选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。超滤离心管的选择需要根据被过滤溶液或混合物的性质和所需的纯度和体积来确定。广州蛋白分离离心管价钱多少
离心超滤装置用于浓缩和澄清过滤生物样品,蛋白纯化,颗粒物去除,血浆或血清过滤,以及从细胞裂解液或细胞培养上清去除细胞或细胞碎片。提供一系列离心设备,快速安全处理100 μl到100ml样品。可选抛弃型和可重复使用超滤装置。超滤离心浓缩管,用于生物样品浓缩。离心超滤管,简单快速,一步离心完成样品浓缩,起始样品体积可达500μl。可放入2.2ml角转子离心。垂直膜配合狭长的流道,有效地避免滤膜堵塞,提高浓缩速度,即使颗粒含量高的溶液,也同样能达到快速浓缩。在30分钟内就可达到超过90%的浓缩回收率。死端结构避免离心干燥样品。0.5ml-20ml样品处理量的超滤管,截留分子量2KDa-100KDa,规格齐全,浓缩回收率高、流速更快,较高达12000g的高速离心机,机械强度更好,质量更好,价格更优惠。广州蛋白分离离心管价钱多少使用超滤离心管时应注意避免污染和交叉传播,并对设备进行彻底清洁消毒。
当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。
注意:超滤离心管中的滤膜一旦润湿 后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用,则让液体保留在滤膜上,直到使用。6.使用方法:1).将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。2).向超滤管内管中加入不超过500 μL的样本,并盖上盖子。3).将盖好盖子的超滤管放入离心转子中,让盖子的连接带朝着转子的中间;用一个类似的超滤管平衡。4).以14,000 x g离心约10-30分钟,具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。5).离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。6).为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在-个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖子朝着转子的中间;用一个类似的超滤管进行平衡。以1 ,000 x g离心2分钟,使浓缩后的样本从超滤内管转移到收集管中。超滤液可以保存在收集管中。使用超滤离心管时要注意控制转速,以避免过度旋转导致超滤膜损坏或溢出样品。
超滤离心管具有快速超滤功能,能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本处理,获得较高样本回收率(通常> 90%) ,并达到30倍的浓缩。根据标称分子量限值(NMWL)的不同,典型处理时间为10-30分钟。超滤膜的垂直设计也较大程度降低了溶质极化造成的滤膜结垢;死体积设计能有效防止过度离心使样本干掉而造成样本损失。收集滤出液后,浓缩样本(截留部分)可通过一个简便的倒置(上下反转)离心步骤而实现高效回收。超滤管未经消毒,只供一次使用。超滤离心管通常由聚碳酸酯等材料制成,可承受高速旋转和高温高压。广州蛋白分离离心管价钱多少
使用超滤离心管时应注意选择正确的膜孔径,以确保所需分子能通过筛选过程。广州蛋白分离离心管价钱多少
超滤离心管是内部装有超滤膜的用于浓缩和净化生物样本的一次性耗材。15ML的超滤离心管可处理样品量达20ML,具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。竖式设计以及其双面的超大过滤面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至40分钟。竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至低,过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集,而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。该装置可在摆桶或定角转子中旋转。的离心管有超过7种不同的截留分子量(截留分子量,MWCO)3Kda,5Kda,10Kda,30Kda,50Kda,100Kda,500Kda等。广州蛋白分离离心管价钱多少