马来西亚非洲猪瘟养殖技术要点

猪场生物安全体系制胜：

解读八方同创的五级生物安全框架在不断的审计与巡检中，八方同创致力于为猪场构建并完善“五级生物安全框架”。五级生物安全通常涵盖从场外污区、缓冲区或隔离区、入场管控区或生活区、场内分区、猪舍内管理区。人员、物资、饲料、车辆或工具、猪、空气、水、生物虫要通过这五级生物安全防控体系，不携带病毒才能进入猪舍。猪群健康管理的层层递进、环环相扣的防护等级。通过将各种防控措施（如风险评估、人员管理、消毒、监测等）系统性地纳入这一框架，帮助猪场形成逻辑清晰、层级分明、易于执行的防御体系。 八方同创的生物安全审计服务，就是根据“五横八纵”的交叉点进行查缺补漏，提出改进意见，人员培训。马来西亚非洲猪瘟养殖技术要点

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，近期的研究再次表明，ASFV在4℃、22℃和40℃时稳定，在EMEM中培养24h后，损失不到10个50%血细胞吸附剂量（HAD50）/mL。组织中的ASFV可以在深度冷冻（-70℃）条件下存活多年而没有明显的滴度损失，但在20℃时会逐渐失去活性，但仍可存活至少105周。在4℃时，病毒在培养基中非常稳定，至少在61周内保持活性。在较高温度下，ASFV失活相对较快，在37℃下，ASFV在细胞培养基中可保持活性11~22d，但在50℃时，只有少部分病毒保持活性，而在60℃时，15min后就检测不到活毒粒子。日本母育猪非洲猪瘟八方同创要求非洲猪瘟阳性场，做好内防扩散措施，低风险区查情不用公猪，用气味剂。

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。

    非洲猪瘟防控过程中一定要有“无坚不破、唯快不破”的防控理念，早发现、早处理仍然是减少和减低损失的主要措施。现场确诊十分重要了。八方同创在防控非洲猪瘟一线，秉承“科技赋能检测”的理念，依托先进生物技术和临床经验，自主研发了一系列诊断工具——高灵敏迷你PCR设备与非洲猪瘟抗原、抗体快速检测卡。BIOMINI 2.0是高特异性的迷你PCR仪，检测下限可达，全程耗时不足60分钟，实现了现场快速精细的核酸诊断。同时，其与中国台湾EBS联合推广的非洲猪瘟抗体快速检测卡已获得世界动物卫生组织（WAHO）认证，发病后7天即可检出，15分钟出结果，适用于全球180多个国家。这些工具为科学决策提供了“火眼金睛”。这些工具为早发现、早处理非洲猪瘟病毒提供坚实保障。 八方同创提醒：非洲猪瘟病毒可利用气溶胶、灰尘等载体，通过大风短距离传播。

非洲猪瘟病毒主要靶向巨噬细胞，并引起严重的免疫病理性细胞因子风暴，这与出血相关并导致严重的免疫失败后果。诱导这种先天免疫反应的机制尚不清楚，考虑到病毒有效关闭巨噬细胞细胞因子和干扰素反应的能力，这一点令人困惑。虽然其中一些反应是致病性的，但基本知识是早期先天免疫反应对于触发适应性免疫是必需的。例如，在免疫反应的先天阶段检测到早期干扰素α（IFN-α）和白细胞介素1受体拮抗剂（IL-1RA）与改善的结局相关。

总体而言，我们对先天免疫反应的诱导以及导致致命疾病或保护性免疫反应的转换机制的理解存在差距。从非洲猪瘟康复的动物完全排清病毒，并发展出对相似毒株甚至某些情况下对异源病毒攻毒的保护(Boinas,Hutchings,etal.2004;Burmakinaetal.2016;K.Kingetal.2011）。虽然这清楚地证明了适应性免疫的发展，但关于保护相关物和保护机制的信息非常不完整(Bosch-Camós,Lopez,andRodriguez2020;Carlson,O’Donnell,etal.2016)。文献中描述了大量病毒蛋白以及许多抗体和T细胞的病毒靶标，但尚未鉴定出完全保护的B细胞抗原或表位，已测试的T细胞表位在一些研究中介导部分保护。 非洲猪瘟弱毒活疫苗虽然在实验室条件下攻毒表现出保护，但是临床使用存在毒力返强，与野毒株重组的风险。中国雨季非洲猪瘟管理操作规程及配种有关规定

八方同创提醒：非洲猪瘟病毒在环境中抵抗力强，耐低温不耐高温，70℃以上50分钟可完全杀灭。马来西亚非洲猪瘟养殖技术要点

早发现、早处理是防控非洲猪瘟的重要手段，一线饲养员对临床症状的系统性观察十分重要。

八方同创经验表明，异常猪的早期识别是防控非洲猪瘟的主要措施。日常巡查需形成标准化清单，重点关注是否吃料、减料、死亡、扎堆、体温升高（＞40.5℃）、精神沉郁、食欲废绝、皮肤发红或发绀、呕吐、腹泻（尤其便血、血尿）、***、皮肤溃烂坏死及呼吸困难等非特异性症状。并记录异常猪所在栏位、同群猪状态及环境变化。任何疑似症状都不应视为个别现象，而应立即启动预警，将异常猪视为潜在传染源进行采样、隔离（不接触），并同步报告兽医及管理层。这种系统性观察是“预警”能否成功的先决条件。 马来西亚非洲猪瘟养殖技术要点

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