文莱种公猪非洲猪瘟检测技术

非洲猪瘟病毒在地方性流行区，可能存在自然减毒的病毒毒株，表现为年龄依赖性的急性、一过性或亚急性经过。同样，初始体征是发热及相关活动减少和采食量下降。怀孕母猪也可能流产。然而，相当一部分动物会完全康复，并且在大多数情况下，随着时间的推移病毒会完全消失。幼龄发病猪临床症状持续 1-2 周，变得较轻，病死率在10%到60%之间。在某些情况下，成年动物受影响更严重且更致命。在这方面，非洲猪瘟不同于猪瘟，当涉及中等毒力毒株时，猪瘟在年幼动物中更严重。有的研究也描述了非洲猪瘟的慢性形式，特别是在西班牙和葡萄牙使用活疫苗后(Petisca1965)。除了临床症状较轻外，慢性型猪可能有关节肿胀、溃疡和皮肤病变。慢性型具有潜在危险性，因为动物在临床症状消失后仍具有传染性。在撒丁岛，存活动物被描述为具有非洲猪瘟病毒特异性抗体、间歇病毒血症或亚急性疾病，以及具有非特异性临床症状或无症状的存活者。在俄罗斯联邦的田间条件下(Mur,Igolkin,etal.2016)以及用东欧分离株接种的实验动物中(Gallardo,Soler,Rodze,etal.2019)也观察到了类似情况。八方同创要求非洲猪瘟阳性场，做好内防扩散措施，种猪免疫“一猪一针头”，仔猪“一窝一针头”。文莱种公猪非洲猪瘟检测技术

非洲猪瘟病毒的复制主要发生在侵入的单核细胞和巨噬细胞的细胞质中，尽管早期复制阶段也在细胞核中被描述。病毒进入通过网格蛋白介导的、发动蛋白依赖性的内吞作用和巨胞饮作用(Galindoetal.2015;HernaezandAlonso2010;Sánchez,Quintas,etal.2012)。肌动蛋白依赖性内吞作用和涉及微管活性的内吞流也参与其中，表明存在经典吞噬作用(Bastaetal.2010)。细胞受体及其病毒配体的身份仍未知。CD163曾被提议为推定受体(Lithgowetal.2014;Sánchez-Torresetal.2003)，但CD163基因敲除猪对非洲猪瘟病毒仍完全易感(Popescuetal.2017)。越南养殖场非洲猪瘟疫苗非洲猪瘟弱毒活疫苗虽然在实验室条件下攻毒表现出保护，但是临床使用存在毒力返强，与野毒株重组的风险。

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟弱毒/基因缺失毒生物学特性如下：早期的研究已表明，ASFV具有较宽的温度稳定性和对潮湿及干燥具有极强的抵抗力，并高度抵抗某些化学物质（如胰蛋白酶和EDTA）和物理处理（如冻结/解冻和超声波）。在56℃1h和37℃1周后病毒仍能存活。无论是在0℃以下还是在4℃时，ASFV都表现出对环境条件的高耐受性，在长时间的贮藏过程中仍可保持活性。ASFV可以在多次冻融循环中存活，在4℃的环境中保存病毒血液的活性至少75周，而在无Ca2+或Mg2+的环境中保存病毒活性至少61周。病毒在粪便和尿液中（20℃下）可存活11d，木板上的血渍中可存活70d，而在血液中可存活15周。受污染的肉即使被腌制，其中的ASFV也可以在火腿中存活一年以上。

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 八方同创提醒：非洲猪瘟病毒对pH值耐受范围广，但是对PH值小于3.8的酸和PH值大于12.3的碱敏感。

    非洲猪瘟防控过程中一定要有“无坚不破、唯快不破”的防控理念，早发现、早处理仍然是减少和减低损失的主要措施。现场确诊十分重要了。八方同创在防控非洲猪瘟一线，秉承“科技赋能检测”的理念，依托先进生物技术和临床经验，自主研发了一系列诊断工具——高灵敏迷你PCR设备与非洲猪瘟抗原、抗体快速检测卡。BIOMINI 2.0是高特异性的迷你PCR仪，检测下限可达，全程耗时不足60分钟，实现了现场快速精细的核酸诊断。同时，其与中国台湾EBS联合推广的非洲猪瘟抗体快速检测卡已获得世界动物卫生组织（WAHO）认证，发病后7天即可检出，15分钟出结果，适用于全球180多个国家。这些工具为科学决策提供了“火眼金睛”。这些工具为早发现、早处理非洲猪瘟病毒提供坚实保障。 八方同创要求非洲猪瘟阳性场，做好内防扩散措施，低风险区查情不用公猪，用气味剂。中国台湾中小型养殖场非洲猪瘟管理操作规程及配种有关规定

八方同创提醒：非洲猪瘟病毒潜伏期通常为4至19天，弱毒株的潜伏期更长，甚至超过1个月。文莱种公猪非洲猪瘟检测技术

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，不同非洲猪瘟毒株有不同的流行特点。野毒株流行特点：高度接触传播，死亡快，死亡率达30-100%，供料不食，死亡，流产，皮肤发红、黄、白，血便等临床症状；唾液，血液拭子均能检测到抗原（P72荧光定量PCR）；抗体检测早12天可以检测到，30天左右阳性达高峰，可持续5-8个月；变异毒株流行特点：接触传播、有限空气传播，死亡慢，死亡率0-50%，厌食、死亡、关节肿、皮肤坏死等症状，临床症状不明显；间断性排毒，拭子抗原难以检测到(需要P72/MGF/CD2V三重荧光定量PCR)；抗体检测21天可检测到，45-50天左右阳性率达高峰；持续2个月或更短；潜伏+应激可导致爆发；可以通过模糊拔牙、净化种猪、稳定商品猪生产；文莱种公猪非洲猪瘟检测技术

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