培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。自制培养基需要小心配比,防止成分误差或者污染。MEA培养基
预装培养基是一种快速而方便的微生物培养技术,通常在无菌的纸板或管中提供。它们已经含有必要的营养成分,可以直接使用于微生物,从而将实验室的培养基制备时间从几个小时缩短到几分钟。此外,预装培养基通常具有长期的稳定性,可以存储数月甚至数年而不影响到较终的微生物培养结果。虽然预装培养基可以提供必要的营养成分,但它们不能提供微生物所需要的所有物质。一些微生物需要特定的营养成分,如果预装培养基缺少这些必要成分,它们将无法生长和繁殖。此外,某些微生物需要特定的肥料和环境条件来繁殖,而预装培养基通常无法满足这些要求。Bryant and Burkey培养基杂质会影响培养基的成分,因此制备培养基时需要进行灭菌。
在细胞、组织和微生物的培养过程中,pH值的控制非常重要。不同的培养基需要不同的pH范围,以满足生长和发展的需求。pH值是指培养基中氢离子(H+)的浓度,是一个表示溶液酸碱性的指标。pH值的数值越小,表示溶液越酸性。pH值的数值越大,表示溶液越碱性。pH值的中性为7。pH值对细胞和微生物生长和发展有着重要的影响。过高或过低的pH值都会影响生命体的正常生长。pH值的小幅度变化就足以影响酶的活性,从而影响代谢和生长。因此,对于细胞、组织和微生物的研究,必须控制好培养基的pH值。
预装培养基在实验室中的应用越来越普遍,但是在运输和储存过程中容易受到一些影响。因此,需要对预装培养基的运输进行注意和保护。在运输过程中需要遵循一定的规范,包装材料要符合环保要求,并且要使用专业的保护材料进行包装,保证在运输过程中预装培养基的完好性。在选购预装培养基时要选择正规可靠的生产厂家,产品质量要好,取样过程要规范,保证培养基的成分准确无误,细菌的生长情况更为良好。在运输过程中需要注意温控问题,保证预装培养基在运输中能够维持稳定的温度,且温度不至于过高或者过低,以免影响生长质量。在实验室中使用预装培养基时需要注意正确的保存方法,按照生产厂商的说明进行保存,并注意消毒问题,尽量防止预装培养基的受污染。培养基是生物学实验中必不可少的组成部分之一。
选择和配置培养基是生物实验中的重要步骤。在选择培养基时,需要考虑微生物或细胞的种类、生长条件、培养目的等因素。同时,还需要注意培养基的配方和制备过程,以确保培养基的质量和稳定性。在配置培养基时,需要按照一定的步骤和比例称取各种成分,并加入适量的水混合均匀。为了确保培养基的质量,需要对培养基进行检查和筛选。一般来说,可以通过显微镜观察菌落形态、颜色等方法来初步判断培养基的质量。此外,还可以采用比色法等生化实验方法对培养基中的营养成分进行定量分析,以确保培养基的适宜性和稳定性。长期保存培养基的实验室应采取措施,防止其硬化和污染。B12琼脂培养基
固体培养基包括琼脂或血琼脂,它们的主要作用是提供一个支撑基质以帮助细胞滋生。MEA培养基
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。MEA培养基