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染色的一般原则：因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照，进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素 FITC，EGFP激发光：488nm发射光：525nm;使用面较广，价格便宜。PE激发光488nm 发射光575nm，此荧光的激发效率较佳，故此荧光得到的信号较强；检测某些弱表达的抗原，推荐使用此荧光素。价格较FITC昂贵。APC激发光633nm， 发射光660nm，在配有双激光的流式细胞仪上，此荧光染料可与7-AAD或PI共同使用来避开自带绿色荧光的样本。流式细胞仪相关试剂盒。将动物杀死后迅速取出所需要的组织。北京咨询糖原染色试剂盒服务电话

糖原染色法：染色原理细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质（如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等），过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基，其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色，沉积在细胞内多糖所在之处。染色步骤：1.组织石蜡包埋切片后脱蜡至水，蒸馏水洗2min（细胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗）；2.滴加过碘酸溶液，氧化5min；3.蒸馏水洗10min；4.滴加Schiff试剂，侵染10-20min；5.倾去Schiff 试剂，流水冲洗10min；6.滴加苏木素染色液，染核1-2min；7.流水冲洗5min；8.酸性乙醇分化液分化。江苏品质好的糖原染色试剂盒推荐厂家自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。

医院检验中心糖原染色操作规程：1．雪夫氏试剂：400m1 蒸馏水煮沸除去 C02，逐渐加碱性 品红 2．08 溶解后，待冷却至 60℃，加 1mm01 儿 HCl40ml， 再加偏重亚硫酸钠(NaHSO：)4g，次日加活性碳 1．5g， 放置半天后过滤。配好后液体为无色透明，保存于 4℃ 冰箱中。 2．过碘酸作用液：过碘酸 1g 溶于蒸馏水 100ml 中，或取 过碘酸钾(1tI04)0。698 加蒸馏水 100ml，微加热使溶 解，再加浓硝酸 0．3m1，置冰箱中保存。 3．固定液：95％乙醇 90ml 与甲醛 10m1 混匀。 4．20g/l 甲基绿：甲基绿 2g 溶于 100m1 蒸馏水。 [操作] _x000c_(1) 新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内 10 分钟。 (2) 水洗数次后，对照片先用唾液消化 30 分钟，也可在 同一片，在其中间用蜡笔划界，一半做对照，另一半做 测定。 (3) 水洗后，滴加过碘酸数滴于涂片上，作用 10 分钟后， 再水洗数次。

试剂盒：JC-1是一种阳离子脂质荧光染料，可作为检测线粒体跨膜电位指示剂。JC-10染料是JC-1染料的升级，有着更很好的水溶性以及染料稳定性。原理：JC-1染料在正常细胞内聚集在线粒体内，形成多聚体，发红色荧光；而在凋亡细胞内，由于线粒体膜电位的破坏，不能聚集到线粒体内，以单体的形式存在于胞质内发绿色荧光。JC-1有单体和多聚体两种存在状态，在低浓度时以单体的形式存在，高浓度时以多聚体形式存在，两者的发射光谱不同，但均可在流式细胞仪绿色（FL-1）通道检测出绿色荧光，JC-1可透过正常细胞膜以单体状态聚集胞内。急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。

糖原D-PAS染色液：使用方法：1、两张相同切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇入水。2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理，入水中1h作为对照。3、流水冲洗两张切片各5～10min。4、入过碘酸溶液，室温放置5～8min，一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。6、入Schiff Reagent，置于室温阴暗处浸染10～20min。7、自来水冲洗10min。8、入Mayer苏木素染色液，染细胞核1～2min。9、(可选)酸性乙醇分化液分化2～5s。10、自来水冲洗10～15min，更换蒸馏水清洗使其返蓝。11、二甲苯透明，中性树胶封固。过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18～22℃佳。江苏品质好的糖原染色试剂盒推荐厂家

切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。北京咨询糖原染色试剂盒服务电话

糖原染色生物技术优势：（1）拥有针对不同组织的特殊固定液；（2）拥有日本进口的各种染料，保证切片染色效果；（3）拥有千锤百炼的专业人才队伍，保证实验快速、有效的完成。实验样本要求：（1）植物材料在选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分；（2）动物材料取用时需对动物施以麻醉，常用的麻醉剂有氯仿和，或将动物杀死后迅速取出所需要的组织；（3）取材必须新鲜，这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要，应该尽可能割取生活着的组织块，并随即投入固定液，固定液与组织块的体积比应在10:1；（4）切取材料时刀要锐利，避免因挤压细胞使其受到损伤；（5）切取的材料应小而薄，便于固定液迅速渗入内部。一般厚度不超过3mm，大小不超过5×5m㎡。北京咨询糖原染色试剂盒服务电话

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