的注意事项:用于蛋白生产的细胞的转染可以在添加有血清或无血清培养基中进行。但更倾向于使用无血清培养基表达蛋白,因为血清蛋白会干扰下游表达蛋白的纯化。无血清培养基一般针对某一特定细胞类型优化并有几类无血清培养基不需要添加血清,一般含有不均一的或大量的蛋白(但比添加血清的培养基低得多)。无蛋白培养基不含蛋白但可能含有不明成分的抽提物,限定...
查看详细 >>细胞转染的注意事项:1.细胞铺板密度用于转染的较佳细胞密度根据不同的细胞类型或应用而异。因转染试剂对细胞有毒害作用,细胞太少,容易死。一般转染时,贴壁细胞密度为70%-90%,悬浮细胞密度为2-4×106细胞/ml,确保转染时细胞没有长满或处于静止期。因为转染效率对细胞密度很敏感,所以在不同实验间保持一个基本的传代步骤很重要。铺板细胞数目...
查看详细 >>糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,...
查看详细 >>蛋白聚糖在细胞外基质中的功能是什么:蛋白聚糖或透明质酸-蛋白聚糖复合物构成了细胞外基质的基质,由于它们是高度酸性的,且带负电荷,因此能够结合大量的阳离子,这些阳离子又可结合大量的水分子,这样,蛋白聚糖形成了多孔的、吸水的胶状物,如同包装材料,填充在细胞外基质中。蛋白聚糖的这种性质,使细胞表面具有较大的可塑性,从而具有抗挤压能力,对细胞起保...
查看详细 >>如何有效提高细胞转染实验效率:1.选择合适的转染试剂不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择较适合实验设计的转染试剂。当然,较适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。2.保持较佳的...
查看详细 >>