应用蛋白质糖基化分析Endo H常用于分析蛋白质的糖基化模式。通过Endo H处理,可以移除蛋白质上的高甘露糖型糖链,从而简化糖链结构,便于进一步的分析。生物制药在生物制药领域,Endo H用于改善重组蛋白药物的糖基化质量。通过调整培养条件和使用Endo H,可以优化蛋白质的糖链结构,提高药物的疗效和稳定性。疾病研究Endo H也在疾病相关蛋白质的糖基化研究中发挥作用。例如,肿瘤细胞表面的糖链结构与正常细胞不同,Endo H可用于研究这些变化及其在疾病进展中的作用。前景展望随着对蛋白质糖基化重要性认识的增加,Endo H的应用范围预计将进一步扩大。未来研究可能会集中在开发更高效、专一性的Endo H变体,以及探索其在个性化医疗和精细中的应用。结论Endo H作为一种重要的工具酶,在糖生物学研究和蛋白质工程中扮演着关键角色。深入理解其结构和功能,将有助于推动相关领域的科学进展和临床应用。糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。Recombinant Human CD44 Protein,hFc Tag

透明质酸酶,英文名称Hyaluronidase,一类能够降低体内透明质酸活性的酶的总称,结构上由4个相同亚基构成,每个亚基分子量接近14kDa,该酶是一种糖蛋白,包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺。功能上该酶可随机裂解透明质酸、软骨素和硫酸软骨素中的β-N-乙酰己糖胺-[1→4]糖苷键。常与胶原酶联合使用于降解细胞外基质,从而从组织中分离活细胞。本品来源于牛睾丸,活力值为400–1,000units/mg,合适的pH值为4.5–6.0。产品性质中文别名(ChineseSynonym)玻璃糖醛酸酶;玻璃酸酶英文别名(EnglishSynonym)Hyaluronoglucosaminidase;Hyaluronate4-glycanohydrolaseCAS号(CASNO.)37326-33-3来源(Source)牛睾丸分子量(MolecularWeight)~55kDa类型(Type)I-S外观(Appearance)淡黄色至米黄色至褐色粉末Recombinant Biotinylated Human FcRn Protein,His-Avi Tag透明质酸酶,英文名称Hyaluronidase,一类能够降低体内透明质酸活性的酶的总称,结构上由4个相同亚基构成。

牛凝血酶(Bovine Thrombin),作为一种高特异性的丝氨酸蛋白水解酶,具有重要的生物学功能的科研应用。本文综述了牛凝血酶的分子特性、生物学作用及其在医学研究中的应用。引言凝血酶是血液凝固过程中的关键酶,负责将纤维蛋白原转化为纤维蛋白,从而促进血栓形成。牛凝血酶因其高比活度(>2000 IU/mg)和高纯度,在生物医学研究中用作工具酶。材料与方法产品来源与纯化:牛凝血酶从牛血浆中提取,并通过一系列生物技术手段进行纯化。活性测定:利用特定的底物或荧光共振能量转移(FRET)底物测定凝血酶活性。应用研究:通过体外实验和体内模型,研究牛凝血酶在血液学、分子生物学和药物开发中的应用。结果分子特性:牛凝血酶由两条肽链组成,分子量约为37 KD,具有高度的专一性和高效的催化能力。生物学作用:牛凝血酶能够催化纤维蛋白原水解释放A肽和B肽,形成纤维蛋白单体,参与血液凝固和伤口愈合。科研应用:牛凝血酶在重组蛋白的特异性断裂、基因工程产品开发、以及作为诊断学中的凝血化验工具等方面展现出重要价值。
N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义(UnitDefinition)1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-15~-25℃保存,有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白(1-20μg),至终体积10μL;2)100℃温度下煮沸10min使其变性,冰上冷却,离心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去离子水,总反应体积20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。非变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白(1-20μg)至体积为20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,轻轻混匀。3)37°C孵育4-24h。注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。[Tyr1]-MIF-1配方:溶解于20 mM PBS, pH 7.4, 130 mM NaCl溶液中,并经0.22μm过滤后冻干而成。

大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质,由于只需要简单的培养基和条件,因此费用低且方便。此外,除了无细胞表达,它是速度的系统,大肠杆菌倍增时间(约20min)比酵母(2h)、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说,在大肠杆菌中表达重组蛋白包括:1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌;2.培养细胞至对数生长期;3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后,相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的,以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类:E.coliRNA聚合酶转录的载体肠激酶能够特异性识别并切割含有Aspartate-Aspartate-Aspartate-Lysine (DDDK) 序列的蛋白质。Recombinant Human IDH1 Protein,His Tag
透明质酸的生物相容性使其在生物材料领域具有潜在应用,如作为药物递送载体。Recombinant Human CD44 Protein,hFc Tag
抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。Recombinant Human CD44 Protein,hFc Tag
重组人SPARC蛋白(His Tag)是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了His标签,便于纯化和检测。SPARC(Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine)是一种分泌性糖蛋白,广存在于细胞外基质中,参与多种生物学过程,包括细胞黏附、迁移、增殖以及组织修复和重塑。它在胚胎发育、伤口愈合、病发生和心血管疾病中发挥重要作用。SPARC的功能与机制SPARC通过其富含半胱氨酸的结构域与其他细胞外基质蛋白(如胶原蛋白、纤连蛋白)相互作用,调节细胞外基质的组装和重塑。此外,SPARC还通过与细胞表面受体(如整合素)结合,影响细胞的黏附、迁移和增殖。在...