将装有培养液的离心管放入离心机,设置 1000 - 1500 转 / 分钟,离心 5 - 10 分钟,待细胞沉淀后,使用移液器缓慢吸取上清液,转移至新的无菌离心管,整个过程要避免扰动沉淀。对于贴壁细胞,准备工作相同。先用无菌 PBS 缓冲液轻柔地冲洗细胞 2 - 3 次,每次冲洗时,倾斜培养瓶,让缓冲液缓慢流经细胞表面,确保杂质被洗净又不...
查看详细 >>这项技术具有诸多优势。它能够从复杂的生物样品中高效富集低丰度的目标蛋白,提高检测的灵敏度。同时,其特异性强,能够准确地捕获目标蛋白,减少非特异性干扰。然而,IP 免疫沉淀也面临一些挑战。抗体的质量和特异性对实验结果影响巨大,如果抗体特异性不佳,可能会导致非特异性结合增多,影响实验的准确性。此外,实验条件的优化也较为关键,不同的样本和实验目...
查看详细 >>当细胞被裂解后,这些蛋白质复合物在一定条件下仍能保持相对稳定。我们向裂解液中加入针对某个已知蛋白(通常称为诱饵蛋白)的特异性抗体,抗体与诱饵蛋白特异性结合形成抗原 - 抗体复合物。借助 Protein A/G 磁珠或琼脂糖珠这类固相载体,其表面的 Protein A 或 Protein G 能够与抗体的 Fc 段紧密相连,通过离心或磁力分...
查看详细 >>首先,样品(如细胞裂解液或组织提取物)需要经过适当的处理,以确保目标蛋白的可溶性和稳定性。接下来,特异性抗体与样品中的目标蛋白结合,形成抗原-抗体复合物。为了提高实验的特异性和效率,通常会使用经过预处理的固相载体(如ProteinA/G琼脂糖珠)来捕获复合物。经过多次洗涤去除非特异性结合的蛋白后,目标蛋白可以通过改变缓冲液条件(如pH值或...
查看详细 >>在微生物的世界里,支原体是一类独特且引人关注的存在。它是目前发现的小、简单的原核生物,没有细胞壁,有细胞膜包裹,这使得它形态多变,在显微镜下能呈现出球状、杆状、丝状等多种形态。支原体分布于自然界,人和动物的呼吸道、泌尿生殖道等是其常见的栖息之所。别瞧它个头微小,却有着不小的影响力,能引发多种疾病。在人类健康方面,肺炎支原体是引发支原体肺炎...
查看详细 >>免疫沉淀技术,历经数十年发展,已成为生命科学研究中不可或缺的重要工具。它起源于对免疫系统基本机制的研究,初用于分离和鉴定抗体及抗原,随着科研需求的增长与技术的进步,其应用范畴不断拓展。免疫沉淀技术的精妙之处在于利用抗原与抗体间高度特异性的结合。在复杂的生物样品环境中,特定抗体如同精确的分子 “导航仪”,能从成千上万种分子中找到并结合目标抗...
查看详细 >>支原体是一类无细胞壁的原核微生物,这一特征使其在微生物界独树一帜。缺乏细胞壁赋予了支原体高度的多形性,它们可以在球形、杆形、丝状等多种形态之间转换,以适应不同的生存环境。支原体的体积微小,直径通常在 0.1 - 0.3 微米之间,是已知能在无生命培养基中生长繁殖的小微生物。其细胞膜富含胆固醇,这不仅增强了细胞膜的稳定性,还使其具备了一些特...
查看详细 >>另一方面,支原体代谢过程中产生的某些和代谢产物,也会对宿主细胞产生毒性作用,干扰细胞正常的生理功能。准确检测支原体对于疾病诊断和防控至关重要。目前,常用的检测方法包括培养法、血清学检测法、分子生物学检测法等。培养法是将样本接种于特定培养基中,观察支原体的生长情况,该方法虽为金标准,但操作繁琐、耗时较长。血清学检测法通过检测血清中的特异性抗...
查看详细 >>当怀疑是肺炎支原体时,呼吸道样本的采集尤为重要。最常见的方式是采集咽拭子。在采集咽拭子前,医护人员会先让患者用清水漱口,以减少口腔内杂菌的干扰。然后,医护人员会使用一根特制的无菌拭子,深入患者口腔,在咽后壁、双侧扁桃体隐窝等部位,适度用力擦拭,采集足够的上皮细胞及可能存在的支原体。擦拭过程中,需注意避免触碰舌部、口腔黏膜等部位,以免污染样...
查看详细 >>从基因层面看,支原体基因组小巧玲珑,这决定了它们无法像其他微生物那样合成诸多生命活动必需的物质,只能依赖宿主细胞提供养分,开启寄生生活。这种紧密的寄生关系,为支原体与宿主之间复杂的相互作用埋下了伏笔。支原体的传播可谓 “多管齐下”。在人类健康范畴,呼吸道和泌尿生殖道是其传播的主要 “通道”。肺炎支原体堪称呼吸道的 “常客”,以飞沫为媒介,...
查看详细 >>四环素类和喹诺酮类也可用于,但它们也存在一定的副作用和适用人群限制。不过,随着科研的不断推进,新的药物和方法正在被探索。例如,一些针对支原体特殊代谢途径的抑制剂正在研发中,有望为支原体的治疗带来新的突破。在公共卫生层面,支原体不容忽视。在学校、幼儿园等人员密集场所,支原体肺炎等疾病容易传播,影响学生的健康和正常教学秩序。在畜牧业中,支原体...
查看详细 >>分子生物学检测法则以核酸扩增技术为基础,如PCR技术,能够快速、灵敏地检测出样本中的支原体核酸,提高了检测效率和准确性。针对支原体的防治,采取综合性措施至关重要。在医学上,合理使用是支原体的主要手段。由于支原体没有细胞壁,对作用于细胞壁合成的如青霉素类不敏感,而四环素类、大环内酯类、喹诺酮类则对其具有较好的抑制作用。但随着的使用,支原体耐...
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