本发明涉及生物医药领域,涉及一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。背景技术:近年来,采用口腔拭子进行DNA检验有逐渐增多的趋势,由于国内没有专门用于采集口腔脱落细胞的工具,而只是使用普通的医用棉签,而不同的人采集口腔脱落细胞在擦拭次数、力度、检材剪取量及扩增用的模板量上都存在一定差异,导致了口腔拭子的DNA常温下保存效果不大稳定,影响了口腔拭子在DNA常温下保存中的应用。
为规范口腔拭子DNA的采集,提高口腔拭子的DNA保存效率,亟需一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。
然后将沾有口腔脱落细胞的拭子在洁净通风处、至少一小时直至晾干,装回采集管,完成取样。正规口腔拭子质量材质上乘

具体步骤如下:1,提**0分钟先用清水漱口(不用牙膏,尤其是母乳的婴儿需要喝几口清水,也不用漱口水);2、在信封上用笔作好标记(比如:父亲、母亲或孩子)和采集日期,姓名.3、一手持华晨阳基因采样棉签,伸进口腔左(右)内侧颊粘膜处稍用力反复擦拭15-20下(边擦拭边转动基因采样棉签),取出基因采样棉签,放在信封或者白纸上、阴干十多分钟待口水完全干掉;(擦拭的具**置是腮边或者说脸颊腮帮子内部——打个比方,大人捏孩子脸蛋的那个位置,从口腔里擦拭)4、同样的方法采集第二根棉签(另一侧),每个人一侧各提取三根(共六根)基因采样棉签;5、阴干后的基因采样采集棉签分别装入已做好标记的信封中密封(请不要用胶袋或者保鲜膜装采样棉签)。6,将取好的样本尽早拿到实验室做PCR实验,您也可以选择邮寄到实验室或者医院7,我公司接收样本、签定DNA委托申请表(代合同)、付款事宜、10个工作日出结果。取好的基因采样拭子棉签样本请不要自行保管超过一个星期,尽早快递到我们实验室以确保样本不受污染。特殊样本的取样操作方法请咨询客服(比如在对方不知情的情况下或者取孩子样本需要高度保密的情况)。新疆口腔拭子交易价格然后用同样的方法在右侧脸颊部/右侧上下牙床处粘膜处进行第二根拭子的取样。

深圳市华晨阳科技有限公司(Huachenyangtech)深圳市华晨阳科技有限公司是一家拥有生物医学领域自研技术,专注于基因检测临床应用、检测试剂及自动化仪器研发生产的****。中心点团队由生物学、医学、遗传学、生物信息学等领域的**人才组成。主营业务涵盖:核酸建库测序、荧光定量PCR、基因芯片等创新体外诊断试剂的自主研发生产、**研究、**早诊早筛、生殖医学、遗传病、微生物、病原体、慢病及健康管理等临床技术解决方案,以及生物药原材料研发制备。深圳华晨阳以成为精细医学国际化创新主体为目标,在深圳拥有一千多平米的综合性研发实验室与cGMP生产车间,以及**医学的研发实验室。华晨阳科技致力于生物医药、临床检测试剂的自主创新和国产化,凭借***低成本的产业优势,将大型人群队列样本转化为医学相关的基因大数据,为国内外生物产业提供更便捷更***的前沿生物信息技术服务。公司产品原研技术、规范生产、精细检测。采样拭子,口腔拭子,植绒拭子,植绒棉签,植绒采样棉签。
同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程:1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞,释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长,成本较高,步骤繁多,增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法,满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素:本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本,且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系,在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA,从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单,成本低廉,检测灵敏,且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。口腔拭子在使用前一定要先检查包装是否破损,如果有破损的话记得不要使用哦。

口腔拭子产品特点:
①、辐射消毒,确保产品无菌。
②、采用国际通用的方便***的纸塑包装。
③、**密封包装,使用方便,操作简单。
④、包装内含有2支采样拭子,左右内腮各用一支。、
采样说明:
①、撕开一次性采样拭子包装袋上的封口纸,并从袋子中轻轻取出一次性采样拭子。
注意:一次性采样拭子头不能接触口腔内壁以外其他物品,以免污染。
②、手持采样拭子伸进口腔一侧,在内壁黏膜处由内向外,然后再上下移动刮拭15-20次,可根据实际情况增加次数,力度适中,以紧贴口腔内壁黏膜为宜,确保一次性采样拭子头各处都能蘸取口腔黏膜脱落细胞;按照同样方法,在口腔内壁另一侧进行采集。
③、采集完成后,请将一次性采样拭子从口腔内取出,放入采样管内,推动一次性采样拭子头,将采样拭子头置入保存管,拧紧并保存。
注意:转动次数过多会导致样本的稀释或损耗。采样后,确保一次性采样拭子不接触其他任何物体。
口腔拭子适用于采集任何年龄段人群的DNA样本。正规口腔拭子质量材质上乘在使用口腔拭子**0分钟,记得不要进食喝水用药、也不要吸YAN喝酒,以免影响采样操作。正规口腔拭子质量材质上乘
加入20μteinaseK溶液,混匀。加入200μL缓冲液GB,充分颠倒混匀,在56℃放置14min(期间颠倒混合样品数次),溶液应变清亮,若未完全变清亮,延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇,充分振荡混匀10s,此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm(~13,400×g)离心2min。将吸附柱放置新的,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50~200μL洗脱缓冲液,室温放置2~5分钟,12,000rpm(~13,400×g)离心2min,将溶液收集到离心管中,测定浓度及纯度后,取3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6,本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型。正规口腔拭子质量材质上乘
深圳市华晨阳科技有限公司是一家致力于核酸检测、分子诊断、医学检验、病毒检测等产品研发、生产、销售于一体的国家高新技术企业。公司拥有二十多项**,部分专利已经转化应用于市场。产品主要应用于基因检测、医疗机构、生物制药、大型甲等医院、出入境检验检疫、诊断试剂、疾控机构、刑侦法医鉴定等。近年来,公司不断加大自主研发投入,积极引进人才和技术,并与国内外多家科研机构、医学检验所以及三甲医院、基因检测公司、疾病预防控制中心等科研机构有着紧密合作,促进人类健康产业大发展。