改良牛津培养基（MOX）基础

动物细胞培养必需的溶液，平衡盐水（BSS）：Hanks 液和Earle液是常用的BSS基础溶液。PH调整液：3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液（二羟乙基哌嗪乙烷磺酸）细胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、胶原酶溶液。1)青、链霉素，每毫升培养液含100U青霉素和100ug链霉素。2)卡那霉素：终浓度为50ug/ml培养液。3）制霉菌素：浓度25U/ml，小瓶分装，每瓶一次用完。常用的动物血清主要有牛血清和马血清。牛血清分为胎牛血清和犊牛血清，前者来源少，价格高；后者要求刚产下尚未哺乳的小牛，因为哺乳后的小牛血清中可能含有更复杂的成分。血清中已知的成分主要有蛋白质、氨基酸、葡萄糖等。蛋白质主要是白蛋白和球蛋白。培养基是一种营养物质混合物，可以为细胞提供生长所需的物质。改良牛津培养基（MOX）基础

通常用心、脑或其他脏器浸液配制厌氧菌培养基，并常需加入硫乙醇酸钠、半胱氨酸、肉渣、还原铁、活性炭等还原剂或除氧材料。在液体培养基中还可加入刃天青或亚甲基蓝作为氧化还原指示剂，以观察培养基的含氧程度。心、脑浸液、肝块、肉渣中含有不饱和脂肪酸，能吸收培养基中的氧。硫乙醇酸钠、半胱氨酸是较强的还原剂，能消耗溶解在培养基中的氧。干燥的活性炭和脱脂棉同样能吸收培养基中的氧。所以培养基中加入还原剂和吸收材料，目的都是为造成培养基的缺氧环境，使培养基保持较低的氧化还原电势。此外，还可在培养基表面加一层液体石蜡，以隔绝培养基与大气的接触。胰月示亚硫酸盐环丝氨酸（TSC）琼脂基础培养基中的各种成分会被微生物不同速率地利用，因此需要在适当的时间点更新培养基以维持细胞的生长状态。

培养基的种类有哪些？鉴别培养基：利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素（MIU）培养基等。选择培养基：在培养基中加入抑制剂，去抑制标本中的杂菌生长，有助于所选择的细菌种类的生长。例如培养肠道致病菌的SS琼脂，其中的胆盐能抑制革兰阳性菌，枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌，因而使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到。

天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期，体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大，因此逐渐为合成培养基所替代。普遍使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。通过对培养基的深入研究和优化，可以更好地实现生物医学、生物工程和环境科学等领域的应用和发展。

鉴别培养基(differential media) 在培养基中加入某一反应底物和指示剂，以区别某些微生物的特性从而鉴别之。又分一般鉴别培养基和选择性鉴别培养基。只用于区别不同微生物种类的培养基称为-般鉴别培养基，此类培养基中一般不加抑菌剂而只含指示剂，如克氏双糖铁培养基，含有葡萄糖及乳糖，以酚红作为指示剂，观察培养基底层与斜面的颜色变化判定细菌对葡萄糖和乳糖的发酵能力，加人柠檬酸铁铵，培养后观察是否产生黑色沉着以判定细菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而产生硫化氢；又如伊红-美蓝琼脂，含有乳糖(反应底物)、伊红-美蓝(指示剂)用以鉴别大肠埃希菌、肠道病原菌和其他杂菌。一般鉴别培养基的特点是在配方中都含有指示剂，并可用于区别不同种类的微生物，有些鉴别培养基也可同时作为细菌的特殊需要用来分离培养某些细菌，如胰酪胨大豆琼脂和巧克力色血琼脂。培养基还可以根据所需生长的微生物类别，加入特定的营养物质，例如血清、血红蛋白等等。碱性蛋白胨水 GB

制备培养基需要考虑生长细胞所需的营养、酸碱度和水分含量等因素。改良牛津培养基（MOX）基础

天然培养基血清种类：目用于组织培养的血清主要是牛血清，培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因：来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的，但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。牛血清是细胞培养中用量比较大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，具有极为重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然，胎牛血清是品质比较高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较少。改良牛津培养基（MOX）基础

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