鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明:含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul10×PBS或10×培养液,混匀(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。方法制作鼠尾胶原,观察全细胞膜片钳实验中,自制的鼠尾胶原对前庭毛细胞的贴壁黏附作用。宁波鼠尾胶原服务电话

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用:两组培养皿中,随着过氧化氢浓度的增高,均可见细胞凋亡状态明显加重,细胞存活率及细胞内过氧化氢活力明显下降,细胞凋亡率及细胞内丙二醛水平明显增高,Bcl-2/Bax比值明显降低,呈剂量依赖性。而在相同浓度过氧化氢诱导下,与对照组相比,实验组细胞凋亡状态明显减弱,细胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,细胞凋亡率和丙二醛水平明显减低。表明鼠尾胶原对过氧化氢所致的心肌细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能与提高超氧化物歧化酶活力,减少丙二醛产生及提高Bcl-2的表达有关。武汉正规鼠尾胶原价格鼠尾胶原,是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用。

胶原蛋白是脊椎动物和无脊椎动物支持结构的主要组成。在人的身体中这是皮肤、筋、软骨、骨骼及结缔组织的较主要的蛋白质。胶原蛋白占人体蛋白质总量的三分之一,不论来源于哪一种动物或哪一种组织的胶原都有许多共同特性。氨基酸组成中约有三分之一为甘氨酸,有脯氨酸和羟脯氨酸。根据其遗传分子结构遗传基因的差别,胶原蛋白分为20几个亚型。但较为常见的为Ι、Π、ΙΙΙ型胶原蛋白,即间质胶原蛋白。其中I型较为丰富且品质优良。
胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同,每一条亚基形成一股左手旋转的螺旋,其中每3个氨基酸残基形成一圈螺旋。3条左手螺旋再扭在一起形成一个右手大螺旋。这样的螺旋称为3股螺旋。小的甘氨酸残基位于3股螺旋内部。3股螺旋式的棒状胶原分子的大小约是3000×15埃,这些棒状分子首尾相连,并侧向排列形成胶原微丝(其直径可从50埃至数千埃)。胶原分子在两端及沿轴向每隔680埃的距离存在极性区,这些极性区能和重金属离子结合,使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。

生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法,采用酸法与酶法相结合的工艺,保持恒低温无菌的环境,利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心,简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液,并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中,进行多次真空冷冻干燥,并经进一步处理获得含水率在3%以下的胶原蛋白微粉;较后由灭菌、无菌包装,成品胶原蛋白粉末的纯度在98%以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了产率和生物相容性,降低了成本,适用于生物医用材料,所得到的胶原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋结构。鼠尾胶原醋酸溶解:不要晃动或搅拌。南京鼠尾胶原销售厂家
鼠尾I型胶原蛋白系采用方法在无菌下制备,纯度达到95%以上。宁波鼠尾胶原服务电话
鼠尾Ⅰ型胶原:材料与方法:1.主要材料、试剂和仪器鼠尾、盐酸、等渗氯化钠溶液、钙液、磷液均购自上海晶纯生化科技股份有限公司。日立高新TEMHT770(日本日立公司);多功能粉末X射线衍射仪。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白取大鼠尾巴洗净,用75%的乙醇浸泡5min。将尾巴剪开,去掉皮毛,并剪成小段,抽出银色的肌腱。将肌键剪断置于平皿中,用无菌等渗氯化钠溶液浸泡。吸去等渗氯化钠溶液,将肌键置于平皿中剪碎,按每克肌键50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。摇晃,将肌键分散于醋酸溶液中,4℃放置一周,然后以2186×g离心20min。在醋酸溶液的酸解下,肌腱水解成胶冻状凝胶,置于冰箱4℃保存。宁波鼠尾胶原服务电话
鼠尾胶原胶凝程序:胶原蛋白I按以下步骤使其pH达到碱性时凝胶。1)将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。用氢氧化铵使纱布饱和,把盖子放在150mm的培养皿上,暂放置一边。2)将胶原蛋白I均匀涂布在要包被物的表面上,厚度可以根据需要改变,胶原蛋白I(50-100μL)足以涂覆22mm的盖玻片。对于直径100mm的培养皿,每个加入约6mL;对于60mm培养皿添加约2.3mL,对于35mm培养皿添加约1mL。3)将涂有胶原蛋白的盖玻片或带有盖子的培养皿转移到氨蒸气室并暴露三分钟。4)在无菌蒸馏水中(35mm培养皿加5mL,60mm培养皿加10mL等)浸泡涂布的盖玻片或...