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外泌体提取试剂基本参数
  • 产地
  • 苏州
  • 品牌
  • 外泌体提取试剂
  • 型号
  • 齐全
  • 是否定制
外泌体提取试剂企业商机

1983年,外泌体初次于绵羊网织红细胞中被发现,1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯,对外泌体的研究兴趣日益增长,无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。如何高效地提取外泌体是实现这项新兴液体活检技术临床常规化应用的关键。通过离心筛选初步去除体液中的细胞成分和细胞碎片,制成体液样本备用。外泌体提取试剂报价

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为了分离外泌体,研究人员用两个这样的单元串联构建了一个装置。首先,使用声波从血液样品中除去细胞和血小板。一旦细胞和血小板被去除,样品进入第二个微流体单元,然后使用较高频率的声波将外泌体与稍大的细胞外囊泡分开。这项工作的通讯作者之一,麻省理工学院材料科学与工程系科学家MingDao博士说:“声波更温和。而且在分离时,这些囊泡受处理的时间只有1秒钟或更短。这是一个很大的优势。”使用该设备,处理100微升未稀释血液样本只需要不到25分钟。“这种新技术可以解决当前外泌体分离技术的缺点,如周期长,一致性差,产量低,污染以及完整性受损等。我们想要把提取高质量的外泌体的过程简化为按一个按钮就在10分钟内获得所需样品一样简单。”研究人员们说。南京外泌体提取试剂平均价格有的是通过特殊设计的过滤器过滤掉杂质成分,有的则采用空间排阻色谱法(SEC)进行分离纯化。

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用于外泌体提取的体液收集注意事项:1、选择血清还是血浆?推荐大多数研究选择血浆。血液凝固过程中血小板会产生大量外泌体,含量占血清中外泌体的50%以上,选择血浆可避免不必要的影响。2、注意抗凝剂的选择。肝素类抗凝剂与PCR假阴性有关,这可能是因为肝素与引物和/或酶有竞争作用。除了克制PCR,肝素可以与外泌体结合,阻止细胞摄取外泌体。因此需要记录肝素类药物的患者的血液样本。EDTA和双嘧达莫(CTAD),CTAD可以阻止血小板的并克制其释放外泌体。EDTA可能会干扰PCR反应(尽管其程度小于肝素),但是还是优于其他选择。此外,有研究表明钙螯合剂可在体外促进外泌体与血小板的结合从而降低经EDTA、或柠檬酸盐处理后的血液样本中外泌体的表观数量。使用肝素时这种影响就不会发生,因此建议在测量外泌体的精确数量时选用肝素。但是也有研究表明肝素可以导致体外条件下外泌体的减少。总之,目前尚需要更多的研究论证抗凝剂是否及如何对外泌体的释放,作用和下游反应产生特异性影响。

当其由宿主细胞被分泌到受体细胞中时,外泌体可通过其携带的蛋白质、核酸、脂类等来调节受体细胞的生物学活性。外泌体介导的细胞间通讯主要通过以下三种方式:一是外泌体膜蛋白可以与靶细胞膜蛋白结合,进而启动靶细胞细胞内的信号通路。二是在细胞外基质中,外泌体膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作为配体与细胞膜上的受体结合,从而启动细胞内的信号通路。有报道称一些外泌体膜上蛋白在其来源细胞膜上未能检测出。三是外泌体膜可以与靶细胞膜直接融合,非选择性的释放其所含的蛋白质、mRNA以及microRNA。人体内多种细胞及体液均可分泌外泌体,包括内皮细胞、免疫细胞、血小板、平滑肌细胞等。根据外泌体表面的特异生物化学特性通过提取试剂的特异配方把外泌体从水相中沉降下来。

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外泌体是细胞间进行物质运输和信息交流的重要工具,可以通过调节免疫功能促进一些病症的增殖,血管新生和一些病症转移。与细菌传染,帮助细菌逃避免疫关系很大,并与心血管疾病,老年痴呆等疾病具有密切关系。外泌体可通过流式、WB(检测指标有CD9,CD63,CD81)、电镜观察、NTA粒径追踪等手段检测,普遍应用于药物载体、疾病诊断marker、精细医疗、一些病症治病等方面研究。由于外泌体直径小,样本含量低,提取十分困难。已有的外泌体分离方式有密度梯度离心、超滤离心法、免疫磁珠抗体捕获、商用试剂盒等。但到目前为止,仍没有一种提取方法能同时保证外泌体的含量、纯度以及生物活性。外泌体(Exosome)是从体液(尿液、血液、唾液、腹水、胸腹水等)和细胞液中快速提取的。唐山正规外泌体提取试剂哪家好

在体内参与细胞通讯、细胞迁移、促血管新生和抗一些病症免疫等生理过程,与多种疾病的发生和进程密切相关。外泌体提取试剂报价

外泌体相关蛋白质与肺病的诊断:近年来众多文献报道,肺病细胞分泌的外泌体中富含多种蛋白质并促进肺病的发生的发展,是早期诊断肺病的有效途径。有研究发现,NSCLC患者肺组织外泌体表面EGFR免疫染色呈阳性的占80%,而慢性肺炎组织的外泌体EGFR呈阳性的只占2%,因而认为外泌体的EGFR蛋白可以用作NSCLC与慢性肺炎鉴别诊断的生物标志物。Park等通过Sys-BodyFlu-id数据库分析发现153种特异性胸腔积液外泌体蛋白质,进一步的Westernblotting分析显示多种特异性胸腔积液外泌体蛋白参与EGFR信号传导途径以促进一些病症的发生的发展,因此外泌体蛋白可能作为肺病诊断筛查的生物学标记物。近几年来,市场上已出现各种商业化的外泌体提取试剂盒。外泌体提取试剂报价

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外泌体的提取、分离方法:超高速离心法。常用的是超高速离心法,该方法是被誉为分离外泌体的“金标准”。该方法利用离心力从细胞培养液或生物流体获得外泌体,经过400×g、2000×g、10000×g的低速离心,除去细胞及大的细胞分泌物;较后超高速100000×g离心得到外泌体[12]。超高速离心因操作简单,不需要复杂的技术支持,并且成本相对较低而被普遍使用。但是该方法耗时、产率低,得到的外泌体的数量和质量很大程度上受转子的类型、转子沉降角度等因素影响,其中较主要的问题就是差速离心法获得的沉淀物是外泌体,但也会有其他的囊泡、蛋白质或蛋白和RNA的聚集体。用于外泌体提取的体液收集注意事项:注意抗凝剂的选...

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