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病理实验外包,病理染色常见染色介绍番红-固绿(骨)染色:番红O-固绿染色可直观反映关节软骨、软骨下的骨组织结构,软骨呈红色,成骨呈绿色,对比鲜明,区分清晰,在关节软骨及软骨下骨的形态学研究中备受青睐。嗜碱性的软骨组织与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨组织和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色。本质上,番红O与蛋白聚糖中的多聚阴离子物质(硫酸软骨素和硫酸角质素)成正向比例结合(离子浓度),不与胶原结合,可间接反应基质中蛋白聚糖的含量与分布。正常的软骨基质分布均匀一致,当软骨受到损伤时,创伤刺激可使软骨基质中糖蛋白立即释放活化,使基质成分发生变化,导致番红O淡染,甚至失染。固绿可与结构疏松的胶原纤维牢固结合,不宜褪色。简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→固绿染色→番红O染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→番红O-固绿染**(成骨呈绿色,软骨呈红色)。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测-病理染色实验外包检测。湖北病理实验外包检测

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病理实验外包,南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1.  冰冻切片室温晾干15 min,可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时(此步可不洗)。2.  滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液(抗体的量视组织大小而定,原则是可以均匀覆盖组织面,且保证整个过程中不会使组织干涸)。3.  将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒,室温孵育2小时或4℃过夜。4.  第二天先将湿盒放到37℃回温1 h,然后吸取片上的一抗进行回收,将切片插入到小染缸PBS冲洗。5.  滴加用PBS稀释好的二抗(避光)置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗,切片置于染缸内,PBS洗5 min×3次。6.  滴加DAPI工作液染核,室温10~20 min(工作浓度0.1%染色15 min)。7.  回收DAPI,滴加5-10 μl 抗荧光衰减封片剂或中性树胶,用处理干净的盖玻片封片,即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下观察拍照。8.  做好的片放在切片盒内,置于4℃冰箱,可保存一周左右。湖北病理实验外包检测南京病理实验外包检测,优先南京英瀚斯。

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病理实验外包,染色常见染色介绍天狼星红染色:主要由天狼星红染色液、Mayer苏木素染色液组成,主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中,在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费时,而采用天狼星红染色试剂便宜,操作简单。天狼星红染色液操作步骤1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。2、切片厚6μm,常规脱蜡至水。3、天狼星红染色液滴染1h。4、流水稍冲洗,去除切片表面染液。5、Mayer苏木素染色液染细胞核8~10min。6、流水冲洗10min。7、常规脱水透明,中性树胶封固。天狼星红染色可用作肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。

病理实验外包,病理染色组织脱水注意事项:1.脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。2.在更换高一级的脱水剂时,比较好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。3.在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。4.在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。5.如需过夜,应停留在70%酒精中。6.脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象实验外包、病理实验外包检测、细胞实验外包、分子实验外包。

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病理实验外包,病理染色HE染色常见问题:Q5:细胞核呈棕红色改变答:苏木素染液过度氧化;或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8),或在稀释的氨水溶液,或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡,这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6:伊红染色较淡答:伊红的PH改变了(PH可能已大于5);或反蓝液体未漂洗干净,残留后影响胞浆嗜酸性染色;或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策:检查伊红染色液PH,可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示,调整实验步骤。病理实验外包检测需要注意哪些方面。湖北病理实验外包检测

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病理实验外包,病理染色常见染色介绍VonKossa染色:简介:钙结节的形成为成骨细胞特有,Vonkossa染色法是染色矿化结节的经典方法,利用硝酸银与钙盐的复分解反应形成可被还原的银盐,在强光或紫外光下或者强还原剂作用下使其还原为黑色的金属银。简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→硝酸银滴染→苏木素染核→伊红染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→Vonkossa染**(钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,细胞核呈蓝色,背景呈红色;或者钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色,背景呈红色)。VonKossa染色利用金属离子置换反应检测组织中钙盐沉积,由硝酸银溶液中的银离子置换组织中沉积的钙离子。该染色可用于血管钙化的检测湖北病理实验外包检测

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