使用氨丁三醇缓冲体系可提高mRNA稳定性
近日,Moderna公司举办了第五届科学和技术日)活动。在报告中,该公司介绍了在改良mRNA疗法递送和稳定性方面的***进展。mRNA本身具有不稳定性,因此提高mRNA的稳定性在延长药物存储时间和保质期方面具有非常现实的意义。Moderna公司的研究人员在研究中发现,LNP配方中的可电离脂质的叔胺氮可以与mRNA产生化学反应,生成加合物。这种加合物会导致mRNA无法被翻译,从而降低mRNA编码的蛋白的表达。由于这种成份在多种包含可电离脂质的LNP配方中存在,这一降低mRNA表达能力的机制可能在业界***使用的LNP产品中存在。
该公司的研究指出,在携带mRNA的LNP生产过程中,需要使用不同手段降低加合物的生成,这可能带来多种益处,包括改善产品保质期,让产品能够在更高的温度下储存,并且维持产品的活性和制造批次之间的一致性。比如,Moderna指出使用Tris氨丁三醇缓冲液可以减少加合物的生成,允许mRNA产品在2-8℃环境下的长期储存。 注射级氨丁三醇怎么购买。河北复方氨丁三醇
缓冲盐氨丁三醇TRIS(供注射用)的原理及应用
艾伟拓新推出氨丁三醇(Tris),CDE,DMF申报中;氨丁三醇(Tris)在GMP条件下生产,国产化稳定供应,具有纯度高、杂质低等优点、性价比高!氨丁三醇(Tris)是一种缓冲盐,广泛应用于生物药学领域。化学式C4H11NO3,白色晶粒,常用于蛋白或核酸缓冲液,其有效范围通常是在pH7.0-9.2之间。Tris用于不同pH条件下蛋白质晶体的生长。氨丁三醇(Tris)也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。它在电泳缓冲液中与甘氨酸构形成缓冲体,稳定电泳过程中的pH值。此外,氨丁三醇(Tris)也是制备硫化促进剂、表面活性剂和一些药物的中间物,Tris也被用作滴定标准物。氨丁三醇(Tris)应用案例:①pH缓冲液(0.5M,pH7.6)用途:蛋白或者核酸的缓冲液。②Moderna**核酸疫苗缓冲液(mRNA-1273,pH7.0-8.0)用途:mRNA-LNP复合体的缓冲液。③缓血酸铵注射液用途:酸碱平衡调节药。用于急性呼吸性、代谢性酸血症。也应用在卡前列素氨丁三醇注射液,造影剂(碘海醇、碘普罗胺等) 贵州酮克酸氨丁三醇药用级氨丁三醇艾伟拓怎么购买!
Tris氨丁三醇缓冲剂在使用中的注意事项
上篇文章我们介绍了Tris氨丁三醇缓冲剂的优点,本篇文章我们来介绍一下Tris氨丁三醇缓冲剂在使用中的注意事项吧!使用Tris缓冲剂的注意事项:1.Tris氨丁三醇缓冲液的pH值受温度影响大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。2.Tris氨丁三醇缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.13.Tris氨丁三醇在一定程度上与各种分子反应,包括RNA酶抑制剂,醛,酶,DNA以及常见金属如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系统中会起抑制作用,在配制过程中需考虑与其他组分之间的相互作用;4.Tris氨丁三醇缓冲液易吸收空气中的CO2,配制的缓冲液要注意盖严密封;5.Tris氨丁三醇缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,需使用与Tris氨丁三醇溶液具有兼容性的电极;6.Tris氨丁三醇缓冲液不适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;7.吸入,摄入,皮肤吸收Tris氨丁三醇可造成伤害,操作时需戴好手套和护目镜;8.作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris氨丁三醇,比较好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
Tris缓冲体系广泛应用生物制剂研发与生产过程中,例如目前已上市的两款mRNA**疫苗均选用Tris/Tris-HCl作为其制剂缓冲体系,此外该缓冲体系还***用于抗体蛋白纯化等生物制剂生产环节。艾伟拓产品团队在此向您推荐一种操作简便且复现性较好的缓冲液配制方法:使用氨丁三醇(Tris)及盐酸氨丁三醇(Tris-HCl)固体粉末进行配制。使用时,可根据目标浓度及pH,计算并直接称取两种固体粉末混合,溶解定容,至于两种固体粉末的用量如何确认,您可以参考以下实验步骤以及艾伟拓实验室实测值,通过一个简单的预实验进行确认:1.分别配制目标浓度的Tris与Tris-HCl(这里以0.1mol/L为例)2.两种溶液分别取不同体积混合成相同体积(这里以100mL为例)的缓冲液,测定溶液pH.、摸索出两种溶液适宜比例后,根据计划配置的缓冲液体积,倒算两种固体粉末的用量。基于该方法,我们复现了Moderna的**mRNA疫苗中的Tris缓冲溶液,pH理论值为7~8,实测值为7.47(注:该实测值为溶液中*包含Tris/Tris-HCl,不含mRNA-LNP及其他辅料情况下的pH值)。该方法的优势是操作简便,只需称取及溶解两步,在外界温度及溶液浓度相同的情况下,复现性较好,且无需使用浓盐酸等严格受限的试剂。氨丁三醇艾伟拓如何购买。
生物制剂领域常用缓冲液
生物制剂领域常用的缓冲液主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统。生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。(1)硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。(2)柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。(3)磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
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使用注射级氨丁三醇缓冲剂的注意事项:1.注射级氨丁三醇缓冲液的pH值受温度影响大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。2.注射级氨丁三醇缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.13.Tris在一定程度上与各种分子反应,包括RNA酶抑制剂,醛,酶,DNA以及常见金属如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系统中会起抑制作用,在配制过程中需考虑与其他组分之间的相互作用;4.注射级氨丁三醇缓冲液易吸收空气中的CO2,配制的缓冲液要注意盖严密封;5.注射级氨丁三醇缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,需使用与注射级氨丁三醇溶液具有兼容性的电极;6.注射级氨丁三醇缓冲液不适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;7.吸入,摄入,皮肤吸收注射级氨丁三醇可造成伤害,操作时需戴好手套和护目镜;8.作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用注射级氨丁三醇,比较好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。河北复方氨丁三醇