营养肉汤(NutrientBroth,简称NB)是一种常用的细菌培养基,它的定义、应用和制备方法如下:1.**定义**:营养肉汤,也被称为普通肉汤,是一种用于细菌类疫苗检验的培养基,如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**:营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**:营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制备方法**:-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml,混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中,搅拌均匀后,使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2,然后分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**:营养肉汤用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。尿素琼脂基础(pH7.2)是一种用于微生物学检验的培养基,主要用于检测和鉴别细菌是否能够产生尿素酶。pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液 ChP/USP/EP
桔汁琼脂(OSA,OrangeSerumAgar)是一种用于饮料中耐酸细菌分离培养的培养基。它的pH值通常控制在5.5±0.2(25℃),这个pH值范围有助于选择性地分离耐酸性的微生物,如乳酸菌,这些微生物是饮料中引起坏的主要微生物之一。**桔汁琼脂的基本成分**包括:-桔汁浸粉:10.0g/L-酵母浸粉:3.0g/L-胰蛋白胨:10.0g/L-葡萄糖:4.0g/L-磷酸氢二钾:2.5g/L-琼脂:17.0g/L**配制方法**:1.称取46.5克桔汁琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.加热煮沸至完全溶解。4.121℃高压灭菌10分钟。5.冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中备用。**用途**:用于饮料中耐酸细菌的分离培养,特别适用于分离引起饮料坏的乳酸菌。**植物乳杆菌在桔汁琼脂上的生长特征**:形成乳白色菌落。**储存条件**:干粉培养基应放置于10-30℃条件下保存,制成培养基后应避光置于2-8℃条件下保存。**注意事项**:避免过分加热该培养基,以防琼脂沉积于器皿底部而凝固。
GAM肉汤(GlycerolAlanineMeatbroth)是一种常用于微生物学实验室中的培养基,它具有以下特点:1.**成分**:GAM肉汤的主要成分包括大豆胨、口胨、消化血清粉、酵母浸膏、牛肉膏、牛肝膏(粉)、葡萄糖、KH2PO4、可溶性淀粉、L-半胱氨酸盐、硫乙醇酸钠和肉汤(牛心汤)等。2.**pH值**:培养基的pH值通常调节在7.2至7.4之间,并在10磅高压下灭菌15分钟。3.**用途**:GAM肉汤用于厌氧菌的培养,是一般培养基的基础。它营养丰富,使用时无需加血,适用于各类厌氧菌的增菌。4.**制备方法**:按照标准配方混合各组分,经过适当处理和消毒制备成GAM肉汤培养基。5.**应用**:GAM肉汤培养基广泛应用于菌种的生长、保存和实验操作。它支持多种微生物的生长,并在菌种冷冻保存中表现出良好的效果。6.**贮藏方法**:室温下保存并需要防潮,使用期限为3年。7.**厌氧性细菌培养**:GAM肉汤是为厌氧性细菌设计的液体培养基,适合用于微量液体培养基稀释法来测定药剂的敏感性。8.**高压灭菌**:在使用前,GAM肉汤需要在115℃下进行15分钟的高压蒸汽杀菌后再进行急剧冷却,注意在过程中严禁振动培养基。
DTM培养基基础(DermatophyteTestMediumBase),也称为皮肤癣菌试验培养基基础,是一种用于培养皮肤癣菌的选择性培养基。其主要用途是用于食品中菌的培养,以及用于分离和鉴别皮肤癣菌。**DTM培养基的基本成分**包括大豆蛋白胨、葡萄糖、硫酸庆大霉素、金霉素、苯酚红和琼脂等。大豆蛋白胨提供氮源、维生素及生长因子;葡萄糖作为可发酵糖类提供碳源;硫酸庆大霉素和金霉素能够抑制细菌生长;苯酚红作为酸碱指示剂;琼脂作为培养基的凝固剂。**配制方法**一般是:称取DTM培养基基础37.4克,加热溶解于1000ml蒸馏水中,每瓶200ml,121℃高压灭菌10分钟,冷却至50℃左右时,每200mL加入一支DTM添加剂1(放线菌酮100mg),混匀后倾入无菌平皿。**使用时**,DTM培养基可以通过其颜色变化来识别菌的生长。例如,某些菌生长可能会使培养基颜色由红变黄。这种颜色变化有助于分离和早期识别小孢子菌属(Microsporum)和毛癣菌属(Trichophyton)的菌种。**注意事项**包括避免摄入、吸入、皮肤接触。配制时应在通风橱中进行,戴口罩、手套、护目镜。DTM培养基应放置阴凉干燥处保存。
PYG培养基是一种专门用于双歧杆菌增菌培养的培养基,其特点主要包括:1.**成分**:PYG培养基的主要成分包括蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、半胱氨酸盐酸盐、氯化钙、硫酸镁、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和碳酸氢钠。这些成分为双歧杆菌提供氮源、维生素、生长因子以及必要的缓冲剂。2.**pH值**:PYG培养基的pH值通常控制在6.0±0.1(25℃),以保证双歧杆菌的生长环境。3.**厌氧条件**:由于双歧杆菌是厌氧菌,PYG培养基需要在厌氧或微需氧条件下使用,以确保细菌的正常生长。4.**添加物**:为了促进双歧杆菌的生长,PYG培养基在使用时还需添加维生素K1和氯化血红素,这些添加剂提供了双歧杆菌生长所需的额外生长因子。5.**配制方法**:通常需要称取一定量的PYG培养基干粉,溶解在蒸馏水中,经过高压灭菌后,冷却至适当温度,再加入过滤除菌的维生素K1溶液和氯化血红素溶液,混匀后使用。6.**质量控制**:PYG培养基的质量控制包括对质控菌株的生长情况进行观察,以确保培养基的效果。例如,长双歧杆菌和婴儿双歧杆菌在PYG培养基上的生长情况通常表现为圆形凸起,奶油色,边缘整齐光滑的菌落。MEE肉汤(MEE Broth)是一种用于肠道菌选择性增菌培养的培养基。如大肠杆菌等肠杆菌科细菌的检测和分离。固氮螺菌培养基
这种培养基具备较高的透明度,便于观察微生物的生长状态和特征。pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液 ChP/USP/EP
肠球菌肉汤(EnterococcusBroth)是一种专门用于增菌培养肠球菌的微生物培养基。它的特点和应用如下:1.**成分**:肠球菌肉汤的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛胆粉、氯化钠、柠檬酸钠、七叶苷、柠檬酸铁铵和叠氮化钠等。这些成分为肠球菌提供氮源、维生素和生长因子,同时维持适宜的渗透压和提供选择性抑制其他非目标菌种的环境。2.**选择性**:牛胆粉和叠氮化钠作为选择性抑菌剂,有助于抑制非链球菌的细菌生长,特别是对革兰氏阴性细菌有抑制作用。3.**应用**:该培养基主要用于食品和水中肠球菌的鉴别培养,如GB/T5750.12-2023生活饮用水标准中提到的应用。4.**制备方法**:通常将肠球菌肉汤的粉末配方溶解在蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解,然后进行高压灭菌,以确保无菌。5.**质量控制**:在36±0.5℃培养24小时后,可以观察到特定菌株的生长情况。例如,粪链球菌(CMCC(B)32223)在肠球菌肉汤中生长良好,呈现棕黑色,并具有棕色晕轮,而金黄色葡萄球菌(ATCC6538)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)则被抑制,不生长或生长很差。pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液 ChP/USP/EP