营养肉汤(NutrientBroth,简称NB)是一种常用的细菌培养基,它的定义、应用和制备方法如下:1.**定义**:营养肉汤,也被称为普通肉汤,是一种用于细菌类疫苗检验的培养基,如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**:营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**:营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制备方法**:-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml,混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中,搅拌均匀后,使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2,然后分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**:营养肉汤用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。动力吲哚尿素(MIU)培养基基础是一种用于细菌复合生化试验的培养基,它允许进行多个试验的同步进行。土壤提取液
匹克氏肉汤基础A是一种用于溶血性链球菌选择性增菌培养的培养基。它的主要成分包括胰蛋白胨、牛心浸粉、叠氮钠和结晶紫,这些成分为溶血性链球菌提供所需的碳氮源、维生素、生长因子以及选择性抑菌剂。具体的配方为:胰蛋白胨10.0克/升,牛心浸粉20.0克/升,叠氮钠0.065克/升,结晶紫0.002克/升,pH值在7.3-7.5之间(25℃时)。制备方法如下:首先称取30.0克的匹克氏肉汤基础A,加热溶于1000毫升的蒸馏水中,分装后在121℃下高压灭菌15分钟。灭菌后冷却至大约50℃,然后加入脱纤维羊血,混匀备用。这种培养基的使用可以帮助实验室人员在微生物学研究和诊断中更有效地培养和识别溶血性链球菌。含铁牛奶培养基(含铁牛乳培养基)BCPA 培养基针对特定微生物的筛选和培养具有高度的特异性,能有效分离目标微生物。
除了DRBC培养基,适合霉菌分离的培养基还包括:1.**马铃薯葡萄糖琼脂(PotatoDextroseAgar,PDA)**:这是一种常用的培养基,适用于多种霉菌的生长,是霉菌实验室检验的标准培养基之一。2.**孟加拉红琼脂(RoseBengalAgar)**:含有孟加拉红染料,可以抑制细菌的生长,同时促进霉菌的生长,特别适用于酵母和霉菌的分离。3.**高盐察氏培养基(HighSaltCzapek'sAgar)**:适用于耐高盐环境霉菌的分离和计数,常用于食品中霉菌总数的测定。4.**氯硝胺18%甘油培养基(DG18)**:在研究中发现,这种培养基对黄曲霉的分离效果很好,能够抑制毛霉的生长。5.**YES培养基**:用于培养酵母和霉菌,具有较好的分离效果。6.**沙氏葡萄糖琼脂(SabouraudDextroseAgar,SDA)**:中国药典推荐的霉菌计数培养基,常用于霉菌和酵母的计数。7.**霉菌培养基(含琼脂和氯霉素)**:这种培养基含有氯霉素,可以抑制细菌的生长,同时促进霉菌的生长。每种培养基都有其特定的应用场景和优势,选择合适的培养基可以根据霉菌的类型和检验目的来确定。
SSM琼脂是一种强选择性培养基,其成分包括胨、牛肉膏等氮、碳源,以及其他选择性抑制剂和缓冲剂。这种培养基的设计旨在分离致病的沙门氏菌和志贺氏菌。以下是SSM琼脂的一些关键特点和制备方法:1.**成分**:SSM琼脂的基础成分包括牛肉膏、蛋白胨、酵母膏粉等,这些提供碳源、氮源、维生素和矿物质。此外,还含有乳糖、三号胆盐、枸橼酸钠、硫代硫酸钠、枸橼酸铁铵、中性红和煌绿等特殊成分,这些成分有助于抑制其他微生物的生长,同时促进目标菌的生长。2.**pH值**:SSM琼脂的pH值通常控制在6.9-7.1之间,以保证微生物的生长环境。3.**制备方法**:首先,称取培养基粉末,加入到适量的蒸馏水中,加热煮沸并不断搅拌直至完全溶解。然后,冷却至50℃左右,倾入无菌平皿中备用。通常不需要高压灭菌,因为培养基中的某些成分可能在高压灭菌过程中失去活性。4.**应用**:SSM琼脂主要用于沙门氏菌的分离培养,也适用于志贺氏菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌等肠道致病菌的分离培养。在这种培养基上,多数沙门氏菌不发酵乳糖,并产硫化氢,菌落表现为无色透明并有黑色中心。其含有酚磺酞指示剂,可根据颜色变化清晰指示细菌发酵糖类产生的酸碱性变化,便于观察。
胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)是一种通用的营养培养基,广泛应用于各种微生物的培养。以下是TSB的一些关键特点和应用:1.**成分**:TSB的主要成分包括胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化钠、磷酸氢二钾和葡萄糖。这些成分提供微生物所需的氮源、维生素、生长因子、碳源、缓冲剂和渗透压维持剂。2.**pH值**:TSB的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃)。3.**制备方法**:称取TSB培养基30.0g,加热搅拌溶解于1000ml纯化水中,分装于试管或其他容器中,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**应用**:TSB培养基用于药品及生物制品的无菌测试及药品微生物限度检查中供试品的稀释或增菌。它特别适合于无菌工艺环境中源自人体的细菌、芽孢和菌的培养。5.**质量控制**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和黑曲霉等,放置30-35℃需氧培养18-24小时,以确保培养基的质量符合标准。6.**储存条件**:TSB培养基应贮存于避光、干燥处,用后立即旋紧瓶盖;未开封产品保质期三年。LB琼脂主要由胰蛋白胨(10g/L)、酵母提取物(5g/L)、氯化钠(10g/L)和琼脂(15-20g/L)组成。我妻氏血琼脂基础
西蒙氏柠檬酸盐琼脂的主要成分有氯化钠、柠檬酸钠、磷酸二氢铵、磷酸氢二钾、硫酸镁、溴麝香草酚蓝和琼脂。土壤提取液
Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。土壤提取液