细胞外RNA(exRNA)已成为研究界的新宠。近年来,人们在血浆或血清样本中成功检测到疾病相关的exRNA,使其有望成为非侵入性的生物标志物。然而,从血浆或血清中分离exRNA仍颇具挑战性,这一方面是因为exRNA丰度低,另一方面是因为血液中的污染物会压制PCR。商品化的试剂盒能简化和加速exRNA提取过程,已成为循环exRNA研究不可缺少的工具。然而,这些试剂盒的提取效率如何,是否能去除血浆中的污染物,是否会偏向特定的RNA,都没有经过评估,而这类评估对于结果解释和实验之间的比较都很关键。带口罩、帽子,屏住呼吸、不说话,带乳胶手套并要时常更换。成都RNA提取试剂直销厂家

Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,压制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。异硫氰酸胍氯化铯超速离心法:原理:使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效压制RNA酶的活性,经过起始密度为1.78g/ml的氯化铯介质,进行密度梯度超速离心,RNA沉淀于管底,而DNA与蛋白质在上清液中。使用这种方法,不但能得到高质量的RNA,而且能同时分离出细胞染色体DNA。太原RNA提取试剂生产厂家植物RNA提取试剂:提取的总RNA纯度极高,没有蛋白和其他杂质的污染。

新型土壤总RNA快速提取试剂盒:独特裂解剂/裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后RNA在高离序盐状态下选择性吸附于玻璃奶,然后将粗纯化的玻璃奶转移到离心柱,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将腐植酸、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,较后低盐的洗脱缓冲液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。试剂盒特点:离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。兼容性强,适用于各种不同的土壤、粪便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9以上,可直接用于PCR,Northern-blot和各种酶切反应
RNA提取试剂的选择:对于富含多糖多酚的植物类组织提取是个难点,Takara精心研发的柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以轻松解决这个问题。TaKaRaMiniBESTPlantRNAExtractionKit可以高效地从各种简单的植物组织材料(叶片、茎、幼苗等)、富含多糖多酚的植物组织材料(果实、种子等)、菌类提取高纯度的TotalRNA,适用范围普遍。按照标准流程,本试剂盒可以有效地提取分子量大于200nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含SmallRNA(<200nt)的TotalRNA。试剂盒中包含了RNA提取所需的全部试剂,无需额外购买其它试剂。在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。

RNA提取浓度不高或质量不佳原因及解决办法:1、RNA降解:可能是提取样本本身降解,或者是在提取过程中导致的降级;应当尽可能使用新鲜样本进行RNA提取,采集的样本应当及时置于液氮或者-80℃冰箱冻存,并减少反复冻融。在RNA提取过程中应当使用RNase/DNasefree的吸头、离心管及其他材料,提取过程尽可能的快,提取后的RNA应置于冰盒上并及时放于-80冻存。如提取后的RNA需要进行凝胶电泳检测,则应提取好后立刻进行电泳,电泳缓冲液应更换新配制的。2、盐及有机溶剂残留:提取试剂中含有酚及胍盐,洗涤液中含有乙醇,在提取过程中裂解液吸弃不彻底,洗液没有充分晾干导致的,残留的盐及有机溶剂对后续的逆转录和PCR均存在不同程度的压制作用,因此在提取过程中应充分去除组织裂解液,洗涤时应充分,使管壁四周均能被洗涤到,另外管子空离和吹风是必须的步骤,会进一步降低有机物残留。RNA提取试剂注意事项:间层用乙醇沉淀可回收DNA。金华RNA提取试剂厂家
在裂解液上游加入酶裂解步骤(如蛋白酶 K、溶菌酶等)。成都RNA提取试剂直销厂家
RNA提取试剂TRIpure是基于世界上使用较普遍的异硫氰酸胍/酚法研制而成的总RNA抽提试剂。在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。无论是人、动物、植物还是细菌组织,该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。TRIpure抽提的总RNA能够避免DNA和蛋白的污染,故而能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择、体外翻译、RNA酶保护分析和分子克隆等。和进口品牌实验对照显示,公司的产品质量已经达到甚至超过了进口产品的质量~成都RNA提取试剂直销厂家
安德鲁·法尔称:“克雷格和我的工作是研究为什么一些基因会停止运行,我们试图去控制它们,我们发现了一些东西可以有效地中止它们。这些基因并不能告诉你它们能做什么,所以如果你能中止它们,你就可以开始了解它们能做什么。不过,较初发现RNA现象的是一位华人学者,非常可惜,他没有进一步弄清这是为什么。”二人发现的是一个有关控制基因信息流程的关键机制。人们的基因组通过从细胞核里的DNA向蛋白质的合成机制发出生产蛋白质的指令,这些指令通过mRNA传送。他们发现一种可以用特定基因降解mRNA的方式,在这种RNA干扰现象中,双链RNA以一种非常明确的方式压制了基因表达。这项技术被用于全球的实验室来确定在各种病症中...