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要使外泌体在临床上得以更加广fan的应用，仍然需要更加深入的研究:(1)外泌体的提纯方式主要是超速离心，这种提纯方式效率较低，耗费时间长并且相对昂贵，并不适宜在临床上应用。(2)外泌体虽然具有一定的靶向性，但这种靶向性较弱，不足以解决中流的靶向zhiliao问题。通过在外泌体表面表达特异性肽的方法可以为上述问题的解决提供较为有效的途径。(3)在外泌体的载药fang式方面，现在常用的电穿孔法虽更具优势，但往往会对外泌体或药物的完整性产生影响，转染外泌体法不能保证基因类药物全部进入外泌体内而不是粘附在外泌体表面，存在着安全隐患。(4)外泌体作为细胞分泌物质，其本身可调性并不如脂质体以及聚合物基药物载体。外泌体就像是生物界的邮差，可以在细胞间运输和转移生物活性分子，是细胞间通讯交流的载体。江苏CD9外泌体慢病毒包装

外泌体不只可作为疾病诊断的生物标志，而且可作为天然的药物传递载体。外泌体能够负载的治理物质包括小分子化合物、蛋白质、寡核苷酸等，且在体液中宽泛分布且具有定向归巢能力。外泌体独特的生物兼容性、高稳定性、瘤靶向性使其在未来瘤治理中有很大的利用价值。外泌体能够装载的治理物质包括小分子化合物、蛋白质、寡核苷酸等。作为小分子化合物载体，外泌体装载姜黄素、紫杉醇、阿霉素等主要是用于抗瘤研究；已经发现外泌体可递送多种蛋白质，例如酶，细胞骨架蛋白质和跨膜蛋白质；外泌体作为核酸分子的药物载体主要用于基因治理，外泌体天然的可以携带遗传（例如miRNA，siRNA）到靶细胞中，从而在生物学和致病过程中诱导遗传修饰。江苏CD9外泌体慢病毒包装外泌体无法分析外泌体具有的生理功能，也是两种提取方法的问题所在。

外泌体的形成始于细胞内陷，成熟于多囊泡胞内体，终于膜融合。细胞通过内吞作用产生小囊泡，小囊泡融合形成早期胞内体（earlyendosome），在多个蛋白的协同调控下，早期胞内体出芽形成含有多个腔内小囊泡的多泡体（multivesicularbodies，MVB），这个过程中这些腔内小囊泡（intraluminalvesicles，ILVs）会装载各种核酸和蛋白质等分子，泡内体较后在GTPase家族中RAB酶的调节下与细胞膜融合。随后，这些小囊泡会被释放到细胞外，称为外泌体。外泌体是通过细胞内吞细胞膜融合主动排除的物质，大小均匀，而微泡是由细胞直接出芽脱落生成，大小不均一。

外泌体是各种细胞外泌的直径在30-100nm之间的膜囊泡。因外泌体内含mRNA、microRNA等核酸和蛋白质对相邻细胞具有交换信息的功能。作为细胞间信号传导的通讯工具和作为病等各种疾病的生物标记话题比较热门。近些年关于外泌体研究很普遍，但是关于外泌体相关的实验技术，关于需要改进的课题存在很多。例如，外泌体提纯方法中，超速离心法和聚合物沉淀法（市售试剂盒）混入多种杂质，给后续实验产生了许多障碍。抗体亲和法和密度梯度离心法，虽然可以提取到高纯度的外泌体，但不能提取完整外泌体，无法分析外泌体具有的生理功能，也是两种提取方法的问题所在。而免疫印迹法（WB）和Elisa检测法作为被普遍应用的外泌体检测的一般方法，又存在检测时需使用大量外泌体和难以检测到低表达水平的标记蛋白。外泌体在体液中十分稳定，同时外囊泡所含的蛋白质和RNA被外泌体的脂质双层膜所包被也不会分解。

由于特殊的结构和循环方式，外泌体作为药物运输的载体具有独特的优势。例如外泌体的尺寸分布能够增强渗透滞留效应，从而有选择性地深入中流组织;其外层磷脂双分子层可以保护内容物不受各种生物酶的影响，维持各种生物分子的活性;外泌体普遍存在于各种体液和组织中，其体积小，结构、组成与细胞膜类似，导致外泌体可以在避开免疫系统监督的同时深入组织内部，有较好的生物相容性;当采用内源外泌体时，能明显降低其他药物载体可能引起的有害免疫反应;除此之外，某些细胞来源或经特殊修饰过的外泌体具有良好的特异性，可以与特定的qi官或组织结合。几乎没有混入外泌体以外的蛋白，回收量高，操作重复性好。上清液提取试剂盒成分

外泌体在化疗药物的促转移过程中具有重要的作用。江苏CD9外泌体慢病毒包装

外泌体的提取方法：超速离心法，这是外泌体提取比较常用的方法。超速离心法得到的外泌的体量比较多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块，由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种方法得到的是微泡而不是外泌体。过滤离心法，这种操作简单、省时，不会影响外泌体的生物活性，但同样存在纯度不足的问题。密度梯度离心法，用此种方法分离到的外泌体纯度高，但是前期的准备工作繁杂，比较耗时，量少。江苏CD9外泌体慢病毒包装