抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。肠激酶能够特异性识别并切割含有Aspartate-Aspartate-Aspartate-Lysine (DDDK) 序列的蛋白质。Recombinant Human CTACK/CCL27

N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义(UnitDefinition)1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-15~-25℃保存,有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白(1-20μg),至终体积10μL;2)100℃温度下煮沸10min使其变性,冰上冷却,离心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去离子水,总反应体积20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。非变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白(1-20μg)至体积为20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,轻轻混匀。3)37°C孵育4-24h。注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。Recombinant Human IL-18全长A2aR蛋白具有天然完整构象,VLP(病毒样颗粒)固有特征可以带来更高的免疫原性。

PE-labeledHumanHLA-A*02:01&B2M&P53R175H(HMTEVVRHC)TetramerProtein,His-AviTag性能参数表达区间及表达系统(Source)PE-labeledHumanHLA-A*02:01&B2M&P53R175H(HMTEVVRHC)TetramerProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-Terminus.PE-labeledHumanHLA-A*02:01&B2M&P53R175H(HMTEVVRHC)TetramerisassembledbybiotinylatedmonomerandPE-labeledstreptavidin.ItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*02:01),Ile21-Met119(B2M)andHMTEVVRHCpeptide.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.制剂(Formulation)Suppliedas0.22μmfilteredsolutionin20mMPB,500mMNaCl,0.2%BSA(pH8.0).储存条件Theproductshouldbestoredat-85~-65℃for3monthfromdateofreceipt.Recommendtoaliquottheproteinintosmallerquantitieswhenfirstusedandavoidrepeatedfreeze-thawcycles.
3C-like蛋白酶是中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)等其它冠状病毒的繁殖过程中极为重要的蛋白酶。它已成为人类在抗冠状病毒领域中的研究热点。本文基于计算生物学方法对与MERS-CoV同属的蝙蝠冠状病毒HKU4(HKU4-CoV)的43个肽类3C-like蛋白酶抑制剂分子,建立三维定量构效关系(3D-QSAR)模型。在基于配体叠合的基础上,发现比较分子相似性指数分析法(CoMSIA)中的四个场组合(位阻场、静电场、氢键供体场与氢键受体场)为比较好的模型(Q2=0.522,Rncv2=0.996,Rpre2=0.904;Q2:交叉验证相关系数,Rncv2:非交叉验证相关系数,Rpre2:验证集分子的预测值相关系数),并借助该模型通过分子对接(docking)与分子动力学(MD)方法阐明了配受体结合作用。实验结果表明:(1)基于比较好的CoMSIA模型基础上的三维等势图形象地说明了分子基团的位阻作用、静电作用、氢键供体与氢键受体作用对分子生物活性的影响;(2)分子对接研究结果显示了疏水性以及结晶水、氨基酸His166和Glu169在配体和受体结合过程中产生重要作用;全长跨膜蛋白CB1它通过与G蛋白的相互作用,调节细胞内的第二信使系统,如cAMP水平。

Trop-2,alsoknownasepithelialglycoprotein-1antigen(EGP-1),isaproteinthatinhumansisencodedbytheTACSTD2gene.Mutationsofthisgeneresultingelatinousdrop-likecornealdystrophy,anautosomalrecessivedisordercharacterizedbyseverecornealamyloidosisleadingtoblindness.产品性质别名EGP1;EGP-1;TROP2;GA733-1;gp50;T16;TACSTD2;TROP-2;M1S1;TACD2UniprotNo.P09758表达区间及表达系统RecombinantBiotinylatedHumanTROP-2/TACSTD2ProteinisexpressedfromHEK293cellswithHistagandAvitagattheC-terminal.ItcontainsHis27-Thr274.分子量TheproteinhasapredictedMWof30.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto46-55kDabasedonTris-BisPAGEresult.纯度>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC活性ELISAData:ImmobilizedAnti-TROP-2Antibody,hFcTagat0.5μg/mL(100μL/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanTROP-2,HisTagwiththeEC50of24.1ng/mLdeterminedbyELISA.0EUper1μgoftheproteinbytheLALmethod.制剂Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally5%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.全长跨膜蛋白CB1,即受体1(Cannabinoid Receptor 1),是一种G蛋白偶联受体(GPCR)。Influenza Hemagglutinin (307-319)
α-凝血酶不仅在凝血中起作用,还在细胞信号中发挥作用。它可以启动血小板并刺激炎症介质的产生。Recombinant Human CTACK/CCL27
糖苷内切酶H是一种重组糖苷酶,能够对N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖结构进行切割,去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖。糖苷内切酶H克隆自褶皱链霉菌(Streptomycesplicatus)。并在酵母中重组表达。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括糖苷内切酶S(Cat#20413ES),酵母重组表达的N-糖苷酶F(比活性:750000U/mL),酵母重组表达的N-糖苷酶F(比活性:100000U/mL)。储存条件-15~-25℃保存,有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白(1-20μg),至终体积10μL;2)100℃温度下煮沸10min使其变性,冰上冷却,离心10秒;3)加入2μL的Buffer2,8μL去离子水,总反应体积20μL;4)加入1-2μL的EndoH,轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。5)65℃下热失活10分钟。非变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白(1-20μg)至终体积为20μL。2)加入2~5μL的EndoH,轻轻混匀。3)37°C孵育4-24h。注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加EndoH的量和延长孵育时间。Recombinant Human CTACK/CCL27
重组人整合素αVβ5(ITGAV&ITGB5)异源二聚体蛋白(His-Avi标签)是一种重要的细胞粘附分子,广泛应用于细胞生物学、药物筛选和疾病机制研究。整合素αVβ5由αV(ITGAV)和β5(ITGB5)两个亚基组成,是细胞外基质(ECM)与细胞之间信号传递的关键介质,尤其在转移、血管生成和病毒沾染等过程中发挥重要作用。该重组蛋白通过基因工程技术在哺乳动物细胞中表达,确保了其天然的构象和生物活性。His标签便于通过金属螯合亲和层析进行纯化,而Avi标签则允许通过生物素连接酶进行特异性生物素化,便于后续的检测、固定或与其他分子的偶联。这种双重标签设计更大提高了蛋白在实验中的可操作性和应用灵活...