大肠杆菌的耐药可以是天然固有的,也可以通过后天的基因突变、基因转移获得。固有耐药性(intrinsicresistance),即耐药性的产生并不依赖于抑菌药物的存在,而是细菌细胞所固有的,与细菌的遗传和进化密切相关。固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。获得性耐药(acquiredresis—tance)是指细菌在抑菌药物选择性压力存在下经过基因突变,或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。主要包括移动因子和抑菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。就目前的研究现状来看,大肠杆菌的耐药性机制主要有5种:①抗s素作用位点的改变或新作用位点的产生。②酶对抗s素的修饰和破坏。③增加抗s素从大肠杆菌向细胞外的主动排出作用。④细菌外膜通透性的改变。⑤质粒介导的耐药性。一种耐药机制可以对多种抗s素表现为抗性,同一种抗s素也常常出现多种耐药性机制共同抑制的现象。枯草芽孢杆菌在液体培养基中生长时,常形成皱醭。叶近藤氏酵母
关于铜绿假单胞菌的砂土保存法,主要是取清洁的砂,过60目筛去掉大砂粒,并用磁铁吸去砂中铁屑,再用NaOH溶液、10%HCl溶液和水交替清洗数次,干燥后,置于试管或安瓶管中保持2~3cm深,再经干热灭菌后,加入1毫升菌种培养液,经充分混匀后,放入真空干燥器中,完全干燥后熔封保存。也可用二份洗净的砂(经HCl预处理)和一份贫瘠、过筛的黄土搀和后灭菌,再进行菌种保藏。在螺旋口试管中装入1/2管高的硅胶(或无水CaSO4),上铺玻璃棉,再放上10~20粒磁珠,经干热灭菌后,接入菌悬液,然后冷藏、室温保藏或减压干燥后密封保藏。本法对酵母菌很有效,特别适用于根瘤菌,可保存长达两年半时间。莫氏假单胞菌菌种铜绿假单胞菌存在的重要条件是潮湿的环境。
铜绿假单胞菌的检测方法成为纤维及其制品检测铜绿假单胞菌的依据。检测铜绿假单胞菌的操作步骤为,制备样液;样液在培养液中,置(35+2)摄氏度增菌培养18h~24h;挑取培养物,于十六烷三甲基溴化铵琼脂平板.上画线接种,置(35土2)摄氏度分离培养18h~24h;取可疑菌落涂片,做革兰氏染色,镜检为革兰氏阴性菌者应进行生化试验。被检样品经增菌、分离培养后,证实为革兰氏阴性杆菌,氧化酶及绿脓菌素试验均为阳性者,即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。如绿脓菌素试验阴性而明胶液化、硝酸盐还原产气和42摄氏度生长试验三者皆为阳性时,仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。
利用较低温甘油保存法保存铜绿假单胞菌菌种时,要将保存的铜绿假单胞菌接种于1.7毫升肉汤管中,在37摄氏度恒温培养箱培养18小时后加人无菌甘油0.3毫升,使甘油浓度为15%,充分混匀,吸取1毫升分装于无菌的冷冻管或1.5毫升离心管,封好盖子,在-20摄氏度冰箱中放置3小时后,置-70摄氏度冰箱中长期保存。菌种复苏:从-70摄氏度冰箱中取出一只菌种保存管(已保存2年3个月),迅速用接种环轻轻刮取几下,转种于已预温到37摄氏度的普通琼脂平板上,37摄氏度培养18~24小时。半固体保存法,要用接种针挑取少量菌苔移种于无菌半固体培养管,肉汤中加人琼脂粉至终浓度为0.25%,于37摄氏度培养18小时;用无菌方法将培养管的软木塞换为灭菌的橡胶塞后,放人菌种保存箱4摄氏度保存。枯草芽孢杆菌能够很好的促进作物根系及植株生长,提高作物的抗病性。
悬液保存法是铜绿假单胞菌混悬于适当溶液中进行保存的方法,蒸馏水保存法将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。糖液保存法将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。载体保存法将铜绿假单胞菌吸附在适当载体上进行干燥保存的方法,土壤保存法主要用于能形成孢子或孢囊的铜绿假单胞菌菌种的保藏。方法是在灭菌的土壤中加入菌液,立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥,然后冷藏或在室温下密封保存。保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜,土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长,铜绿假单胞菌在液体表面形成菌落。叶近藤氏酵母
枯草芽孢杆菌具有较强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性,促进饲料中营养素降解。叶近藤氏酵母
大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)通常称为大肠杆菌,约占肠道菌中的1%。是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。大肠杆菌在1885年由Escherich发现,它分布在自然界,大多数不致病,主要附生在人或动物的肠道里,为正常菌群。少数大肠杆菌具有毒性,可引起疾病。婴儿出生后大肠杆菌即随哺乳进入肠道,其代谢活动能抑制肠道内分解蛋白质的微生物生长,减少蛋白质分解产物对人体的危害,还能合成维生素B和K,正常栖居条件下不致病,若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。若在水和食品中检出大肠杆菌,可认为是被粪便污染的指标。因此大肠菌群数(或大肠菌值)常作为饮水、食物或药物的卫生学标准。叶近藤氏酵母
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