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使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞,加入去污剂,如sds等,除去膜脂。去除细胞内的蛋白质,包括与DNA结合的组蛋白,通过加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA,如实验不严密,可省略此步。沉淀DNA,需在冷乙醇或异丙醇中沉淀,放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上,原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结:DNA提取方法有下面⑦种一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。四.异丙醇沉淀法:基本同1法,*用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)五.表面活性剂快速制备法:用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和。北京植绒拭子和人造丝拭子植绒拭子的管体透明,检材情况直观可见。
梅里埃华晨阳植绒拭子与传统的拭子的比较图植尼龙拭子:出众的样品收集/释放能力,释放率>80%常规纤维拭子:样品被纤维团内间隙截留,即样品被渗透、稀释、截获在纤维内。Copan植绒拭子的特点全球***采用喷射密植尼龙纤维技术的拭子.根据分析项目不同对应有柔软或毛刷质地拭子,已达到比较大限度的收集量.全球***带折断点的一次性注塑拭子杆.植绒技术提升了标本的吸附/释放量,提高了分析的灵敏度。无样品截留,预示着能更快、更少地传递标本.典型的使用直立的尼龙纤维象一把柔软的刷子能更多的采集细胞标本。尼龙纤维间的毛细作用增强了水性样品的载量,而且样品都集中在拭子的表层更容易洗脱。植尼龙鼻咽拭子能吸附、释放更多的样品。软包装型号无菌**软塑纸包装尼龙植绒拭子货号描述包装规格501CS01尼龙纤维细头塑料拭子,可用于耳鼻喉科/尿道给药,无菌**软塑纸包装10x100pcs502CS01常规大小尼龙纤维头塑料拭子,可用于耳鼻喉科/尿道给药,无菌**软塑纸包装10x100pcs503CS01软杆尼龙纤维细头塑料拭子,可用于鼻咽?药,无菌**软塑纸包装10x100pcs509CS01尼龙纤维头塑料拭子,可用于宫颈给药,无菌**软塑纸包装10x50pcs511CS01柔软质地尼龙纤维头塑料拭子。
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