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PAS染色试剂配制及染色方法：1.材料与方1.1实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例，均来自我室实验材料。1.2主要试剂1.2.1AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液，其配方：无水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3过碘酸溶液0.5g过碘酸（HIO）溶于100mL蒸馏水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：过碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸钠0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4无色品红液（Schiff氏液）在三角烧内加入蒸馏水500mL，煮沸后，在保持微沸的情况下，加入碱性品红2.5g，并不断摇动约5min（勿使之沸腾），使碱性品红彻底溶解（溶解液为深红色）。冷却到50℃时，过滤，加入1N盐酸50mL，再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g，塞住瓶口，摇动容器以充分混合（此时颜色明显变淡），然后避光放置或冰箱内24h。糖原的固定要及时，而且标本要新鲜。品牌糖原染色试剂盒推荐厂家

GUS染色步骤：1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保温1小时至过夜。2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次，至阴性对照材料呈白色。3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。湖南哪家生产糖原染色试剂盒平均价格过碘酸将血细胞内的糖原氧化，生成醛基。

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2）0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。（3）蒸馏水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分钟。（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用）（5）流水冲洗10分钟。（6）苏木素浸染细胞核2-3分钟。（7）脱水、透明、封盖。结果：糖原呈红色，细胞核呈蓝色。试剂配制：（1）0.5%过碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏试剂。碱性品红1g蒸馏水200ml1N盐酸（98.3ml比重1.16盐酸，加入蒸馏水成1000ml）20ml偏重亚硫酸钠或钾1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水，搅拌加热沸腾，待冷却至50℃过滤，加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处，两天后溶液变桔黄色或草黄色，然后加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色，染色效果较差。

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：PAS染色时需于暗处加盖反应，染色时间10～20min（染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度，SO浓度高，染色时间适当缩短；环境温度高，染色时间也应适当缩短，反之则需适当延长反应时间）。染色过程中不能接触伊红，以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时，较好作消化对照，即取两张连续切片，其中一张脱蜡至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如经消化处理的切片染色阴性，不经消化处理的切片染色阳性，即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠（钾）溶液配置后，不能保存，因此，必须现配现用，用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。巨幼红细胞贫血、溶血性贫血、再障的幼红细胞PAS染色为阴性。

糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化，产生醛基，与雪夫（Schiff）试剂中无色品红结合，形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫（PAS）反应。（1）雪夫液配制：碱性品红1g溶于200ml沸水中，冷却60℃时过滤，加1mmol/L盐酸20ml，再冷却至25℃左右，加偏重亚硫酸钠（Na2S2O5）2g，混合后放棕色瓶中，置暗处24h，无色即可放冰箱中保存，呈微红色，则加活性炭1～2g，吸附过滤使成无色液体，放冰箱中保存。若溶液变红，即不能再用。（2）10g/L过碘酸水溶液：过碘酸（HIO42H2O）1g,加蒸馏水至10ml。溶解后盖紧放冰箱备用，一般可用3个月，变黄则失效。适用于教学和科研上的核染色质染色,也可用于黏蛋白染色(如软骨的黏多糖)。糖原染色试剂盒推荐厂家

切出的石蜡切片要好，不能有皱褶或者刀痕，切片不能太厚。品牌糖原染色试剂盒推荐厂家

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：尽可能选取小块新鲜组织及时固定。糖原易溶于水，在酶的作用下很容易分解葡萄糖，更易溶于水，固定之前决不能用水或生理盐水等浸洗。应避免用水溶性固定液，宜采用酒精性固定液，如Carnoy液，能较好地保存糖原，但有使糖原流动到细胞一侧的现象，多数人认为是由于固定剂把细胞内的糖原推向固定剂对组织浸透的方向而造成。其他组织应用中性福尔马林固定为佳。组织在4℃左右温度内固定与保存，是针对糖的性质和避免糖原溶于水而采取的相应措施。乙醇能沉淀白蛋白、球蛋白，亦能白和糖原沉淀，但仍可溶于水，因此较好不单独使用乙醇固定，以乙醇为溶剂的混合固定液固定为佳品牌糖原染色试剂盒推荐厂家

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