材料:质粒DNA指数生长的真核细胞PEI(聚乙烯亚胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI储存液(100μM):称取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm滤膜过滤,储存于4℃备用。1×HBS(pH7.4):将8.76gNaCl溶解于900ml超纯水,加入20ml1M的HEPES,调pH值到7.4,定容至1L,过滤(0.2μm滤膜)后储存于4℃备用。方法:1.细胞分盘:通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上(根据实验需要选择培养皿,使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90%)。根据细胞贴壁情况于含5%CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题,欢迎咨询上海曼博生物。PEI转染试剂会有毒性吗?不同分子量PEI转染试剂protocol

KyforaBiobyPolysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的产品,因其较高的转染效果,已广泛应用于工业化生产。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子,每相隔二个碳原子,即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子,使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体(protonsponge)。PEI可用作转染试剂,它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明,分子量为25000的线性PEI即KyforaBiobyPolysciences23966(PEI25K)转染效率表现优良。请关注我们的公众号:Mine-bio重庆PEI转染试剂怎么样线性的和分支的PEI转染试剂哪个好?

材料:质粒DNA指数生长的真核细胞PEI(聚乙烯亚胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI储存液(100μM):称取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm滤膜过滤,储存于4℃备用。1×HBS(pH7.4):将8.76gNaCl溶解于900ml超纯水,加入20ml1M的HEPES,调pH值到7.4,定容至1L,过滤(0.2μm滤膜)后储存于4℃备用。方法:1.细胞分盘:通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上(根据实验需要选择培养皿,使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90%)。根据细胞贴壁情况于含5%CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。欢迎咨询上海曼博生物。
注意事项质粒质量:请务必使用高质量转染级无内质粒(推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒)。通过260nm光吸收测定DNA浓度,260nm/280nm比值确定DNA纯度(比值应该在1.8~2.0的范围之内)。如有可能,请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件:使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。如想申请PEI试用装,欢迎关注公众号:Mine-bio,回复“申请PEI”,即可参加!用PEI转染时,一般和DNA的比例是?

PEIMAX粉末配置方法:1)将1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃烧杯中;2)放入搅拌转子,放置于磁力搅拌器上,设置搅拌程序以形成一个较小的漩涡;3)等待PEIMAX40K完全溶解,通常需要5分钟左右;4)用25mL塑料移液管加入1N氢氧化钠滴定至pH6.9~7.1;5)如果不小心超过7.1,则使用1N的盐酸和新的塑料移液管将pH重新滴定至6.9~7.1;6)将溶液转移到1L玻璃量筒中,加入水定容至1L;7)用无菌真空过滤膜过滤配制的转染试剂溶液;8)按需分装,4°C储存(切记不可冷冻);注:未经配制的粉末有效期为2年。配置成液体后分装在合适的瓶子中,并且保存在4℃的转染试剂将可在6个月之内保持性能。如jin用于蛋白定性研究,分装的转染试剂可延长有效使用期至1年。
PEI转染试剂包装病毒的滴度有多高?重庆PEI转染试剂怎么样
PEI转染试剂,科学界的得力助手,加速基因功能研究步伐。不同分子量PEI转染试剂protocol
产品简介Transporter5转染试剂是一种非GMP等级的即用型线性聚乙烯亚胺(PEI转染试剂)溶液,由PEIMAX配置而成,采用0.1umPES无菌过滤器,完全消除支原体污染风险。Transporter5将DNA缩聚成带正电荷的复合物,这些复合物很容易通过内吞作用进入细胞,并且Transporter5-DNA复合物能很好地抵御溶酶体的降解作用,有效提高转染效率。适用于工艺开发、临床前和早期临床研究,可无缝过渡到MAXgeneGMP用于商业化生产。Transporter5转染试剂能高效地将DNA转染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆虫(SF9、SF21)等真核细胞系,可作用于大到135,000个核苷酸的质粒,所以较大的质粒也可以成功地转染。Transporter5可节省试剂准备时间,加快项目进度。经过严格的性能检测,确保品质,在新药研发过程中是一款快速、重复性好、可用于批量产的转染试剂。更多关于KyforaBiobyPolysciencesPEI转染试剂,欢迎咨询上海曼博生物!不同分子量PEI转染试剂protocol
1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板...
【详情】1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板...
【详情】接种细胞:转染前,用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,总...
【详情】瞬时转染方法1.接种细胞:转染前一晚,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细...
【详情】接种细胞:转染前,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰...
【详情】特别提醒1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前...
【详情】瞬时转染方法1.接种细胞:转染前,用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细...
【详情】材料:质粒DNA指数生长的真核细胞PEI(聚乙烯亚胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI储存液(1...
【详情】瞬时转染方法1.接种细胞:转染前一晚,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细...
【详情】1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板...
【详情】瞬时转染方法1.接种细胞:转染前,用胶原酶消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细...
【详情】上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务,以创新和为价值理念,通过自身...
【详情】