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免疫组化基本参数
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免疫组化企业商机

免疫组化临床应用中,可以对传染性疾病诊断。应用抗病毒、细菌、zhen菌和寄生虫抗原的特异性抗体进行免疫组化染色,可以检测和诊断许多传染性疾病病原微生物,如乙型肝炎病毒(HBV)、巨细胞病毒(CMV)、人乳T状瘤病毒(HPV)、疱疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、细小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS)等等,由于免疫组化在传染性疾病诊断中具有及时性、低风险性、高敏感性、特异性、有效性等特点,可以用于(1)用于人类新病原微生物的识别;(2)提供快速的形态学诊断,使严重传染性疾病得以早期医疗;(3)在无法取得新鲜组织或尚无培养方法的情况下,提供诊断并对发病机制进行研究和认识。英瀚斯生物专业做实验外包服务,一站式医学科研平台。如何做好免疫组化实验?江苏病理免疫组化注意事项

江苏病理免疫组化注意事项,免疫组化

免疫组化在在病理诊断中,随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现,免疫组化在cancer诊断及鉴别诊断、分类、预后判断等方面产生了重大的影响。由于免疫组化技术也存在一些局限性,因此,深入研究免疫组化原理和技术,并努力实现规范化的操作,才能充分发挥免疫组化在病理的诊断及鉴别诊断、判断预后、指导临床医疗中的作用。

观察组织切片中抗原的数量及其在组织中的分布情况,对抗原进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学,由于抗原与抗体特异性结合,因此通过免疫组化使标记抗体的显色剂(酶、荧光素、同位素、金属离子等等)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)。IHC所用标本主要为两大类:组织标本和细胞标本,其中制作组织标本更常用、更基本的方法是石蜡切片。石蜡切片对于组织形态保存好,有利于各种染色对照观察,而且能长期保存;石蜡切片中使用的甲醛固定剂对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中优先选择的组织标本制作方法。 江苏病理免疫组化注意事项免疫组化IHC详细介绍!

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免疫组化实验所用的抗体

免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。

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免疫组化常用的染色方法

根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法常用。

免疫组化的特点:

1)特异性强。免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。

2)敏感性高。在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP三步法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。

3)定位准确、形态与功能相结合。该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。

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确定cancer分期,免疫组化技术应用于临床可以进行处理哦,英瀚斯生物为您处理。cancer分期是判断预后的一个指标,与是否浸润、有无淋巴管或血管侵袭密切相关,而通过免疫组化方法可以判断cancer是否浸润、有无淋巴管或血管侵袭。层黏连蛋白和Ⅳ型胶原的单克隆抗体可以清楚的显示基膜的主要成分,用于区分原位*和浸润*,一旦上皮性*突破基膜为浸润,未突破基膜为原位;显示血管和淋巴管内皮细胞的标记物第八因子相关蛋白、D2-40等则可清楚显示cancer对血管或淋巴管的浸润。因此对许多cancer的良恶性鉴别及有无血管或淋巴管浸润,免疫组化结果作为主要的鉴别依据。免疫组化protocol,详情请看英瀚斯生物官网。福建组织免疫组化多少钱

哪里可以做免疫组化?江苏病理免疫组化注意事项

英瀚斯生物为您整理免疫组化实验步骤

1、石蜡切片置于65℃烘箱中烘片2h,脱蜡至水,用PBS冲洗三次,每次5min。

2、切片置于EDTA缓冲液中微波修复,中火至沸后断电,间隔10min低火至沸。

3、自然冷却后PBS洗3次,每次5min。4、切片放入3%过氧化氢溶液,室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶。

5、PBS洗3次,每次5min,甩干后5%BSA封闭20min(封闭电荷)。

6、去除BSA液,每张切片加入50μl稀释的一抗覆盖组织,4℃过夜。

7、PBS洗3次,每次5min。

8、去除PBS液,每张切片加50μl-100μl相应种属的二抗,4℃孵育50min。

9、PBS洗3次,每次5min。

10、去除PBS液,每张切片加50-100μl新鲜配制DAB溶液,显微镜控制显色。

11、显色完全后,蒸馏水或自来水冲洗,苏木素复染,1%盐酸酒精分化(1s),自来水冲洗,氨水返蓝,流水冲洗。

12、切片经过梯度酒精(70-100%)10min一个梯度,脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固。 江苏病理免疫组化注意事项

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