培养基按成分分类有哪些?按形态分类:培养基按其不同的物理状态,可分为液体、流体、半固体和固体4类,培养基的物理状态取决于培养基中是否加人凝固剂或凝固剂的加入量。1、液体培养基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固剂,常温下以完全液态存在的培养基,如肉汤培养基或一般液体增菌培养基。2、流体培养基(semi-liquidmedium)在液体培养基中加入0.05%~0.1%的琼脂粉,使其具一定黏度,即成流体培养基。加入琼脂粉增加了培养基的黏度,降低空气中的氧气进人培养基的速度,能使培养基保持较长时间的厌氧条件,有利于一般厌氧菌的生长繁殖,如硫乙醇酸盐培养基、改良马丁培养基等。一般用于霉菌和厌氧菌检查的液体培养基中可加人少量琼脂使其成为流体培养。M-远藤氏防腐培养基 克罗诺杆菌筛选肉汤 Skirrow琼脂基础(Skirrow血琼脂基础) 半固体储存培养基。AN厌氧琼脂基础
培养基的分类有几种呢?按培养基组成物质的化学成分区分:1.天然培养基,天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。例如。牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基和LB培养基等。2.组合培养基,合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计而配制的培养基。例如。高氏1号培养基和查氏培养基等。3.半组合培养基 ,指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如,马铃薯蔗糖培养基。高氏合成一号琼脂培养基ITC 肉汤基础氯苯酚-替卡西林-氯酸钾肉汤基础 SSDC培养基沙门氏菌-志贺氏菌琼脂 蛋白胨山梨醇胆盐(PSB)肉汤。
在培养基中加入 HEPES 有何好处?培养基中常用的缓冲体系是碳酸氢盐,它可提供营养,但却在生理 pH 条件下会降低缓冲能力。而HEPES 是一种很强的缓冲剂,能使细胞培养基在 pH7.2-7.6 条件下缓冲能力增强。HEPES溶液:是一种弱酸,中文名字是羟乙基哌秦乙硫磺酸,主要作用是防止培养基pH迅速变动。在开放式培养条件下,观察细胞时培养基脱离了 5%CO2 的环境,CO2 气体迅速逸出,pH迅速升高,若加了HEPES,此时可以维持 pH7.0 左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES。神经细胞原代培养的过程中能用到。
按培养基的营养成分是否完全区分:1.基本培养基,亦称“较低限度培养基”。只能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基,称为基本培养基,是含有营养要求较低成分的合成培养基,常用“[-]”表示。这种培养基往往缺少某些生长因子,所以经过诱变过的营养缺陷型菌株不能生长。2.完全培养基,基础培养基添加血清等物质后,叫完全培养基,也叫(血清)细胞培养基。完全培养基可用来满足微生物的各种营养缺陷型菌株的生长需要,常以“[+]”表示。3.补充培养基,凡是只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组合培养基,称为补充培养基,它是在基本培养基中加入该菌株不能合成的营养因子而组成的。根据在基本培养基中加入的是A或B等营养因子代谢物而分别用[A]或[B]等来表示。PTYG培养基 改良巴尔斯氏培养基基础不含硫酸亚铁铵 BM液体培养基 BM固体培养基 PS培养基/消化球菌肉汤培养基。
要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中,长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏,如使糖类物质形成氨基糖、焦糖,因此含糖培养基常在0.56kg/cm2,112.6℃15-30分钟进行灭菌,某些对糖类要求较高的培养基,可先将糖进行过滤除菌或间歇灭菌,再与其他已灭菌的成分混合。胰酪胨大豆羊血琼脂TSSB基础 桑塔斯琼脂基础 Spizizen马铃薯琼脂 双歧杆菌生化管用基础培养基 BBL液体培养基。YM肉汤
酵母浸膏葡萄糖土霉素琼脂基础 沙氏葡萄糖琼脂培养基(含***) 咖啡酸琼脂(CAA).AN厌氧琼脂基础
什么培养基中可以省去加酚红?酚红在培养基中用作pH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响,可以通过纯化技术去除,但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长,当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分,很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。研究表明,酚红可以模拟固醇类的作用。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。AN厌氧琼脂基础
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