培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。胰蛋白酶大豆琼脂(TSA) TGE肉汤(含TTC) 四号琼脂基础/4号琼脂基础 O/F试验用培养基(HLGB)。胰蛋白胨-胰蛋白月示-酵母提取物(TTY)培养基
液体培养基:只含有稀释的琼脂而没有固体成分的培养基称作液体培养基,这类培养基可以是透明的,也可以加入某些蛋白质、胆汁、奶酪素等物质使其呈乳白色。液体培养基的传递作用弱,在其内部微生物可以自由地游走和移动。由于养分的扩散和弥散,微生物生长比较均匀,容易观察和操作。液体培养基适用于下列技术和用途:培养非必需氧气的微生物,便于大规模分离和培养细胞,易于获得菌液。固体培养基:上面介绍的培养基中,添加2-3%琼脂成为了固体培养基。固体培养基结构较坚硬,微生物只能在上面生长,分布和传播相对固定,因此比较有利于观察某些微生物的生长,或对不同微生物胡进行分离。固体培养基适用于下列技术和用途:建立单个菌落,分离微生物混合物,培养土壤样品等。胰蛋白胨-胰蛋白月示-酵母提取物(TTY)培养基鉴别培养基用于区分不同的微生物物种。例如,肉汤葡萄糖琼脂培养基可用于区分肠球菌和革兰氏阴性菌。
预装培养基的有效期是指由于技术和保质问题而限定的使用时限。虽然预装培养基在生产过程中基本上是消毒处理的,但是在使用过程中,仍然会存在着微生物和其他污染因素对培养基的影响。因此,即使保质期未过,在使用之前也应检查其质量,并确保其适用于实验的要求。一般情况下,市售的预装培养基的保质期通常为6-12个月,但是这只是一个约定值,并不是通用值。在制造过程中,每个厂家都会考虑到不同的因素,如培养基成分、凝胶结构、包装方式和储存条件等,保质期因此也不一样。因此,在购买预装培养基时,我们应该认真查看其保质期,以便判断其可行性。
在使用预装培养基时,装有培养基的容器需要以适当的温度存储,不要将其暴露在阳光下或在高温环境中存储。因为温度过高会致使培养基变质,影响实验效果。而温度过低则会导致细胞生长缓慢,也会影响实验效果。因此在使用前需要查看培养基的理想存储条件,进行妥善的保存。当使用预装培养基时,需要进行无菌操作。先用手或棉花球蘸上医用酒精、经冷却压缩器或火烧消毒的铁钻区外部表面消毒,再取样放入容器或烧杯中。在转移前,需要仔细消毒取样的容器或烧杯,以保证悬浮在空气中的细菌和病毒不会在样品中繁殖,造成别样的影响。液体培养基普遍应用于微生物菌株的生长、染色及细胞背景下的细胞培养等方面。
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。不同种类的干粉培养基具有多种营养成分和试剂配方,它们可用于不同类型的细胞和微生物培养。APM培养基
生长细胞需要的营养物质包括碳源、氮源、微量元素和维生素等。胰蛋白胨-胰蛋白月示-酵母提取物(TTY)培养基
干粉培养基的组成:干粉培养基通常由基础草料、营养(或培养)成分、缓冲剂、指示剂、氨基酸、维生素和其他有机化合物等组成。具体成分的选择和比例取决于所需培养的微生物类型和生长条件。基础草料通常由各种蛋白质来源(如动物肌肉、黄豆、酵母等)组成,提供微生物生长所需的碳、氮、磷、硫、镁、铁等元素。营养(或培养)成分则包括转化碳源、氮源、磷酸盐、微量元素等,是培养基的主要能量源和合成原料。缓冲剂用于维持培养基的 pH 值稳定,适当的 pH 值对于微生物生长和代谢至关重要。指示剂常用于检测微生物在培养基中的生长和代谢情况,如酚红、溴蓝、氧化亚铁等。氨基酸和维生素等是微生物在生长过程中所需的营养物质,能够促进微生物的代谢和生长。胰蛋白胨-胰蛋白月示-酵母提取物(TTY)培养基