细胞工程外泌体

外泌体（Exosome）开始被认为是毫无作用的“垃圾”，但随着研究的不断深入，人们发现事实并非如此，外泌体（Exosome）是具有功能活性并可进行细胞间信息传递的微囊泡。外泌体（Exosome）介导瘤细胞的免疫耐受。瘤细胞来源的外泌体（Exosome）本身可作为瘤抗原，因此，瘤来源的外泌体（Exosome）既是一种抗原呈递系统，同时也是瘤排斥抗原的来源。瘤来源的外泌体（Exosome）能够通过传递某些抑制信号，在机体免疫应答过程中起负性调节作用，诱导瘤细胞形成免疫耐受，从而逃避免疫细胞的杀伤。外泌体是分泌的细胞外囊泡的主要群体，是具有生物活性的脂双层囊泡。细胞工程外泌体

细胞外囊泡是蛋白质、mRNA、miRNA和脂质运输来完成细胞间通讯通路的重要媒介，根据它们的大小和发生分为三类，包括外泌体、微泡和凋亡小体。其中，外泌体是直径大约为40-100nm的包装囊泡，由多种细胞分泌，内含有特定的蛋白质、脂质、细胞因子或遗传物质。来源于不同的组织的外泌体不只具有其特异性蛋白分子，而且还包含其行使功能的关键分子。近年来，随着外泌体研究的不断深入，它的应用已经涉及瘤子诊疗领域、医学基础和免疫领域、寄生虫领域；临床研究上已涉及心血管系统、内分泌代谢系统等。超速离心是目前分离外泌体的主要技术。腹水外泌体蛋白质组学外泌体大小不均的原因可能是由于MVB的限制膜不均匀内陷，导致流体和固体的总含量不同。

众所周知外泌体是供体细胞分泌出来的胞外囊泡，被受体细胞吸收后起到调控受体细胞功能，这篇综述文章主要讨论了外泌体的生成、生化性质以及作为药物递送载体的潜力。外泌体在比较多生理病理上起着重要的作用，如免疫中抗原呈递、肉瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等。不同细胞分泌的外泌体具有不同的组成成分和功能，可作为疾病诊断的生物标志物。外泌体具有脂质双层膜结构，能比较好的保护其包被的物质，且能靶向特定细胞或组织，因此是一种比较好靶向给药系统。

科学家也尝试利用外泌体的压制发病机制功能。例如，类风湿关节炎患者的滑膜成纤维细胞所释放的外泌体，高浓度集聚诱导细胞死亡的TNF-α，可使类风湿关节炎恶化。通过上述介绍可以知道症状细胞来源的外泌体含有与症状进展相关的分子，神经细胞来源的外泌体含有与神经退行性疾病相关的分子，因此，通过压制或去除这些外泌体，有希望压制疾病发生。随着今后的研究发展，外泌体功能逐步清晰，并扩大临床应用，有望将外泌体应用在各种疾病医治上。甚至可尝试利用外泌体将siRNA和抗药剂等运输到目标细胞中。有关外泌体分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。

外泌体的提取主要包括以下几种方式：1、免疫磁珠法，这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备，但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性，不便进行下一步的实验。2、PS亲和法，该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似，获得的外泌体形态完整，纯度较高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射。3、色谱法，这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一，但是需要特殊的设备，应用不普遍。外泌体的细胞源：人体中几乎所有类型的细胞均能产生外泌体。外泌体定义

外泌体产生相关的重要分子：Ral、ARF6、PLD2、RAB家族。细胞工程外泌体

前列腺ai患者尿液外泌体中的miR-574-3p、miR-141-5p和miR-21-5p的表达水平明显上升，表明这些miRNAs可用于前列腺ai的早期筛查。胆管ai是恶性程度较高的消化系统中流，发展隐蔽且临床症状及体征出现晚，故给早期诊断带来困难。高通量小RNA测序筛查了来自胆管ai和胆囊ai患者外泌体中一系列差异表达的miRNA，小RNA长度在正常个体、胆管ai患者和胆囊ai患者之间的分布存在明显差异，胆管ai患者的外泌体中miR-96-5p、miR-151a-5p、miR-191-5p、miR-4732-3p明显升高，而胆囊ai患者的外泌体中miR-151a-5p略有升高，为胆管ai和胆囊ai提供了一套新的生物诊断标志物。细胞工程外泌体

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