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使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞,加入去污剂,如sds等,除去膜脂。去除细胞内的蛋白质,包括与DNA结合的组蛋白,通过加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA,如实验不严密,可省略此步。沉淀DNA,需在冷乙醇或异丙醇中沉淀,放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上,原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结:DNA提取方法有下面⑦种一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。四.异丙醇沉淀法:基本同1法,*用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)五.表面活性剂快速制备法:用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和。河北植绒拭子生产地植绒拭子顶端为尼龙纤维结构。
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产品说明FLOQSwabs尼龙植绒拭子持有**的尼龙植绒拭子由一个固定模型的塑料涂抹器和可以改变大小及形状的取样头组成。涂抹器前列覆盖有以垂直方式固定的尼龙短纤维。这种垂直固定方法源于植绒工艺,即把拭子置于静电场中,将纤维喷涂于拭子前列。这种工艺能实现具有开放式结构,且吸水性超高的薄层。不同于以往类似褥垫或软垫的传统缠绕拭子,尼龙植绒拭子没有会分散和圈闭样本的内部吸附核,而是使样本紧贴表面,从而能够快速完全地洗脱。垂直尼龙短纤维的作用就像一把柔软的刷子,能有效改善对细胞材料的采集。纤维间的毛细管运动形成强大的液压,由此摄取液体样本;同时样本紧贴拭子表面,易于洗脱。尼龙植绒拭子用途***,在用于细菌学样本处理、***学细胞培养、DFA检验、快速直接的检验、酶免疫法检测、聚合酶链反应和基于分子诊断的检测,以及法医鉴定时都十分理想。货号:(旧货号552C)规格:100支一盒,1000支/箱(起拍)名称:普通尼龙植绒拭子,无菌独立包装(带套管)尼龙植绒拭子用途***,在用于细菌学样本处理、***学细胞培养、DFA检验、快速直接的检验、酶免疫法检测、聚合酶链反应和基于分子诊断的检测。植绒拭子独有的设计可避免外部空气中杂志污染,进而影响检验质量。
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