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下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增，方法如下：将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀；然后再加入200μL核酸释放剂，涡旋1min至沉淀完全散开，5000g离心30s，弃上清；向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的血液基因组DNA；取上清液3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①：50℃，2min，循环1次。步骤②：95℃，5min，循环1次。步骤③：95℃15s，55℃30s（收集荧光），循环40次。结果分析：平行扩增的荧光定量PCR反应中，阴性对照无扩增，说明反应体系正常，无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本，然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测，结果如图1所示。 海南口腔拭子服务至上口腔拭子应该可以承受4N的垂直于轴向的静压力。
本发明的特征在于：应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测，主要步骤如下。（1）将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀。（2）将步骤（1）中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，至沉淀完全散开，然后5000g离心30s，弃上清。（口腔拭子样本则无需进行此步骤）。（3）向步骤（2）所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1～2min；室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的基因组DNA；所述的核酸释放剂组成为20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺；所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2～图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。
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所有反应孔背景信号好、Ct值都在19～25之间，荧光扩增曲线呈典型的S型，说明本发明实例1提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法具有较好的可行性。将四份不同来源不同的人血液样本进行荧光PCR扩增检测，每份样本平行三次，结果分别如图2、图3、图4、图5所示，由图可见，每个样本的平行实验，其曲线的Ct值很接近且≤25。说明本发明实例提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法有可靠的重复性以及较好的均一性。实施例2与市场现有的血液基因组提取试剂盒产品对比。本发明的具体步骤如下：将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸释放剂（20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺），涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀；然后再加入200μL核酸释放剂，涡旋1min至沉淀完全散开，5000g离心30s，弃上清；向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的血液基因组DNA；取上清液3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。选用某公司的血液基因组提取试剂盒作为方法比对，具体操作过程：将取血管颠倒混匀数次，吸取200μL血液于。口腔拭子适用于采集任何年龄段人群的DNA样本。山东口腔拭子价格表
然后把装有采集管的自封袋以及送检登记表常温送运输到公司。海南口腔拭子客户至上
具体步骤如下:1，提**0分钟先用清水漱口(不用牙膏，尤其是母乳的婴儿需要喝几口清水，也不用漱口水);2、在信封上用笔作好标记(比如:父亲、母亲或孩子)和采集日期，姓名.3、一手持华晨阳基因采样棉签，伸进口腔左(右)内侧颊粘膜处稍用力反复擦拭15-20下(边擦拭边转动基因采样棉签)，取出基因采样棉签，放在信封或者白纸上、阴干十多分钟待口水完全干掉;（擦拭的具**置是腮边或者说脸颊腮帮子内部——打个比方，大人捏孩子脸蛋的那个位置，从口腔里擦拭）4、同样的方法采集第二根棉签(另一侧),每个人一侧各提取三根(共六根)基因采样棉签;5、阴干后的基因采样采集棉签分别装入已做好标记的信封中密封(请不要用胶袋或者保鲜膜装采样棉签)。6，将取好的样本尽早拿到实验室做PCR实验，您也可以选择邮寄到实验室或者医院7，我公司接收样本、签定DNA委托申请表（代合同）、付款事宜、10个工作日出结果。取好的基因采样拭子棉签样本请不要自行保管超过一个星期，尽早快递到我们实验室以确保样本不受污染。特殊样本的取样操作方法请咨询客服（比如在对方不知情的情况下或者取孩子样本需要高度保密的情况）。海南口腔拭子客户至上
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