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糖原染色的原理与操作方法是什么：（1）原理：过碘酸将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合，形成紫色化合物，定位于细胞质中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分钟，流水冲洗，晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟，流水冲洗，晾干。滴加雪夫液作用60分钟，流水冲洗，晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟，流水冲洗，晾干镜检。细胞的组织化学方法，是研究细胞成分常用的方法之一。它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀物，再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。湖南哪家生产糖原染色试剂盒量大从优

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色试剂盒不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化，这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解，形成水溶性的双糖-麦芽糖，在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段，但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑，不主张应用唾液。山东哪家生产糖原染色试剂盒生产厂家保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色，染色效果较差。

粘液染色法：粘液一般有以下几点特性：（1） 对盐基性染料有亲合力，因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。（2） 对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。（3） 遇醋酸发生沉淀，胃粘蛋白则除外。（4） 溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种：1、P．A．S染色法：操作方法同前，结果；中性粘液性物质，某些酸性粘液物质呈红色，核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法：该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法：（1）切片常规脱蜡入水。（2）3%醋酸液洗2分钟，入1%阿利新兰醋酸液（PH2.5）10-20分钟。（3）蒸馏水洗。（4）按P.A.S染色程序。（5）苏木素淡染2-3分钟，水洗。（6）常规脱水、封片。

糖类染色实验——糖原染色：高碘酸氧化液：高碘酸 0.5 g，蒸馏水 100 ml。此液溶解后放入冰箱中待用。Schiff 染色液：碱性复红 1 g，1mol/L 盐酸 20 ml，焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）2 g，双重蒸馏水 200 ml。先将 200 ml 双重蒸馏水煮沸，稍有火焰，加入 1 g 碱性复红，再煮沸 1 min，冷却至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 盐酸，待 35℃ 时加入 2 g 焦亚硫酸钠。室温中 2 h 之后见稍带红色，5 h 之后变为无色液体。棕色瓶内装好，放入冰箱中保存待用。1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。2. 蒸馏水洗 2 次。3. 高碘酸氧化液处理 10～20 min。4. 充分蒸馏水洗。5. Shciff 液染色，染色 10～20 min（如果室温在 15℃ 以下时，可在湿盒内加入温水而加快反应）。6. 流水冲洗 3 min（对于着色较深的切片可适当缩短时间）。7. 用 Mayer 明矾-苏木**染细胞核 3～5 min。8. 0.5％ 盐酸乙醇液分化 30s，自来水浸洗 2 **要用来显示糖原和其他多糖物质，因此也称作糖原染色。

染色的一般原则：因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照，进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素 FITC，EGFP激发光：488nm发射光：525nm;使用面较广，价格便宜。PE激发光488nm 发射光575nm，此荧光的激发效率较佳，故此荧光得到的信号较强；检测某些弱表达的抗原，推荐使用此荧光素。价格较FITC昂贵。APC激发光633nm， 发射光660nm，在配有双激光的流式细胞仪上，此荧光染料可与7-AAD或PI共同使用来避开自带绿色荧光的样本。流式细胞仪相关试剂盒。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中，防止进一步的损伤。江苏哪家生产糖原染色试剂盒厂家直销

推荐用于骨和软骨的染色。湖南哪家生产糖原染色试剂盒量大从优

特殊染色方法选择应遵循：1、特异性高、传统或经典的染色方法；特异、传统/经典的一些染色法在特殊染色方法的选择中往往作为选择。如显示淀粉样物质。刚果红染色作为经典的方法，比天狼星红、甲基紫等其他方法都要实用。淀粉样物质（刚果红及天狼星红染色）。2、染色流程相对简便、染液易配制的染色方法；选择染色流程简便的方法，无论对于量较多的整批次染色，还是较少量的染色均能够节省时间、更为便捷。选择染液易配制的方法，对自配染液（尤其是保存较短的染液）是较为重要的选择，不容易造成因染液配制问题而影响染色结果。如显示弹性纤维。醛品红染色法无论是从染色流程，还是染液配制都要比铁苏木精、间苯二酚碱性品红等染色方法要简单方便、省时，同时阳性着染对比度也很明显。湖南哪家生产糖原染色试剂盒量大从优

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