宁波天津鼠尾胶原

鼠尾胶原胶凝程序：胶原蛋白I按以下步骤使其pH达到碱性时凝胶。1）将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。用氢氧化铵使纱布饱和，把盖子放在150mm的培养皿上，暂放置一边。2）将胶原蛋白I均匀涂布在要包被物的表面上，厚度可以根据需要改变，胶原蛋白I（50-100μL）足以涂覆22mm的盖玻片。对于直径100mm的培养皿，每个加入约6mL;对于60mm培养皿添加约2.3mL，对于35mm培养皿添加约1mL。3）将涂有胶原蛋白的盖玻片或带有盖子的培养皿转移到氨蒸气室并暴露三分钟。4）在无菌蒸馏水中（35mm培养皿加5mL，60mm培养皿加10mL等）浸泡涂布的盖玻片或培养皿30min。吸取原蒸馏水并加0.5-1.0mL无菌蒸馏水，放置在层流罩中过夜。5）吸出蒸馏水，用含血清的平衡盐缓冲液溶液代替并保存在2-8°C。期间不断搅拌，防止冻结成块，得到胶原溶胀液。宁波天津鼠尾胶原

一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法：1.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，调节pH=6.5，用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°C沉淀10小时，去除上清液，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀；2.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液，冰水浴中，调节PH=6.5;溶液依次通过阳离子交换树脂、阴离子交换树脂进行脱盐处理；(8)将脱盐后的胶原蛋白溶液，-40至-20°C预冻2〜4小时，然后真空冷冻干燥，冻干产品经进一步处理得到含水率在3%以下的胶原蛋白微粉，灭菌、包装，得到成品胶原蛋白粉末。芜湖郑州鼠尾胶原通常情况下骨质总量中的钙、镁、磷等无机物质光占总量的百分之几而胶原蛋白等有机物质却要占超过80%。

鼠尾胶原：鼠尾胶原是一种天然培养基和一种天然的黏附剂。实验设备及材料：大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。实验内容：1、制备鼠尾胶原（两个同学一组操作）。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。制备鼠尾胶原：1、取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟；2、手持尾巴，用止血钳夹住鼠尾的，折断尾骨后拉出尾腱；3、将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡；4、重复步骤2、3，直至尾腱量够用；5、吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）；6、将尾腱置于平皿内剪碎，转移至三角烧瓶中；7、按每克尾腱50ml的比例，加入0.1%醋酸溶液；8、摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置一星期；9、离心，4000转/分，10-15分钟；10、吸取上清，分装成小瓶，4℃保存。

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：两组培养皿中，随着过氧化氢浓度的增高，均可见细胞凋亡状态明显加重，细胞存活率及细胞内过氧化氢活力明显下降，细胞凋亡率及细胞内丙二醛水平明显增高，Bcl-2/Bax比值明显降低，呈剂量依赖性。而在相同浓度过氧化氢诱导下，与对照组相比，实验组细胞凋亡状态明显减弱，细胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高，细胞凋亡率和丙二醛水平明显减低。表明鼠尾胶原对过氧化氢所致的心肌细胞氧化损伤具有保护作用，其机制可能与提高超氧化物歧化酶活力，减少丙二醛产生及提高Bcl-2的表达有关。制备鼠尾胶原：将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡。

胶原蛋白的功效与作用：1、可以作为一种补钙食品。胶原蛋白的特征氨基酸羟基脯氨酸是血浆中运输钙到骨细胞的运载工具，骨细胞中的骨胶原是羟基磷灰石的黏合剂，它与羟摹磷灰石共同构成了骨骼的主体。因此，只要摄入足够的胶原蛋白，就能保证正常机体钙质的摄入量，胶原蛋白可成制成补钙的保健食品。2、可以为特殊人群使用。妇科疾病的根源来自于内分泌失调，胶原蛋白能够改善妇科疾病的困扰，而更年期的妇女更需要胶原蛋白供给身体所需，使得更年期妇女能够更轻松面对各种不适。它是研究成纤维细胞与细胞外基质之间以及细胞之间相互作用的良好模型。宁波重庆鼠尾胶原

鼠尾胶原醋酸溶解：不要晃动或搅拌。宁波天津鼠尾胶原

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项：三维胶原的制备鼠尾胶原蛋白型在浓度1mg/ml以上，pH左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液（均需要无菌、预冷）10mg/L酚红用于pH指示）0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一般不用)，双蒸水200ul鼠尾胶原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结）立即混匀。再加入100ul10PBS10培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。宁波天津鼠尾胶原