ELAREM Prime血小板裂解液是一款基于人血小板的高性价比的细胞培养添加剂,为细胞提供了无动物源血清的培养环境,但是维持相同的细胞生长效果。ELAREM Prime血小板裂解液来源于输血级的血小板,具有稳定的货源供应,而无需像FBS一样依赖于屠宰行业,确保了平稳的价格和安全的细胞培养条件。ELAREM Prime生产于无菌条件下大量混合的血小板单位,批次和批次间的稳定性保证了可重复的实验数据,无需像FBS一样进行批次间实验检测。ELAREM Prime支持学术研究,工业生产以及体外诊断行业中的细胞体外扩增应用。其中的生长因子组分增强不同细胞类型和细胞系的繁殖和维持。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自体或异体血小板富集物经细胞裂解后的产物。人血小板裂解液常见问题
间充质间质细胞(MSCs)体外扩增的培养基一般添加胎牛血清FBS,但是考虑到异种ganran及免疫反应的风险,监管机构并不鼓励使用。人血小板裂解液除了不存在异种免疫反应或牛病原体ganran的风险,有助于增强间充质干细胞的扩增,也相对容易地根据良好的生产规范程序生产,并已用于临床应用,因此现如很多资料显示血小板裂解液已被证明是扩增MSCs一种非常有效的FBS替代方法(参考文献1)。 血小板裂解液由血浆组成,含有纤维蛋白原和凝血因子,对于一般细胞培养中涉及的含钙培养基来说通常需要加入抗凝剂(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)来防止凝胶形成,其中肝素很为常用。Mill Creek血小板裂解液怎样使用血小板裂解液的使用方法是怎样的?
胎牛血清(FBS)对动物和人的间充质干细胞(MSCs)的大规模扩增以及细胞zhi liao的快速发展起着重要作用,但它也带来了一些监管和物种交叉污染等问题,并阻碍了大多数产品往临床的过渡。无血清培养基(SFM)补充几种生长因子也被提出作为胎牛血清综合征的替代方法,然而通常SFM需要根据细胞类型、来源和种类开发定制,费时费力。此外,SFM的高成本使其无法用于大规模细胞扩增。因此,迫切需要找到一种基于人源的培养基补充剂。人源血小板裂解液(HPL)来自人血小板,含有类似的生长因子和细胞因子,且与在胎牛血清中发现的水平相当。目前已经证明HPL支持各种细胞的生长。本研究的重点是评估不需要使用肝素(PL-NH)的HPL和需要肝素(PL-H)的标准HPL在不同浓度培养基下支持来自不同组织的新生儿和成人间充质干细胞的生长和增殖的能力。
细胞培养基制备1.比较好在4°C下解冻ELAREM Prime血小板裂解液过夜或在37°C水浴中解冻1小时。2.通过将10%ELAREM Prime血小板裂解液添加到基础培养基(即MEMα、GlutaMAX补充剂、无核苷)和1%的青霉素/链霉素作为**终浓度来制备完整的细胞培养基。3.应在完全细胞培养基中加入肝素以抗凝。我们建议添加肝素的**终浓度为2IU/mL PL SUPPLEMENT(货号PL-SUP-500)or 0.024mg/mL PL SUPPLEMENT-XF(货号PL-SUP-500-XF).4.完整细胞培养基可在4°C下储存,并稳定约4周储存和稳定性ELAREM Prime在标签上注明的失效日期之前是稳定的。ELAREM Prime在使用前在-20°C(或在-80°C进行长期储存)冷冻储存时稳定。解冻后,建议将未使用的ELAREM Prime样品分装并在-20°C下重新冷冻。应避免ELAREM Prime的重复冻融循环,因为这会导不溶性颗粒形成的增加。使用时,只需预热一份完整的细胞培养基,并将剩余的培养基冷藏在4-8°C。血小板裂解液通常用什么方法灭菌?
建立商业化细胞生产的比较好培养基体系需要PD科学家考虑各种各样的变量,性能,来源、质量、可用性、法规等。作为历史上占主导地位的细胞生长补充剂和组织培养,胎牛血清(FBS),有着众所周知的作用限制(动物源性、价格波动、道德)具有挑战性等),导致使用人源性补充剂,如血小板裂解物(hPL)和AB人血清(ABS)。人源资源的使用衍生材料并非没有风险和制造商必须使用适当的策略来管理和减轻这些风险。安全是首要原则。应使用符合伦理的原材料来源生产的产品。人源血小板裂解液除了拥有比富血小板血浆更高的生长因子浓度。Merck血小板裂解液过滤
血小板裂解液不能反复冻融。人血小板裂解液常见问题
前述所说的生长因子大多存在于血小板内部的α颗粒中,当血小板被活化后会产生脱颗粒作用(即血小板的α颗粒会和细胞膜融合),进而释放大量活化的生长因子。而人源血小板裂解物就是直接将人类来源血小板细胞经过连续的反复冻融裂解后,进一步提纯这些血小板脱颗粒的商品;人源血小板裂解物除了拥有比富血小板血浆更高的生长因子浓度,更用特殊工艺去除了细胞碎片,大幅降低了使用过程中的免疫原性。
人源血小板裂解物的使用方式非常方便简单,在培养基中添加5%血小板裂解物,混合均匀后即可直接用来培养间充质干细胞,且在传代过程中不需要预包被培养皿。适合应用在多种来源的间充质原代干细胞培养过程呦! 人血小板裂解液常见问题
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本研究中使用的HPL是Stemulate公司两款人源血小板裂解液(NH和H)是在工业规模(很小批量为...
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