Huachenyang(Shenzhen)TechnologyCoLtd私人医院,**诊断中心,三家医院.分子诊断,细胞学,病理学,科研。实验室.口腔拭子DNA提取介绍所述iCleanhcy®的DNA口腔细胞的试剂盒允许从人口腔拭子的基因组DNA的快速和有效的纯化。DNA样本准备裂解液后,您可以在使用iCleanhcy不到15分钟纯化DNA技术。根据所使用的DNA纯化试剂盒,可以使用液体处理机器人单独或在自动化系统中处理样品。对于套件预期用途的iCleanhcy®设计DNA口腔细胞试剂盒以允许从人颊细胞拭子或来自漱口水/或者唾液采集器手机人体唾液的沉淀细胞中分离以下量的基因组DNA。在加工前,样品可以在4°C下储存长达2周,而DNA产量或质量没有明显损失,不会降解。纯化的基因组DNA适用于下游应用,例如PCR,芯片.iCleanhcy®的DNA归口腔细胞培养基:在150微升的总体积在1-3毫微克/微升的浓度制作的基因组DNA的归一化产率。iCleanhcy®的DNA口腔细胞培养基:纯化的基因组DNA的6微克。重要提示:DNA产量各不相同,取决于几个因素,包括服用拭子的人的技术,供体是高还是低的脱落剂,以及使用的拭子类型。优点使用iCleanhcy的®的DNA口腔细胞的试剂盒。植绒拭子没有标本参量,加快标本过程处理。辽宁植绒拭子采集的标本类型

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使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞,加入去污剂,如sds等,除去膜脂。去除细胞内的蛋白质,包括与DNA结合的组蛋白,通过加入蛋白酶,醋酸盐沉淀,或者酚/氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA,如实验不严密,可省略此步。沉淀DNA,需在冷乙醇或异丙醇中沉淀,放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上,原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结:DNA提取方法有下面⑦种一.酚抽提法:先用蛋酶K、SDS破碎细胞,消化蛋白,然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法:破碎细胞同上,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合,再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。四.异丙醇沉淀法:基本同1法,*用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)五.表面活性剂快速制备法:用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或酚去除蛋白,乙醇沉淀或透析。六.加热法快速制备:加热96℃-100℃,五分钟,然后离心后取上清,可用于PCR反应。七.碱变性快速制备:先用NaOH作用20分钟,再加HCI中和。
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