老挝家庭农场非洲猪瘟生物安全要点

“雷达站”前移——DTD实验室实现监测零距离秉持“疾病在哪里，实验室就建到哪里”的原则，八方同创大力帮助猪场搭建DTD（Diagnose To Doors）实验室，设计采样方案，送样流程，检测流程，报告输出，疾病预警等一整套疫病监控体系，从采样到出结果不超过4小时，这使得检测能力延伸至生产一线。所有进出场的人员、车辆、物资、饲料、猪群都需经过非洲猪瘟病毒核酸检测，结果阴性方可放行。对任何异常猪只都能做到即时采样、快速检测，实现了**的“早发现、早预警”，让猪场拥有了属于自己的**监测“雷达站”。非洲猪瘟流行季节容易出现中国北方在秋冬季（大风天气），南方的雨水台风季。老挝家庭农场非洲猪瘟生物安全要点

鉴于非洲猪瘟控制的挑战和成本，主要重点应放在预防上。疫苗可能成为一种有用的预防措施，但基本的生物安全实践仍然至关重要。

非洲猪瘟病毒是接触传播有利于防止病毒进入养猪场或在猪群内外的传播。在正常情况下，病毒传播缓慢。此外，病毒在密闭空间内短距离空气传播，没有令人信服的证据表明室外存在空气传播。由于脂质包膜，非洲猪瘟病毒对热、阳光和干燥敏感，并且可被多种易获得的消毒剂破坏。在环境中的持久性取决于病毒受到有机物（如血液）的保护。圈养猪只、限制接触猪只、确保饲料安全以及实施防止通过受污染物品（如鞋类和设备）的措施，足以防止非洲猪瘟病毒传入。在资源有限的环境中，与养猪者合作对于建立可行、友好、可接受的措施至关重要。常规控制措施包括检疫、流动禁令和扑杀阳性场（有时还包括规定半径内所有场点）的所有猪，并对扑杀的健康猪进行补偿。这些措施对资源充足的国家可行，并被认为是尽快恢复国际贸易所必需的。然而，对于销毁和处理大量健康猪，日益增长的福利和环境担忧。来自亚洲的证据表明，通过早期检测、隔离和改良扑杀可以避免大规模扑杀。死猪堆肥已被证明能有效快速破坏病毒并避免不良环境污染。 新加坡非洲猪瘟科研成果分享八方同创总结：很多常用消毒剂对非洲猪瘟病毒有效，如3%烧碱戊二醛、过硫酸氢钾、二氯异氰尿酸钠等有效。

非洲猪瘟疫苗研发历程艰难，主要在于缺乏明确的保护相关物、抗体的中和能力有限以及病毒的复杂性，都导致了开发有效疫苗的挑战。

多年的研究努力在非洲猪瘟病毒疫苗开发方面取得了有希望的进展，但商业化的疫苗仍未普及，并且报告了当前疫苗在田间使用后出现问题，例如在越南。基于康复动物的血清学有良好的反应，学者们将重组的靶向结构蛋白（如p30、p54、p72、pp62和CD2v）疫苗、DNA疫苗和病毒载体疫苗等作为非洲猪瘟病毒疫苗开发的重点。许多项目利用计算机预测的抗原通过各种载体系统表达，但大多数方法显示出极小或无保护效力。

近期，一种包含8种非洲猪瘟病毒抗原的组合，通过复制缺陷型人腺病毒5（初免）和改良痘苗病毒安卡拉株（加强）给药，在非洲猪瘟病毒基因型I攻毒后保护猪免于死亡。该研究方法在抗原选择方面具有前景，并支持DIVA兼容的亚单位疫苗可提供一定程度保护的概念。不幸的是，未识别出明确的保护指标，因为所有动物都发病并表现出病毒血症。此外，尝试用基因型II毒株攻读复制这些结果未成功。因此，仍然缺乏有说服力的载体或亚单位疫苗候选株。

非洲猪瘟病毒基因组长度在170至193kb之间变化，包含150-167个开放阅读框。已鉴定出超过68种病毒蛋白，但其中一些的功能仍未知。基因组由一个约125kb的保守中心区域和两个包含五个多基因家族（MultigeneFamilies,MGFs）的可变末端组成(Yáñezetal.1995)。在MGF基因内发生长达20kb的复制区域缺失和插入，表明这些区域可能有助于产生抗原变异，从而帮助非洲猪瘟病毒逃避宿主免疫系统。历史上，非洲猪瘟病毒基因分型基于B646L基因（编码p72蛋白）的部分测序(Achenbachetal.2017;Quemboetal.2018)。这种方法通过分型基因组的其他部分得到辅助，例如编码p54、p40或CD2v的部分，或对基因间区进行测序(Gallardo,Fernandez-Pinero,etal.2014)。虽然单独对p72进行基因分型无法完全阐明每个地区分离株的变异性，但它仍是对不同田间分离株进行流行病学追踪易得且经济的方法(Dinhobletal.2024)。在条件允许的情况下，使用下一代测序技术生成全基因组比较适合用于深入了解基因组流行病学和病毒进化(J.Forth,L.Forth,etal.2019;J.Forth,Calvelage,etal.2023)。非洲猪瘟的生物安全防控由两部分组成，一是外挡传入；二是内防扩散。

八方同创防认为，防控非洲猪瘟的生物安全体系是一个系统的，长期的工程，并非一劳永逸。它需要持续的体系优化，因此生物安全审计与巡检防控体系非常重要。八方同创提供定期的猪场生物安全审计与巡检服务，技术老师会结合非洲猪瘟流行动态、猪场地缘特点、DTD实验室运行情况以及场内外的风险点，进行排查与评估，找出体系中的短板与漏洞。在此基础上，帮助猪场构建并完善科学的五级生物安全框架，外挡传入，内防扩散，使防控体系能够动态优化，持续有效。八方同创认为非洲猪瘟病毒主要通过接触传播和软蜱叮咬传播，个别基因型毒株还存在有限空气传播。日本楼房养猪非洲猪瘟预防

八方同创提醒：非洲猪瘟病毒在环境中抵抗力强，耐低温不耐高温，70℃以上50分钟可完全杀灭。老挝家庭农场非洲猪瘟生物安全要点

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 老挝家庭农场非洲猪瘟生物安全要点

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