常见的二代测序平台有哪些?
二、IonTorrent系列
包括Proton/PGM等型号,其技术基于半导体芯片,可检测DNA聚合反应中释放的氢离子,从而实现对DNA序列的测定,通量适中,测序速度快,适用于快速检测和一些临床诊断应用,如病原体检测等.
华大智造系列DNBSEQ-T7/T20:通量高,能够快速完成大量样本的测序工作,适用于大规模的基因组学研究和临床检测项目,如群体基因组测序、**基因突变检测等.MGISEQ-2000:性能稳定,可提供准确可靠的测序数据,在转录组测序、全基因组甲基化测序等多种应用场景中都有良好表现.
赛纳生物S100利用流式荧光发生测序化学技术和ecc纠错编码测序技术,将测序精度提升至Q40,可检出0.1%低频突变,在bitseq简并测序模式下,**快6.5小时完成基因测序,适用于未知病原微生物等亟需快速检测的场景. 二代测序使用的是哪种设备?二代测序运用
二代测序—全外显子测序的原理是什么?全外显子测序主要是利用序列捕获技术,将基因组DNA中的外显子区域富集起来,然后通过高通量测序技术(如第二代测序技术Illumina测序平台)对富集后的外显子DN**段进行测序。其大致步骤包括DNA提取、片段化、文库构建、外显子捕获、测序和数据分析等。例如,在文库构建过程中,将提取的基因组DN**段化后,在片段两端连接上特定的接头序列,这些接头序列可以用于后续的扩增和测序反应。然后通过与外显子区域互补的寡核苷酸探针,将外显子片段从全基因组DNA文库中“捕获”出来,经过清洗去除未结合的DN**段后,对捕获的外显子文库进行大规模的平行测序。长宁区哪里有二代测序检测denovo测序是二代测序吗?
常见的二代测序类型②
靶向测序:聚焦于特定的基因或基因区域进行重点测序,如对已知与某种疾病相关的基因**测序,具有成本低、效率高、数据解析简单等优点,广泛应用于疾病诊断、药物靶点筛选和临床个体化***等.
微生物基因组测序:用于检测和分析环境、人体或其他样本中的微生物群落的基因组组成,可了解微生物多样性、功能及与宿主相互作用,在微生物生态学、传染病诊断、环境科学等领域有重要应用.
甲基化测序:主要研究DNA甲基化修饰情况,对基因表达调控等有重要意义,通过检测甲基化水平变化,可探究疾病发***展机制、寻找生物标志物及药物靶点等.
二代测序应用于蛋白组测序的常见方式②?
结合质谱技术的联合分析
原理:质谱技术是目前蛋白组学中鉴定和分析蛋白质的**技术。它可以将蛋白质酶解成肽段后进行离子化,然后根据不同肽段在质谱仪中的质荷比等特征来确定肽段的序列,进而推导出蛋白质的序列信息。二代测序在这里的作用是辅助质谱分析,比如对样本进行转录组测序,获得基因序列信息,帮助构建蛋白质序列数据库。当质谱检测到肽段后,可以基于这个参考数据库更精细地匹配和鉴定出对应的蛋白质,同时也有助于分析蛋白质的可变剪接产生的异构体等复杂情况。
应用案例:在**研究中,获取**组织和相邻正常组织样本。先通过二代测序构建该组织对应的转录组序列数据库,然后利用质谱分析**组织中的蛋白,借助之前构建的数据库,能够准确鉴定出许多在**中特异性表达或表达量发生***变化的蛋白质,进一步研究这些蛋白质在**发***展中的作用,像发现某些参与细胞信号转导通路的蛋白出现异常表达,可能与肿瘤细胞的增殖、转移等特性相关。 二代测序是为了改进一代测序通量过低的问题而出现的。
二代测序在代谢组研究中的应用途径①
通过转录组测序关联代谢组
原理:转录组测序借助二代测序技术可以获取细胞或组织中所有mRNA的表达信息。由于基因表达**终会影响代谢过程,mRNA转录水平的变化往往会导致后续代谢途径中关键酶的表达改变,进而影响代谢物的合成与转化。例如,当某个参与糖代谢途径的关键酶基因转录上调时,对应的酶含量可能增加,从而加速该代谢途径的运转,使代谢产物的量也随之发生变化。
案例:在植物抗逆研究中,对遭受干旱胁迫的植物和正常生长的植物分别进行转录组测序。发现许多与渗透调节物质(如脯氨酸、甜菜碱等)合成相关的基因转录水平在干旱胁迫植株中显著提高。再结合对植物代谢组的分析,的确检测到脯氨酸、甜菜碱等代谢物的含量明显增多,表明植物通过调节基因转录来改变代谢,以适应干旱环境。
二代测序技术的出现,使科研人员能够以相对较少的经费获得海量 DNA 序列。福建哪里有二代测序分析
二代测序广泛应用于医学研发。二代测序运用
微生物基因组——数据组装后的分析步骤
基因预测:利用软件如Prokka等进行基因预测。这些软件会根据微生物基因组的序列特征,识别出可能的基因区域。例如,通过寻找开放阅读框(ORF)来确定基因的位置和范围。对于细菌基因组,由于其基因结构相对简单,基因预测的准确性相对较高。在预测过程中,软件会考虑密码子偏好性等因素,这是不同微生物在长期进化过程中形成的对特定密码子使用频率的差异。
基因功能注释:将预测出的基因与公共数据库(如KEGG、Swiss-Prot等)进行比对,以确定基因的功能。例如,通过比对KEGG数据库,可以了解基因在代谢通路中的作用。如果一个基因与数据库中某个已知的参与糖代谢的基因高度相似,那么就可以推测这个基因在微生物的糖代谢过程中可能发挥类似的功能。同时,还可以利用InterPro等工具对基因进行蛋白质结构域分析,进一步了解基因的功能特性。 二代测序运用