上海北京RNA提取试剂

RNA快速提取试剂盒：随着对小RNA的研究的逐渐深入，小RNA的分离逐渐成为一种需求，百泰克利用雄厚的研发实力，开发出高效快捷的小RNA分离纯化试剂盒，对各种不同来源的样品（动物、植物、细胞等）均取得满意的效果。miRNA提取试剂盒采用自创的结合洗脱技术，对小RNA，包括RNA(miRNA)、smallinterferingRNA(siRNA)、smallnulcearRNA(snRNA)均能很好的回收。产品特点：高效分离小RNA，同时分离总RNA。富集200nt以下的小RNA，增加其用于下游实验的浓度。快速——30分钟完成实验。可用于miRNA、siRNA、shRNA和snRNA分析。适用于各种来源的样品。所提取的RNA完整性好、纯度高，可用于分子生物学后实验。上海北京RNA提取试剂

RNA提取注意事项：1、组织样本要尽可能的新鲜，避免反复冻融。2、提取时组织要充分研磨，组织量不宜过少，更不宜过多。3、加入裂解液后应给予充分的孵育时间，使样本充分裂解。4、在用Trizol法提取时，分层后吸取上清的原则是“宁愿少吸，不能多吸”，千万不能提取到中间层，否则会导致严重的基因组DNA污染。5、洗涤时洗涤液应充分浸润到管壁的四周，确保洗涤彻底。6、柱式提取法，洗涤完后除了对柱子进行空离后，还应当将吸附柱置于超净台内吹风5~10min，使有机溶剂充分挥发干。7、柱式法较后洗脱时候，当加入DEPC水后还应孵育3~5min，或者提前将DEPC水加热至60℃，可提高洗脱得率。传统的Trizol裂解异丙醇沉淀法较后RNA是用DEPC水溶解沉淀，则应当给予适当溶解时间，并用泵头不断吹吸离心管底部。济南正规RNA提取试剂销售厂家提取的RNA样品中不应存在对酶存在压制作用的有机溶剂及过高浓度的金属离子。

RNA提取：预备工作（1）塑料制品：尽量使用一次性无菌塑料制品。已标明RNase-free的塑料制品，如没有开封使用过，通常不必再处理。处理的步骤如下：O在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使其终浓度为0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯为活性很强的剧毒物，须在通风橱中小心使用）O将待处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通风柜中37℃或室温下处理过夜。O将DEPC-H2O小心倒入废液瓶中，将装有DEPC-H2O处理过的塑料制品的容器以铝箔封口，高温高压蒸汽灭菌至少30分钟。O灭菌塑料制品烘烤干燥，置洁净处备用。（2）玻璃和金属物品250℃烘烤3小时以上。

RNA提取：主要试剂Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，压制细胞释放出的核酸酶。1.Trizol试剂含有苯酚，具有毒性和刺激性，注重操作。2.RNase污染的主要来源是操作过程中手和空气中的浮沉，注重配带手套，样品尽可能盖严。3.细胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低较后得率，因为一部分RNA会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质（结缔组织和骨除外）。在清洗和裂解细胞时较好在低温下操作，防止在操作过程中释放的内源RNase降解了RNA。4.酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构，可以加入Trizol试剂同时加入无RNase的玻璃珠并剧烈振荡，使细胞裂解充分。2-8℃避光保存一年。总共可以使用该试剂盒进行50次标准提取。

植物RNA快速提取试剂盒：1.固体组织破碎设备。可用下列装置之一：1)玻璃匀浆器。泡酸清洁，用高压灭菌蒸馏水洗涤数次。2)研钵。适用于液氮冻存组织的研磨，清洗方法同玻璃匀浆器。3)高速机械匀浆器(Polytron，Tekmar或类似产品)，打开开关，在蒸馏水中清洗分散器头数次。2.高压蒸汽30分钟消毒一次性吸头离心管。RNA沉淀溶解之后，应严格使用高压消毒的一次性用品。然而PlantRNAtrip能在RNA酶污染环境下工作，在裂解步骤可使用未高压但洁净的一次性吸头和离心管，但光推荐在紧急情况下这样做。3.普通双蒸水，高压消毒20分钟。用于冲洗器皿，配制琼脂糖凝胶和电泳用缓冲液。DEPC处理的双蒸水。加DEPC到水中至终浓度为0.01%v/v，室温过夜，高压消毒30分钟。用于溶解RNA，配制TE缓冲液和75％乙醇。4.湿冰。在冰上进行操作有助于减少RNA降解。5.其它用品。电泳槽，双蒸水冲洗。离心机和加样器，无需处理。6.戴手套。注意某些实验如提取质粒DNA如使用极大量RNA酶，为防污染，须较全仔细清洗实验器具和实验区域。RNA提取试剂注意事项：溶液需用DEPC水配制。武汉正规RNA提取试剂哪家好

可以用260nm波长分光测定RNA浓度，OD值为1相当于大约40μg/ml的单链RNA。上海北京RNA提取试剂

RNA提取：预备工作RNA酶（Rnase）是导致RNA降解较主要的物质。此酶非常稳定，在一些极端的条件下只可暂时失活，但限制因素去除后又迅速恢复活性。常规高温高压灭菌方法和蛋白压制剂不能使所有的Rnase完全失活。1.它普遍存在于人的皮肤上，因此制备RNA时必须戴手套。2.RNase的又一污染源是取液器。根据取液器制造商的要求对取液器进行处理。一般情况下采用以DEPC配制的70%乙醇擦洗取液器的内部和外部，可基本达到要求。3.塑料制品、玻璃和金属物品的处理。上海北京RNA提取试剂