鸡毒支原体疫苗培养基

什么培养基中可以省去加酚红？酚红在培养基中用作pH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响，可以通过纯化技术去除，但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡，影响细胞生长，当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分，很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。研究表明，酚红可以模拟固醇类的作用。为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。培养基根据其组成、用途、酸碱度等不同因素分类，如营养琼脂、LB培养基、麦康凯培养基等。鸡毒支原体疫苗培养基

要获得微生物纯培养，必须避免杂菌污染，因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言，更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌，一般培养基用1.05kg/cm2，121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中，长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏，如使糖类物质形成氨基糖、焦糖，因此含糖培养基常在0.56kg/cm2，112.6℃15-30分钟进行灭菌，某些对糖类要求较高的培养基，可先将糖进行过滤除菌或间歇灭菌，再与其他已灭菌的成分混合。改良霍格兰氏营养液在培养细胞时通常还需要添加药物，以防止细菌污染。

血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。血清主要作用：提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。

半固体培养基(half-solid medium) 在液体培养基中加人0.2%~0.5%的琼脂粉，加热溶解后冷却即成，以倒置不流动的较软状态为宜，一般供细菌动力试验、菌种传代、保存和储运标本之用。固体培养基(solid medium) 培养基中含有足量的凝固剂(琼脂粉>0.5%)，在常温下能保持固体状态。此类培养基大都用于微生物的分离、纯化、药敏试验及菌苗制造。如营养琼脂、营养斜面、SS琼脂、TCBS琼脂等。此外，还有一些特殊用途的培养基，如用血清或鸡蛋做凝固剂配成的吕氏血清斜面培养基、鸡蛋斜面培养基等。培养基类型和配方可以根据需要进行定制，以满足特定的实验需求。

培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的较适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，若不对培养基pH条件进行控制，往往导致微生物生长速度下降或（和）代谢产物产量下降。因此，为了维持培养基pH的相对恒定，通常在培养基中加入pH缓冲剂，常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐（如KH2PO4和K2HPO4）组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性，KH2PO4溶液呈酸性，两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时，H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物，培养基pH不会过度降低；如果培养基中OH-浓度增加，OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物，培养基pH也不会过度升高。培养基还可以根据所需生长的微生物类别，加入特定的营养物质，例如血清、血红蛋白等等。FDA培养基

培养基种类繁多，根据需求选择适合的培养基对于成功的微生物培养至关重要。鸡毒支原体疫苗培养基

在培养基中加人某种抑制剂和指示剂，抑制某些细菌生长，促进目的菌的繁殖，并使所生长的细菌菌落具有一定特征，以助鉴别挑选，这类培养基称为选择性鉴别培养基。如SS琼脂，在该培养基配方中含有乳糖(反应底物)、中性红和柠檬酸铁铵(指示剂)、灿烂绿及胆盐等(抑菌剂)。灿烂绿和胆盐等抑菌剂能抑制革兰氏阳性菌及部分大肠埃希菌的生长，而对沙门菌及志贺菌基本无影响，而且大肠埃希菌能发酵乳糖产酸，使菌落变红色，沙门菌和志贺菌不发酵乳糖，其菌落为无色。如细菌产生硫化氢，则与柠檬酸铁铵反应生成硫化亚铁沉淀，菌落中心呈黑色或褐色。以此达到鉴别的目的。鸡毒支原体疫苗培养基

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