四号琼脂基础

合成培养基(synthetic medium) 由已知化学成分的营养物质组成的培养基。根据微生物对营养要求的不同，可完全由无机盐或化合物组成，如：氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、维生素等，其组成成分已知，只要严格操作，各批次间质量可做到稳定一致。此培养基可用来检测某种营养物或药物对微生物代谢的影响。组织细胞培养液均属合成培养基。合成培养基的成本较高，其价格相当于同类天然培养基的几倍以至于几十倍。只含几种无机盐的合成培养基，只适用于自养菌的培养，如培养亚硝化细菌、氧化硫杆菌等的培养基。有些培养基大部分成分为已知化学结构的营养物质，其中的个别或少数成分为未明化学成分的必须营养物，成为半合成培养基，如百日咳菌苗生产用的水解酪素培养基。杂质会影响培养基的成分，因此制备培养基时需要进行灭菌。四号琼脂基础

细菌培养基之根瘤菌培养基：葡萄糖10g，磷酸氢二钾0.5g，碳酸钙3g，硫酸镁0.2g，酵母粉0.4琼脂20g，水1000ml，1%结晶紫溶液1ml。先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。放线菌培养基：（1）淀粉硝酸盐培养基（高氏一号培养基）可溶性淀粉2.0g，硝酸钾0.1g，磷酸氢二钾0.05g，氯化钠0.05g，硫酸镁0.05g，硫酸亚铁0.001g，琼脂2g，水100ml。先把淀粉放在烧杯里，用5ml水调成糊状后，倒入95ml水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。调整pH值到7.2-7.4，分装后灭菌，备用。植物组织培养基 MS 大量元素化学制剂和生物制剂都可以用于制备培养基，例如氨基酸、蔗糖和酵母提取物。

细胞培养过程中，细胞培养基是不可或缺的，细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。通常细胞体外培养时需要加入血清，以维持细胞的生长和存活。而除了血清之外，部分细胞在培养过程中需要添加胰岛素和β-巯基乙醇（β-mercaptoethanol）等成分来维持细胞状态。MCF-7和NIH:OVCAR-3等细胞需要额外添加胰岛素，而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等细胞则需要添加β-巯基乙醇，不同细胞加入量会有差异，需根据细胞类型判断。

培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的较适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，若不对培养基pH条件进行控制，往往导致微生物生长速度下降或（和）代谢产物产量下降。因此，为了维持培养基pH的相对恒定，通常在培养基中加入pH缓冲剂，常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐（如KH2PO4和K2HPO4）组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性，KH2PO4溶液呈酸性，两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时，H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物，培养基pH不会过度降低；如果培养基中OH-浓度增加，OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物，培养基pH也不会过度升高。培养基可以分为有机培养基和无机培养基两类。

培养基按成分分类有哪些？按形态分类：培养基按其不同的物理状态，可分为液体、流体、半固体和固体4类，培养基的物理状态取决于培养基中是否加人凝固剂或凝固剂的加入量。1、液体培养基(liquidnutrientmedium)不加任何凝固剂，常温下以完全液态存在的培养基，如肉汤培养基或一般液体增菌培养基。2、流体培养基(semi-liquidmedium)在液体培养基中加入0.05%~0.1%的琼脂粉，使其具一定黏度，即成流体培养基。加入琼脂粉增加了培养基的黏度，降低空气中的氧气进人培养基的速度，能使培养基保持较长时间的厌氧条件，有利于一般厌氧菌的生长繁殖，如硫乙醇酸盐培养基、改良马丁培养基等。一般用于霉菌和厌氧菌检查的液体培养基中可加人少量琼脂使其成为流体培养。常见的细菌类培养基包括营养琼脂培养基、大肠杆菌培养基、金黄色葡萄球菌培养基等等。尿素琼脂基础(pH7.2)

细菌类培养基则包括马铃薯葡萄糖琼脂培养基、麦芽琼脂培养基等等。四号琼脂基础

培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用，例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑菌或杀菌作用。另外，培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和（或）代谢产物的形成和积累，其中碳氮比（C/N）的影响较大。严格地讲，碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如，在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中，培养基碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；当培养基碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。 四号琼脂基础

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