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支原体基本参数
  • 品牌
  • 世途科生物
  • 型号
  • CM0001
支原体企业商机

方法

灵敏度

优势

劣势

培养法

☆☆☆

ü 便捷

ü 便宜

ü 金标准

ü 费劳力

ü 耗时长

ü 需要特定的培养基

ü 特定支原体种类需要特定的培养基

DNA染色

(DAPI or Hoescht)

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 可能难以判读结果

ü 无法鉴别支原体种属

ü 可能假阳性可能性

间接染色

☆☆☆

ü 迅速

ü 便宜

ü 易检测

ü 费时

ü 需要细胞系指示

ELISA

☆☆

ü 迅速

ü 客观,易判读结果

ü 可以鉴别支原体种属

ü 受抗体限制

ü 价格高

免疫染色

☆☆

ü 迅速

ü 可检测支原体种属

ü 价格略高

ü 可检测的支原体种属有限

放射自显影

☆☆

ü 迅速

ü 难以判读结果

ü 无法鉴别支原体种属

ü 费劳力

生物发光

☆☆

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 难以判读结果

ü 无法鉴别支原体种属

PCR

☆☆☆

ü 便宜

ü 迅速

ü 具有特异性

ü 可能假阳性可能性

ü 检测特异性依赖引物特异性

ü 需要提取DNA

Real-Time PCR

☆☆☆

ü 便捷

ü 迅速

ü 具有特异性

ü 结果可靠

ü 高通量

ü 可能假阳性可能性

ü 检测特异性依赖引物特异性

ü 需要提取DNA

LAMP

☆☆

ü 便捷

ü 无需DNA提取

ü *需10min左右的实验操作时间

ü 具有特异性

ü 高通量

ü 可能假阳性可能性

ü 检测特异性依赖引物特异性 支原体污染源和主要类型?杭州支原体去除试剂

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支原体预防的策略主要包括以下几个方面:
1. 控制污染源:通过定期检测和去除细胞培养中的支原体污染,确保细胞培养体系内无支原体存在,从而获得准确有效的实验数据。
2. 改善无菌操作技术:通过提高实验人员的操作技术和意识,避免在细胞培养过程中引入支原体污染。
3.使用无菌设备和耗材:使用无菌的细胞培养设备和耗材,如无菌培养基、血清等,减少支原体污染的风险。
4. 定期消毒和清洁:对实验室环境进行定期的消毒和清洁,包括工作台、培养箱等,以减少支原体的潜在污染。
5. 使用预防性试剂:使用专门针对支原体的预防性试剂,如加入细胞培养基中的预防剂、超净台喷雾、水浴锅预防和细胞培养箱水盘预防等,以预防支原体污染。
温州细胞培养支原体预防价格支原体去除试剂使用之后,对支原体的检测是否有影响?

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细胞培养过程中如果发现支原体污染,可以采取以下一些方法尝试去除污染:

1. 抗*素治*:使用针对支原体有效的抗*素,如四环素类、大环内酯类、氟喹诺酮类等。根据搜索结果,可以加入高浓度抗*素进行冲击治*,例如庆大霉素 200ug/ml,四环素10ug/ml,卡那霉素50ug/ml,并维持24-48小时后再换入常规培养液。
2. 加温处理:支原体不耐热,可以将细胞置于41°C中处理5-10小时以杀灭支原体。但需注意,高温也可能对细胞造成伤害,因此需要预先确定对细胞影响较小的处理时间。
3. 使用支原体清除剂:市场上有专门的支原体清除剂,按照产品说明使用。
4. 使用支原体清*培养基:如Procell支原体清*培养基,这类产品含有清*支原体的特殊成分,可以抑制支原体生长并挽救珍贵细胞。
5. 物理方法:一些实验室采用过滤的方法,使用0.22μm或更小孔径的滤膜过滤培养基和试剂,以阻止支原体的侵入。
6. 细胞传代:在一些情况下,通过细胞传代可能有助于减少支原体的污染程度。

支原体检测实验方法需要考虑以下几个关键点:
1. 样本的采集与处理:确保样本的采集和处理过程符合无菌操作规范,避免交叉污染。
2. 实验操作的标准化:制定详细的实验操作流程,包括样本接种、培养条件、观察时间点等,以保证实验的可重复性和准确性。
3. 使用适当的培养基:根据支原体的特性选择合适的培养基,如支原体肉汤4. 培养基、精氨酸支原体肉汤培养基等,并确保培养基的灵敏度和特异性。
5. 设置对照组:实验中应包括阳性对照和阴性对照,以验证实验方法的有效性和排除假阳性或假阴性结果。
支原体及污染方式有哪些?

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对于同一个样品,如果PCR检测结果为阳性而一步法恒温检测试剂盒结果为阴性,可能的原因包括:

1. 灵敏度差异:PCR方法通常具有较高的灵敏度,可以检测到单个拷贝的支原体DNA。相比之下,一步法恒温检测试剂盒可能需要更高的支原体拷贝数才能检测出阳性结果,例如需要10^3个拷贝。如果样品中的支原体数量低于一步法试剂盒的检测阈值,就可能出现PCR阳性而一步法阴性的情况。
2. 检测范围:PCR检测可以针对特定的支原体序列设计引物,如果样品中的支原体种类或序列与一步法试剂盒的检测范围不完全匹配,可能导致一步法检测不出。
3. 样品处理和提取:一步法恒温检测试剂盒可能对样品的处理和DNA提取有特定的要求。如果样品处理不当或DNA提取效率不高,可能会影响一步法试剂盒的检测结果。
4. 试剂盒特异性:一步法恒温检测试剂盒可能设计用于检测特定的支原体种类,如果样品中的支原体与试剂盒的特异性不匹配,可能导致假阴性结果。
5. 抑制物的影响:PCR检测可能对样品中的某些抑制物不那么敏感,而一步法恒温检测试剂盒可能更容易受到这些抑制物的影响,从而降低检测的灵敏度。
支原体预防主要是什么成分?北京细胞培养支原体预防多少钱

支原体的检测方法有哪些?杭州支原体去除试剂

支原体是细胞外生存的 小微生物,是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.2~0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝形、分枝状等多种态。
1、支原体存在于我们周围,他可能就如尘埃一样存在于我们的环境中
2、可透过一般的滤膜,所以不要寄希望于过滤可以清楚支原体污染的液体
支原体对培养细胞的污染发生率高,据估计平均发生率在60%左右。同时又非常隐秘,早期不容易被发现,除非用特异性和灵敏度都非常高的检测试剂盒。支原体因为个头小,能穿过0.22微米滤器,并且在实验室内会潜在的扩散。支原体污染使得用被污染的细胞样本做的实验完全失去意义和价值。
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