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支原体基本参数
  • 品牌
  • 世途科生物
  • 型号
  • CM0001
支原体企业商机

LAMP法,即环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification),是一种在恒定温度下进行的核酸扩增方法。它由日本学者Notomi于2000年开发。LAMP法检测有以下特性:
快速高效:LAMP技术可以在1小时内把几拷贝的目的序列迅速扩增到10^9^~10^10^拷贝,扩增效率高。
简便性:LAMP技术不需要进行模板的预变性,减少了PCR技术升降温带来的影响以及对昂贵、精密实验仪器的要求,同时扩增效率高,可以在较短时间内完成检测。
LAMP法因其快速、高效、特异、灵敏和经济等优点,已经应用于病原菌、寄生虫、病毒、疾病和转基因产品检测等领域,并且还将广泛应用于临床诊断、环境监测、食源安全等领域,具有更为广阔的发展应用前景。
支原体检测PCR法和LAMP方法的优劣势比较。苏州细胞培养支原体检测方法恒温扩增

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细胞培养中支原体污染会对实验结果产生多方面的影响,具体包括:
1. 细胞生长受影响:支原体污染可能导致细胞生长速度减慢,甚至停滞。
2. 细胞形态改变:支原体感*的细胞可能会出现形态的改变,如细胞体积增大、形态不规则等。
3. 细胞功能改变:支原体污染会影响细胞的代谢、增殖、分化等生理功能。
4. 细胞产物改变:支原体感*可能影响细胞产生的蛋白质、细胞因子等生物活性物质的表达和分泌。
5. 实验结果不准确:支原体污染会干扰实验结果的准确性,导致实验数据不可靠。
6. 实验重复性差:支原体污染的细胞培养批次间差异大,影响实验的重复性。
7. 影响后续实验:支原体污染的细胞培养产物用于后续实验,如转染、基因编辑等,可能会影响实验效果。
8. 影响细胞培养产物的质量:支原体污染会影响细胞培养产物的质量,如疫苗、生物制品等。
9. 增加研究成本:支原体污染需要花费额外的时间和成本进行检测、处理和重复实验。
南京细胞培养支原体检测方法bst支原体去除之后对细胞检测有无影响?

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支原体污染后的细胞是否应该直接丢弃还是尝试重新培养,这取决于多种因素,包括细胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法来清*支原体。以下是一些处理支原体污染的常见方法:
1. 直接丢弃:对于非重要的细胞,如果培养中的细胞、WCB的细胞等,可以采取直接将培养物与用过的培养基灭活后丢弃的方式。
2. 使用支原体清除剂:支原体清除剂处理细胞,作用浓度为25μg/ml,两周可以清*支原体。
3. 使用支原体清*培养基:每2~3天更换一次新鲜培养液,并用无菌的PBS洗涤细胞,处理15天后进行支原体检测,以确定支原体是否被完全去除。
4. 支原体去除试剂:这是一种混合制剂,可以通过抑制DNA和支原体生长所必须的相关蛋白合成来取得良好的支原体清*效果,且对细胞无伤害

支原体预防的实验步骤主要包括以下几个方面:
1. 无菌操作技术:在细胞培养过程中,严格遵守无菌操作规程,包括穿戴适当的实验服、手套,使用无菌工具和耗材。
2. 环境控制:保持实验室环境清洁,定期消毒工作台和实验室表面,使用层流罩或生物安全柜进行细胞操作。
3. 细胞培养基和试剂的无菌过滤:所有加入到细胞培养基中的试剂和补充物,如血清、抗*素等,都应通过无菌过滤以去除支原体。
4. 细胞培养基和试剂的检测:在添加到细胞培养物之前,对新的细胞培养基和试剂进行支原体检测,以确保它们没有被污染。
5. 定期检测:即使采取了预防措施,也应定期对细胞培养物进行支原体检测,以确保及时发现并处理潜在的污染。
6. 避免交叉污染:避免从一个细胞培养物到另一个的交叉污染,使用的移液器和工具,避免在不同细胞培养物之间重复使用。
7. 细胞培养物的筛选:使用已知无支原体污染的细胞株进行实验,或者在开始实验前对细胞株进行筛选。
8. 使用预防性试剂:在某些情况下,可以在细胞培养过程中添加特定的预防性试剂,如支原体预防剂,以降低污染风险。
细胞培养支原体污染怎么检测?

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支原体污染是细胞培养中普遍的问题之一,细胞库中或正在使用的细胞中,支原体的污染率约为15%-35%。并对培养细胞的生理和代谢造成诸多影响:
01/ 争夺营养:支原体的污染会阻碍细胞生长和增殖 
02/ 改变蛋白质、RNA 或 DNA 合成的水平 
03/ 改变基因表达、细胞信号传导和形态 
04/ 损害膜和细胞器 
05/ 导致突变和染色体变化 
06/ 时间、金钱和有价值的细胞丢失:支原体的污染会导致严重的经济损失以及研究时间损失
07/ 实验结果的不可靠性 
08/ 生物安全问题
支原体检测假阴性的原因?杭州细胞培养支原体检测方法恒温扩增

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LAMP法,即环介导等温扩增法(Loop-mediated isothermal amplification),在支原体检测中的应用具有以下特点和应用场景:
1. 日常监测:由于LAMP法的快速和简便性,它适用于生物实验室的日常监测,可以及时检测出支原体的存在,确保实验结果的准确性和可靠性。
2. 疾病诊断:LAMP法已被成功应用于SARS、禽流感、HIV等疾病的检测中,并在2009年甲型H1N1流感事件中发挥了重要作用。
3. 临床应用:LAMP法在临床样本的检测中显示出了快速、高灵敏度和稳定性,可以用于检测实验室样本及临床样本中的支原体。
4. 多病原体检测:LAMP法可以同时检测多种病原体,包括肺炎支原体在内的多种下呼吸道感*的病原体,为临床诊疗提供询证依据。
5. 与其他技术结合:LAMP法可以与CRISPR-Cas12a等其他技术结合,建立新的检测方法,提高检测的效率和准确性。
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在细胞培养领域,支原体更是一个让人头疼的难题。如果细胞培养体系被支原体污染,会严重影响实验结果的准确性。被污染的细胞可能生长异常、代谢紊乱,甚至死亡。这不仅浪费了大量的时间和资源,还可能导致错误的科学结论。然而,支原体并非只有负面作用。在自然界中,它们也可能在生态系统中发挥着一定的作用。比如,支原体可能参与有机物的分解和转化,对维持生态平衡有一定的贡献。对于支原体的研究,一直是生命科学领域的重要课题之一。科学家们试图揭开支原体的神秘面纱,了解它们的生物学特性、致病机制以及与其他生物的相互作用。通过深入研究支原体,我们可以更好地预防和医疗由支原体引起的疾病,同时也能在细胞培养等领域采取更有效的措...

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