Recombinant Cynomolgus IL-3 Protein

Endo H糖苷内切酶H：结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H（Endo H）是一种专门切割N-连接糖链的内切酶，用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式，涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶，能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键，从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌（Hemophilus influenzae），其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成：一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基，这些残基与糖链的特定结构相互作用，导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应，需要水分子的参与。酵母重组表达N-糖苷酶F（PNGase F）是一种通过酵母重组表达系统生产的酶。Recombinant Cynomolgus IL-3 Protein,His Tag

糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义（UnitDefinition）1个酶活力单位指在10μL的反应体系中，37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-25~-15℃保存，有效期1年。使用方法1、变性条件下蛋白质去糖基化：1）在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白（1-20μg），至终体积10μL；2）100℃温度下煮沸10min使其变性，冰上冷却，离心10秒；加入2μL的Buffer2、2μL的10％NP-40、6μL去离子水，总反应体积20μL；加入1-2μL的PNGase，轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。2、非变性条件下蛋白质去糖基化：1）在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白（1-20μg）至体积为20μL。2）加入2~5μL的PNGaseF,轻轻混匀。3）37°C孵育4-24h。注意：在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化，在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。注意事项1.PNGaseF建议搭配我司提供的配套缓冲液使用，按我司说明书建议的操作量配套缓冲液足够。如您由于使用体系造成配套缓冲液不足，可咨询当地销售进行购买Recombinant Mouse DKK1 Protein,His Tag这类蛋白质在细胞的信号传递、物质转运、细胞间识别等多种细胞功能中扮演着重要的角色。

产品性质英文别名（EnglishSynonym）Factor-1CAS号（CASNO.）9001-32-5外观（Appearance）白色至类白色冻干粉末或块状物蛋白含量（ProteinContent）50-70%protein（(≥85%ofproteinisclottable)溶解性（Solubility）溶于0.9%生理盐水（10mg/ml），不溶于水运输和保存方法冰袋运输。-20℃保存，有效期4年。注意事项1）纤维蛋白原一般应采用37℃的生理盐水溶解，溶解时温度不宜过低，在4℃条件下以及不含盐的溶液中难以溶解。注意纤维蛋白原溶液在50℃以上变性，因此加热温度不宜超过50℃。2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。3）本产品作科研用途！储存液配制牛纤维蛋白原可溶于0.9%NaCl溶液，配制成2.5-10mg/ml的溶液于-20℃冻存，无菌过滤后可稳定保存约1周。注：①溶解时将本品缓慢置于37℃预热的生理盐水，可轻轻搅动使其慢慢溶解，不可旋涡震荡！②过滤时建议用0.2µm滤膜过滤，不可用0.1µm滤膜。可使用注射器缓慢过滤，不可用真空过滤。

大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质，由于只需要简单的培养基和条件，因此费用低且方便。此外，除了无细胞表达，它是速度的系统，大肠杆菌倍增时间（约20min）比酵母（2h）、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说，在大肠杆菌中表达重组蛋白包括：1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌；2.培养细胞至对数生长期；3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后，相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的，以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类：E．coliRNA聚合酶转录的载体随着医药科技的发展，透明质酸在医药这方面的应用将越来越多，包括作为药物载体和组织工程的基质。

泛素化是通过三个酶促步骤实现的。在ATP依赖的过程中，泛素酶(E1)催化与泛素形成活性硫酯键，然后转移到泛素载体蛋白的活性位点半胱氨酸(E2)。泛素级联对特定底物蛋白的选择性依赖于E2结合酶(细胞中包含的相对较少)和泛素-蛋白连接酶(E3)之间的相互作用，迄今为止已经鉴定出600多种这种酶。E3s是一个大的，多样化的蛋白质组，其特征是几个确定的基序之一。这些包括HECT(与e6相关蛋白c端同源)，RING(真正有趣的新基因)或U-box(没有Zn2+结合配体的完整补充的修饰的RING基序)结构域。而HECTE3s在泛素化过程中具有直接的催化作用，RING和U-boxE3s促进蛋白质泛素化。后两种E3类型充当适配器类分子。它们使E2和底物足够接近，从而促进底物的泛素化。虽然许多RING-typee3，如MDM2和c-Cbl，可以单独发挥作用，但其他一些是作为更大的多蛋白复合体的组成部分，如后期促进复合体。综上所述，这些多面的特性和相互作用使E3s能够利用泛素-蛋白酶体系统，在真核生物的所有细胞中提供一种强大而具体的蛋白质机制。该筛选了11种常用E2结合酶，可以筛选具有E3连接酶活性的蛋白所匹配的E2酶.PNGase F可以用于从糖蛋白上释放完整的N-连接寡糖链，这在蛋白质组学和糖生物学研究中非常有用。Recombinant Mouse GDF15 Protein,His Tag

α-凝血酶在肝脏中作为非活性前体-凝血酶原合成，在凝血级联反应中被启用，这种活性酶由285个氨基酸组成。Recombinant Cynomolgus IL-3 Protein,His Tag

生物学功能纤维蛋白原在凝血过程中起到决定性作用。当血管受损时，凝血酶激发纤维蛋白原，转化为不溶性的纤维蛋白，形成稳定的凝块，从而实现止血。医学应用凝血障碍纤维蛋白原注射液可用于先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症，以及手术中的异常出血。功能性食品添加剂免疫球蛋白因其特殊的免疫生理功能，被研究作为功能性食品添加剂。药物载体牛血清白蛋白（BSA）常作为药物分子的载体，用于研究药物在体内的运输和代谢过程。前景展望随着蛋白质工程技术的发展，牛血浆中纤维蛋白原的大规模生产和应用前景广阔。未来研究应着重于提高提取效率、降低成本，并扩大其在新药开发、组织工程和诊断学等领域的应用。结论牛血浆中的纤维蛋白原不仅在凝血过程中发挥着关键作用，而且在医学研究中具有重要价值。通过优化提取和纯化工艺，可以更好地利用这一资源，为人类健康做出贡献。Recombinant Cynomolgus IL-3 Protein,His Tag