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杭州细胞支原体检测说明书

目前有 210 +种不同种类的支原体分布于人类、动物、昆虫和植物中，其中 20 +种在细胞培养中被发现为污染物。支原体在...

支原体基本参数

品牌
世途科生物
型号
CM0001

支原体企业商机

目前有 210 +种不同种类的支原体分布于人类、动物、昆虫和植物中，其中 20 +种在细胞培养中被发现为污染物。支原体在实验室中的传播来源多种多样，主要来源包括实验室人员、胎牛血清（FBS）或新生牛血清（NBS）、以及由猪来源的胰蛋白酶溶液。此外，来自其他实验室或商业供应商的细胞培养物、培养基、污染的试剂；非无菌供应品、培养基和溶液；实验室人员；培养箱；液氮；空气颗粒和气溶胶；抗*素的过度使用；细胞培养器皿的不正确密封；以及其他的支原体细胞培养物等都可能成为支原体的传播途径。
支原体预防的实验步骤？杭州细胞支原体检测说明书

支原体污染后的细胞是否应该直接丢弃还是尝试重新培养，这取决于多种因素，包括细胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法来清*支原体。以下是一些处理支原体污染的常见方法：

1. 直接丢弃：对于非重要的细胞，如果培养中的细胞、WCB的细胞等，可以采取直接将培养物与用过的培养基灭活后丢弃的方式。

2. 使用支原体清除剂：支原体清除剂处理细胞，作用浓度为25μg/ml，两周可以清*支原体。

3. 使用支原体清*培养基：每2~3天更换一次新鲜培养液，并用无菌的PBS洗涤细胞，处理15天后进行支原体检测，以确定支原体是否被完全去除。

4. 支原体去除试剂：这是一种混合制剂，可以通过抑制DNA和支原体生长所必须的相关蛋白合成来取得良好的支原体清*效果，且对细胞无伤害

广州细胞支原体去除试剂现货支原体去除试剂使用之后，对支原体的检测是否有影响？

细胞培养中支原体污染的检测方法有多种，以下是一些常用的检测手段：

1. 显微镜检测：通过相差显微镜观察细胞，支原体在细胞表面和细胞之间会呈现为暗色微小颗粒。

2. 荧光染色法：使用荧光染料Hoechst 33258与DNA特异性结合，使支原体的DNA着色，然后在荧光显微镜下观察。染色后的支原体会在细胞周围或附于细胞膜表面显示为亮绿色小点。

3. 电镜检查：使用扫描电镜或透射电镜观察，这是一种简便快速的方法。

4. 聚合酶链反应（PCR）：使用特定的引物对支原体DNA进行扩增，是一种高灵敏度的检测方法。

5. 等温扩增法：基于LAMP技术，室温反应后观察颜色变化确认是否有支原体污染。

方法	灵敏度	优势	劣势
培养法	☆☆☆	ü 便捷 ü 便宜 ü 金标准	ü 费劳力 ü 耗时长 ü 需要特定的培养基 ü 特定支原体种类需要特定的培养基
DNA染色 (DAPI or Hoescht)	☆	ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜	ü 可能难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 可能假阳性可能性
间接染色	☆☆☆	ü 迅速 ü 便宜 ü 易检测	ü 费时 ü 需要细胞系指示
ELISA	☆☆	ü 迅速 ü 客观，易判读结果 ü 可以鉴别支原体种属	ü 受抗体限制 ü 价格高
免疫染色	☆☆	ü 迅速 ü 可检测支原体种属 ü 价格略高	ü 可检测的支原体种属有限
放射自显影	☆☆	ü 迅速	ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 费劳力
生物发光	☆☆	ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜	ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属
PCR	☆☆☆	ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特异性	ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA
Real-Time PCR	☆☆☆	ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特异性 ü 结果可靠 ü 高通量	ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA
LAMP	☆☆	ü 便捷 ü 无需DNA提取 ü *需10min左右的实验操作时间 ü 具有特异性 ü 高通量	ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性支原体检测方法qPCR法？

一步法快速支原体检测的原理主要基于等温扩增技术，这是一种在恒定温度下进行的核酸扩增方法。以下是具体的步骤和原理：

1. 等温扩增技术：一步法快速支原体检测试剂盒利用LAMP（Loop-Mediated Isothermal Amplification，环介导等温扩增）技术或类似的等温扩增技术。这些技术允许在恒定温度下进行DNA的快速扩增，通常在60-65°C之间。

2. 特异性引物：该方法使用设计好的特异性引物，这些引物靶向支原体DNA的保守区域。引物的设计确保了扩增过程的特异性，从而减少非目标序列的扩增。

3. 快速扩增：在适宜的条件下，等温扩增技术可以在15至60分钟内实现高达10^9至10^10倍的核酸扩增，从而快速检测出支原体的存在。

4. 颜色变化指示：一步法试剂盒中通常包含有颜色指示剂，当支原体DNA被扩增时，反应液的颜色会发生变化，从而可以通过肉眼直接观察到检测结果。例如，从蓝紫色变为天蓝色，表示样本中存在支原体。

5. 操作简便：一步法支原体检测不需要复杂的设备，通常只需要水浴锅或PCR仪即可完成操作，使得检测过程更加简便快捷。

科研中常见的支原体检测方法？南京细胞支原体检测试剂

支原体及污染方式有哪些？杭州细胞支原体检测说明书

支原体去除试剂在清*支原体的过程中可能会对细胞的生长状态产生一定的影响。支原体去除试剂是一种非抗*素类试剂，它通过与支原体膜特异性结合，改变支原体膜的通透性，从而导致支原体破裂死亡。尽管该产品在作用期间可能会对细胞的活力和形态有一定的影响，但由于它不能穿过真核细胞的细胞膜，因此不会改变细胞的任何特性。支原体被清*后，细胞在后续的传代过程中能快速恢复其正常的生长和增殖状态，细胞后续的生长增殖几乎无影响。

此外，该产品不含抗*素，不会使支原体发生耐药反应，细胞毒性小。然而，需要注意的是，不同细胞对支原体去除试剂的耐受程度有所差异，可以根据实验结果适当调整细胞量和处理条件。在某些情况下，如果出现细胞变形、生长缓慢等现象，可以更换成标准培养液终止作用，或者调整去除试剂的使用浓度和作用时间。

杭州细胞支原体检测说明书

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