在进行细胞吸附式膜片钳记录时,一般来说,我们通过电压钳(voltageclamp,VC)模式将细胞膜电位维持在-60mV(大多数脊椎动物神经元的静息膜电位),从而保证通过电极尖锐端的电流即为跨膜离子流。一般来说,细胞吸附式膜片钳可以作为对照来验证其他单通道记录构型下通道活动的改变情况,也可以用来检测化学物质引起的通道的和活动/对通道活动的...
查看详细 >>膜片钳技术与其他生物检测技术的结合应用:1.膜片钳与光学显微成像技术结合应用:利用激光扫描共聚焦显微镜、双光子显微镜、荧光显微镜等技术可以对细胞进行实时成像研究,将膜片钳技术与光学显微成像技术结合使用不但可以检测细胞的电流变化情况,而且还可以对细胞的电信号传递活动进行成像观察。2.膜片钳与原子力显微镜结合应用:将膜片钳和AFM结合使用的技...
查看详细 >>膜片钳操作实验:膜片钳放大器是整个实验系统中的中心,它可用来作单通道或全细胞记录,其工作模式可以是电压钳,也可以是电流钳。从原理来说,膜片钳放大器的探头电路即I-V变换器有两种基本结构形式,即电阻反馈式和电容反馈式,前者是一种典型的结构,后者因用反馈电容取代了反馈电阻,降低了噪声,所以特别适合很低噪声的单通道记录。由于供膜片钳实验的专门计...
查看详细 >>一种电生理膜片钳灌流装置的制造方法:为了测量在不同药物对细胞中的离子通道的影响,通常都需要在膜片钳实验中实施灌流。例如,需要检验某种是否对某种离子通道的影响,则需要在细胞封接后记录电流数据,然后通过在细胞周围快速给药再次记录电流数据即可对比数据判断该对离子通道的影响。以往多采用橡皮泥等简单设备固定灌流管进行实验,经常出现灌流管固定不良影响...
查看详细 >>膜片钳技术在通道研究中的重要作用:1.与药物作用有关的心肌离子通道:心肌细胞通过各种离子通道对膜电位和动作电位稳态的维持而保持正常的功能。近年来,国外学者在人类心肌细胞离子通道特性的研究中取得了许多进展,使得心肌药理学实验由动物细胞模型向人心肌细胞成为可能。2.对离子通道生理与病理情况下作用机制的研究:通过对各种生理或病理情况下细胞膜某种...
查看详细 >>膜片钳技术的基本原理和方法:膜片钳使用的基本方法是,把经过加热抛光的玻璃微电极在液压推进器的操纵下,与清洁处理过的细胞膜形成高阻抗封接,导致电极内膜片与电极外的膜在电学上和化学上隔离起来,由于电性能隔离与微电极的相对低电阻(1~5MΩ),只要对微电极施以电压就能对膜片进行钳制,从微电极引出的微小离子电流通过高分辨、低噪声、高保真的电流-电...
查看详细 >>全自动膜片钳的优势:自动化:抓取细胞、形成封接、破膜等整个实验操作全部自动化,极大的节约实验人员的时间精力。简约化:传统膜片钳所需要的显微镜、显微操作系统、微电极拉制仪,防震台、屏蔽网等全都不需要。效率高:是传统膜片钳实验效率的5-10倍。可靠性:实验结果轻松复制。经济实惠:药物消耗低,每次实验记录较低只需5μl内外液体。零技术门槛:无需...
查看详细 >>组织芯片技术是一种高效的高通量组织学研究工具。它将多个不同组织样本或同一组织的不同部位的微小组织片,按照预先设计的阵列排列在一张载玻片上,形成组织芯片。这一技术能够在一次实验中同时对大量组织样本进行多种分子标记检测,极大地节省了实验试剂和时间,提高了实验效率。例如,在瘤子研究中,可以将不同患者的瘤子组织以及对应的正常组织制成组织芯片,通过...
查看详细 >>原位杂交解决方案的实验流程遵循严格的标准化操作规范。首先,样本制备阶段需根据样本类型选择合适的处理方式,如石蜡切片需进行脱蜡、水化,以恢复样本的通透性;细胞样本则需进行固定和透化,确保探针能够顺利进入细胞。随后,探针的设计与标记是实验的关键环节,需根据目标核酸序列特点设计特异性探针,并选择合适的标记方法进行标记。杂交过程中,精确控制杂交温...
查看详细 >>组织芯片免疫荧光服务公司构建了严格的质量保障体系,贯穿服务的全过程。在人员管理方面,对实验人员进行定期培训和考核,确保其熟练掌握实验技术和操作规范。在试剂和耗材管理上,建立严格的采购、验收和存储制度,选用高质量的抗体、荧光标记物等试剂,保证实验的稳定性和重复性。仪器设备定期进行校准和维护,确保检测结果的准确性。实验过程中,严格执行质量控制...
查看详细 >>化学遗传技术的重点功能是通过改造生物大分子来实现对其活性的精确调控。目前,该技术已经成功改造了多种生物大分子,包括核酸杂交、蛋白质激酶、代谢酶和G蛋白偶联受体(GPCRs)。其中,基于GPCRs改造的化学遗传学平台应用更广,例如DREADDs技术。DREADDs技术通过改造G蛋白偶联受体,使其只能被特定的化合物赋活或抑制,从而实现对神经元...
查看详细 >>组织芯片技术具有明显的优势。其一,高通量的特点使其能够在短时间内处理大量的组织样本,较大提高了研究效率;其二,所需的组织样本量极少,对于珍贵的临床样本能够充分利用,这在一些罕见病的研究中尤为重要;其三,由于是在同一张芯片上进行多种检测,减少了实验误差和个体差异,增强了结果的可比性和可靠性。然而,该技术也存在一定的局限性。例如,组织芯片制作...
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