病理实验外包，病理染色常见染色介绍VonKossa染色：简介：钙结节的形成为成骨细胞特有，Vonkossa染色法是染色矿化结节的经典方法，利用硝酸银与钙盐的复分解反应形成可被还原的银盐，在强光或紫外光下或者强还原剂作用下使其还原为黑色的金属银。简要流程：石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→硝酸银滴染→苏木素染核→伊红染色→脱水、透明、封片（中性树胶）→Vonkossa染**（钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色，细胞核呈蓝色，背景呈红色；或者钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色，背景呈红色）。VonKossa染色利用金属离子置换反应检测组织中钙盐沉积，由硝酸银溶液中的银离子置换组织中沉积的钙离子。该染色可用于血管钙化的检测病理实验外包检测，就找南京英瀚斯。河北生物病理实验外包哪家好
病理实验外包，病理染色常见染色介绍TUNEL染色：基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。实验步骤使细胞或组织贴在载玻片上➜固定➜洗涤➜通透➜洗涤➜预平衡➜用荧光素12-dUTP标记断裂的DNA链➜终止反应➜洗涤➜封片➜分析样品南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。河北生物病理实验外包哪家好病理实验外包，医学实验外包，动物实验外包，就找南京英瀚斯。
病理实验外包，南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1. 冰冻切片室温晾干15 min，可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时（此步可不洗）。2. 滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（抗体的量视组织大小而定，原则是可以均匀覆盖组织面，且保证整个过程中不会使组织干涸）。3. 将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。4. 第二天先将湿盒放到37℃回温1 h，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸PBS冲洗。5. 滴加用PBS稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI工作液染核，室温10~20 min（工作浓度0.1%染色15 min）。7. 回收DAPI，滴加5-10 μl 抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下观察拍照。8. 做好的片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。
病理实验外包，病理染色黏液物质（黏多糖）染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫（ABPAS）染色法（1956）红色：中性黏液物质蓝色：酸性黏液物质紫红色：混合性黏液物质2.爱先蓝（PH2.5）法蓝色：唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色：胞核不着色：强硫酸化黏液物质3、爱先蓝（PH1.0）法蓝色：含硫酸黏液物质不着色：非硫酸化酸性黏液物质红色：复染后的胞核南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。细胞组技术人员毕业于东南大学、华中科技大学等**高校生物学相关专业，具有硕士研究生以上学历，熟练掌握细胞学相关实验，可开展多种细胞实验
病理实验外包，病理染色切片常见问题及解决方法：1.切片弯曲且不能形成直带●原因：①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。●解决方法：①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器，使其与切片刀平行。③修整组织块时，注意修切整齐。④移动切片刀，更换刀口位置。2.切片上出现裂纹●原因：①切片刀上有小缺口，或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质，如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。●解决方法：①切片刀某处有缺口，可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整，可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次，然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质太多，则不宜用。③纠正包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层，即可放入冷水中。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测，免疫荧光染色，医学科研实验服务。青海整体病理实验外包哪家好
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病理实验外包，病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项：多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸，使溶液pH降低，从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同，应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和，但能硬化组织，固定时间过久会导致组织变脆，切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中，固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留，因此后续实验结果如果受醛基影响，须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基，使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇，使之不能充分暴露，可造成假阴性的染色，影响免疫组化结果。因此，4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时，有时需要对抗原先进行修复，然后才能进行免疫染色等后续操作。河北生物病理实验外包哪家好
