通过BODIPY染色的脂肪滴来反映的成脂分化情况,发现两种肝素UFH和LMWH在高浓度时,分化成脂细胞的百分比明显降低。同样的,通过茜素红染色的磷酸钙沉淀分析成骨分化情况,高浓度肝素也降低了成骨分化的百分比,特别是在脂肪组织来源的MSCs中,UFH肝素高浓度对成脂和成骨分化诱导的负面影响较为明显。基于上述结果,我们现在知道血小板裂解液中添加的抗凝剂肝素在体外MSCs扩增的必要性,在购买血小板裂解液后,用户应结合自己的实验条件去合理的选择合适的肝素浓度,而肝素浓度的选择应该在有效防止含血小板裂解液培养基凝胶形成的基础上尽量降低,以减少肝素对于MSCs的增殖能力、成纤维细胞体外集落形成单位(CFU-F)、MSCs体外分化等的影响。 用血液里的血小板浓缩物反复冷冻和超声处理可制备成人血小板裂解液。Helios血小板裂解液官方代理商
那么经常有客户会问道人血小板裂解液中的肝素的使用浓度到底如何抉择呢?添加培养之前有必要花时间来优化下这个肝素浓度参数吗?现在小编通过比较了不同浓度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培养基中培养MSCs的增殖能力、成纤维细胞体外集落形成单位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和体外分化等情况,给大家作解答。从而帮助大家正确使用血小板裂解液。 血小板裂解液的解冻方法用血液里的血小板浓缩物反复冷冻、解冻和超声处理可制备成人血小板裂解液。
MSCs是异质性的细胞群,其组成可能受培养条件的影响。血小板裂解液中肝素及其浓度高低对细胞形态和生长模式并未有明显的影响。通过免疫荧光显微镜分析未发现波形蛋白(一种通常在中胚层起源的细胞中表达的中间丝)和α-SMA表达的差异,肝素浓度对于α-SMA(绿色)和波形蛋白(红色)的分布并无影响。脂肪组织源性间充质干细胞(AT-MSC)和骨髓源性间充质干细胞(BM-MSC)本身免疫表型就是相似的,经添加不同浓度肝素的血小板裂解液培养扩增的AT-MSC和BM-MSC的流式细胞分析结果显示出CD29、CD73、CD90和CD105表达,而表面标记CD14、CD31、CD34和CD45的缺失,可见肝素浓度对MSC免疫表型的表达水平几乎是没有影响的。
血小板中含有很多不同的细胞生长因子,包括PDGF,VEGF,EGF等,实践证明,血小板分泌的细胞生长因子能够对多种细胞起到支持生长的作用,可以完全替代胎牛血清(FBS)甚至于在支持一些细胞培养的效果上优于FBS。本产品是将多人份浓缩血小板混合后裂解而成,产品均一性好,经过了严格安全性有效性质量检控。人血小板裂解液能够支持包括间充质干细胞成骨分化,成脂分化,造血干细胞以及诱导性多能干细胞的生长等。是这些细胞公认的动物源血清替代品。 用血液里的血小板浓缩物反复冷冻,解冻和超声处理可制备成人血小板裂解液。
PLBioScience成立于2015年,是德国亚琛工业大学的一个分支机构。2013年,他们的首席执行官Dr.HatimHemeda从事干细胞研究:他用自己的血小板浓缩液取得了很好的结果。由于当时没有商用,他开发了一种受保护的技术,用于大规模生产人血小板裂解液,致力于为用户提供安全和无动物成分的细胞培养补充剂的解决办法。PLBioScience质量申明:PLBioScience重视客户需求,努力为他们提供满足甚至超越他们期望的产品和服务。公司的hPL来源于输血级的血小板,在无菌条件下通过大量混合的血小板单位进行生产,批次和批次间的稳定性保证了客户可重复的实验证据。血源的持续供应确保客户对于hPL获得稳定的供货及价格。所有产品都经过充分过滤,测试和认证。 血小板裂解液进口很难吗?性能好血小板裂解液中国代理权
血小板裂解液里面的沉淀对细胞有没有影响?Helios血小板裂解液官方代理商
细胞培养基制备1.比较好在4°C下解冻ELAREMPrime血小板裂解液过夜或在37°C水浴中解冻1小时。2.通过将10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基础培养基(即MEMα、GlutaMAX补充剂、无核苷)和1%的青霉素/链霉素作为**终浓度来制备完整的细胞培养基。3.应在完全细胞培养基中加入肝素以抗凝。我们建议添加肝素的**终浓度为2IU/mLPLSUPPLEMENT(货号PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(货号PL-SUP-500-XF).4.完整细胞培养基可在4°C下储存,并稳定约4周储存和稳定性ELAREMPrime在标签上注明的失效日期之前是稳定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C进行长期储存)冷冻储存时稳定。解冻后,建议将未使用的ELAREMPrime样品分装并在-20°C下重新冷冻。应避免ELAREMPrime的重复冻融循环,因为这会导不溶性颗粒形成的增加。使用时,只需预热一份完整的细胞培养基,并将剩余的培养基冷藏在4-8°C。 Helios血小板裂解液官方代理商
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