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RIP实验南京英瀚斯生物科技有限公司,医学科研的增强子。一站式医学科研外包服务平台。专业为您承担细胞实验外包,数据真实无重复,报告内容详尽。欢迎来电垂询。RNA免疫沉淀将所关注的蛋白质的抗体(2-10µg)加入上清液中(6-10mg),4℃轻柔搅动孵育2小时(至过夜)。2加入proteinA/G磁珠(40µL),4℃轻柔搅动孵育1小时。根据所关注的蛋白质和抗体,加入的抗体量和孵育时间可能需要进行优化。如果一种抗体可以用于IP,则表明它可能也能用于RIP。江西医学细胞实验外包细胞实验外包比较终交付的结果包括哪些?

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因为RIP做完得到的是RNA序列,要做后续检测,比如测序、判断目标序列位置等,是不是都必须要做RT-PCR,得到逆转录的DNA后,后面就跟ChIP相同了?细胞实验外包。常见的用realtimeqRT-PCR。如果对照的目的是保证两个样品间加入的细胞量一致或者进行定量,理论上说,使用input作为判别,计算不同样品上样量的差异。如果对照的目的是为了看IgG以及目的抗体富集的非特异性mRNA的量的话,那么可以找一个确定不会与目的抗体结合的RN**段设计primer进行qPCR,用来看IgG以及目的抗体拉下来的背景情况。RIP可以看成是普遍使用的染色质免疫沉淀ChIP技术的类似应用,但由于研究对象是RNA-蛋白复合物而不是DNA-蛋白复合物,RIP实验的优化条件与ChIP实验不太相同(如复合物不需要固定,RIP反应体系中的试剂和抗体相对不能含有RNA酶,抗体需经RIP实验验证等等)

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