ChIP技术的应用: 1. 转录因子结合位点的鉴定:研究特定转录因子在基因组上的结合模式。 2. 组蛋白修饰的分布:分析不同组蛋白修饰在基因组上的分布情况,这些修饰与基因的活跃或沉默有关。 3. DNA甲基化研究:结合ChIP技术可以研究DNA甲基化对基因表达的影响。 4. 染色质结构和功能:研究染色质重塑对基...
查看详细 >>对于同一个样品,如果PCR检测结果为阳性而一步法恒温检测试剂盒结果为阴性,可能的原因包括: 1. 灵敏度差异:PCR方法通常具有较高的灵敏度,可以检测到单个拷贝的支原体DNA。相比之下,一步法恒温检测试剂盒可能需要更高的支原体拷贝数才能检测出阳性结果,例如需要10^3个拷贝。如果样品中的支原体数量低于一步法试剂盒的检测...
查看详细 >>免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP)是一种用于研究蛋白质相互作用和纯化特定蛋白质的实验方法。 优点: 1. 特异性强:利用特异性抗体捕获目标蛋白,可以有效地从复杂的生物样本中分离出感兴趣的蛋白质。 2. 灵敏度高:可以检测到低丰度的蛋白质,包括瞬态或弱相互作用的蛋白质复合物。 3. 应...
查看详细 >>支原体去除和支原体预防是两种不同的策略,它们在细胞培养和生物制品生产中都非常重要。 支原体去除是指在细胞已经被支原体污染后采取的措施。这通常涉及到使用特定的抗*素或化学试剂来消灭或抑制支原体的生长。例如,根据的描述,支原体去除试剂是一种混合抗*素制剂,它含有三种对支原体具有抑菌作用的组分,可以取得良好的支原体清*效...
查看详细 >>免疫沉淀技术的实验设计通常包括以下几个关键步骤: 1. 目标蛋白质的选择: 2. 抗体的选择:选择特异性强、亲和力高的抗体来捕获目标蛋白质 3. 样本的准备:收集和准备细胞或组织样本。 4. 蛋白质的裂解和释放:选择合适的裂解条件,如pH值、离子强度、去污剂等。 5. 蛋白质浓度的测定:确定裂解液中蛋白质...
查看详细 >>免疫沉淀实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ,它能够直接高效、快速结合抗体,而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构,这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触,具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同,磁珠是固体,...
查看详细 >>免疫沉淀Co-IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ,它能够直接高效、快速结合抗体,而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构,这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触,具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同,磁...
查看详细 >>支原体污染后的细胞是否应该直接丢弃还是尝试重新培养,这取决于多种因素,包括细胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法来清*支原体。以下是一些处理支原体污染的常见方法: 1. 直接丢弃:对于非重要的细胞,如果培养中的细胞、WCB的细胞等,可以采取直接将培养物与用过的培养基灭活后丢弃的方式。 2. 使用支原体清除剂:支...
查看详细 >>免疫沉淀实验不同于WB实验的样品制备,对实验样品制备要求更高,除了要控制所有操作尽量在冰上完成外,关键的是裂解液的成分,裂解液成分直接决定了样品质量。 主要影响: 1. 蛋白的释放:许多目的蛋白定位在细胞器,质膜,细胞核,细胞骨架中,但通常这些亚细胞结构很难被裂解液有效溶解,所以很难将这些蛋白释放出来。 2. 蛋白相...
查看详细 >>Co-IP(Co-Immunoprecipitation,共免疫沉淀)的实验方法通常包括以下步骤: 1. 细胞培养与裂解:细胞在适宜的培养条件下生长到适当的密度。 蛋白质分离:裂解后的细胞混合物通过离心去除未破碎的细胞碎片和未裂解的细胞。收集上清液 2. 抗体的添加:将特异性抗体(针对目标蛋白质的抗体)加入到裂解物中...
查看详细 >>免疫沉淀(IP)实验中抗体的选择非常关键,因为抗体的特异性和亲和力直接影响到实验的成功与否。 1. 特异性:抗体应当对目标蛋白具有高度的特异性,以避免与其他蛋白发生非特异性结合,导致假阳性结果。 2. 亲和力:抗体对目标蛋白的亲和力要足够高,以确保在免疫沉淀过程中能够有效地捕获目标蛋白。 3. 抗体类型:单克隆抗体和...
查看详细 >>细胞培养中支原体污染会对实验结果产生多方面的影响,具体包括: 1. 细胞生长受影响:支原体污染可能导致细胞生长速度减慢,甚至停滞。 2. 细胞形态改变:支原体感*的细胞可能会出现形态的改变,如细胞体积增大、形态不规则等。 3. 细胞功能改变:支原体污染会影响细胞的代谢、增殖、分化等生理功能。 4. 细胞...
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