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加入20μteinaseK溶液,混匀。加入200μL缓冲液GB,充分颠倒混匀,在56℃放置14min(期间颠倒混合样品数次),溶液应变清亮,若未完全变清亮,延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇,充分振荡混匀10s,此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm(~13,400×g)离心2min。将吸附柱放置新的,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50~200μL洗脱缓冲液,室温放置2~5分钟,12,000rpm(~13,400×g)离心2min,将溶液收集到离心管中,测定浓度及纯度后,取3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6,本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型。
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紫蓝色结节、瘘孔等,分泌物量、性质、颜色、气味等,阴道有无横隔、纵隔、斜隔、狭窄、闭锁、双阴道等畸形,宫颈大小、形状、色泽,有无糜烂、旧裂、赘生物、紫蓝色结节及接触性出血等,宫颈管分泌物性状,宫颈阴道段长度及双宫颈畸形等。盆腔检查检查前先排便,排便困难者可先导尿及服用缓泻剂,有阴道出血者需先消毒外阴并戴无菌手套;月经期一般不做盆腔及阴道检查;未婚者一般*作肛门指诊检查。
(1)双合诊:即阴道腹部双合诊。检查者戴无菌手套,以示指、中指蘸润滑液后顺阴道后壁轻轻插入,检查阴道有无肿块、狭窄、瘢痕、弹性等,子宫颈高度、大小、质地、硬度,有无举痛,后穹窿是否饱满,软硬度,有无弹性,结节、肿块、浸润、触痛。然后将另1手置于下腹壁与阴道内手指配合检查盆腔生殖器先作宫体触诊,注意子宫体大小、位置、形状、硬度、活动度及有无压痛。将内诊指放在一侧穹窿,双手检查附件与宫旁组织有无增厚、压痛、包块,如有肿块需查清大小、活动度、质地、形状,有无触痛以及与子宫有无粘连,有无向周围组织脏器浸润等,先查不痛的一侧,然后再查对侧。
(2)三合诊:又称阴道直肠腹部三合诊。用示指插入阴道、中指插入肛门内触诊。 口腔拭子如果在使用的过程中出现过敏现象,请立即停止使用,严重时请及时就医。上海口腔拭子价位
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