鲎试验法（LAL 法）是细菌内毒素检测的经典方法，依据反应监测方式可分为三类：凝胶法、浊度法和显色法。凝胶法通过观察是否形成凝胶判断内毒素是否超标，其优势是操作简便、成本较低，适用于定性或半定量检测，如医疗器械初筛；浊度法通过监测反应体系浊度变化速率定量内毒素，灵敏度高（可达 0.005 EU/mL），适用于生物制品原液等高精度需求场景；显色法基于显色底物的吸光度变化定量，抗干扰能力较强，适配复杂基质样品（如含蛋白质的注射液）。三种方法均需严格控制反应温度（37℃±1℃）和时间，确保结果可靠性。
重组级联试剂（rCR）适用于细胞培养辅料、单抗、冻干疫苗等样本，内毒素检测适用范围广。北京化学制药内毒素检测技术升级
内毒素检测方法验证需覆盖多项参数，确保方法可靠：线性范围需包含样品预期浓度（如 0.01-10 EU/mL），相关系数 R²≥0.98；准确度通过加标回收率评估，应在 50%-200% 范围内；精密度包括批内和批间精密度，CV 值均应≤15%；检测限（LOD）需低于产品限值的 1/2（如限值 0.5 EU/mL，LOD 应≤0.25 EU/mL）；专属性需证明无干扰物质影响（如 β- 葡聚糖、蛋白质不引发假阳性）。验证通过后，方法需经实验室负责人批准方可使用，且定期需进行一次回顾性验证，确认方法持续有效。
上海血液制品内毒素检测重组级联试剂（rCR）重组级联试剂（rCR）推动内毒素检测向可持续发展转型，兼顾生态保护与药品安全质控。
动态显色法鲎试剂是湖州申科生物针对生产过程监控开发的内毒素检测工具，兼具准确性和便利性。该试剂灵敏度达 0.005-5EU/mL，标准曲线 R²≥0.990，可准确定量内毒素浓度，满足生物制品中间品和成品的放行需求。成套包装设计包含内毒素标准品、检查用水、主试剂复溶液、主反应试剂、96 孔板及封口膜，无需额外采购辅料，开箱即可使用，减少耗材浪费。稳定性上，批次间 CV 值≤15%，优于行业 20% 的平均水平，确保长期检测数据的一致性。配套抗增液可有效应对蛋白质、多糖等基质干扰，加标回收率稳定在 80%-120%。操作上适配主流酶标仪，支持 405nm 动态读数，数据可自动记录追溯，符合 GMP 数据完整性要求。
湖州申科生物凝胶法鲎试剂是根据凝集反应所形成凝胶的坚实程度来限量检测样本中细菌内毒素含量。常用于人用和动物用注射药物、生物制品及医疗器械等领域中定性或半定量地测定细菌内毒素含量。本品为海洋生物鲎的血液变形细胞溶胞物的冷冻干燥制品,内含能被微量细菌内毒素活化的凝固酶原(Proclotting enzyme)和凝固酶蛋白(Coagulogen)。在适宜的条件下(温度、pH值及无干扰物质),细菌内毒素能活化鲎试剂中的凝固酶原,使备试剂产生凝集反应形成凝胶。本品可以快速、准确地检测样品中的内毒素水平，提高实验效率,保障实验结果的可靠性。
样本含内毒素结合物时，可尝试用分散剂减少抑制，保障内毒素正常检出。
内毒素检测鲎试剂的反应受pH的干扰。在进行检测时，要调节被测溶液的pH值，使鲎试剂与供试品溶液的混合溶液pH值落在鲎试剂指定的使用pH范围内（一般鲎试剂作用pH值在6.0~8.0范围内)。用于调节pH值的试液或溶液（酸或碱)，可采用BET用水配制，并将溶液在无热原容器中储存；必须对试液或溶液进行验证，以证明不含可检出的内毒素并且无干扰因素。调节pH试剂（酸或碱）的添加量，不应该超过供试品的1092。如果超过10%，则在进行计算时，将DH试剂的添加量的系数计算进去。
动态显色法鲎试剂监测吸光度变化定量内毒素，抗干扰强，适配复杂基质样品检测。北京内毒素检测常见问题分析
重组鲎试剂无动物源，支持 3R 原则，批次差异小，适配动态显色法酶标仪。北京化学制药内毒素检测技术升级
血液制品（如白蛋白、免疫球蛋白、凝血因子）来源于人血浆，内毒素污染风险高，且基质中含大量蛋白质、脂质等干扰物质，检测难度较大。传统 LAL 法易受血浆蛋白抑制，需通过预处理去除干扰：如采用三氯乙酸沉淀蛋白、超速离心分离脂质，或使用特定去干扰试剂（如内毒素提取试剂）。此外，血液制品内毒素限值较低，需选用高灵敏度检测方法（如动态显色法，LOD=0.005 EU/mL）。检测过程中需严格区分 “内源性内毒素”（血浆中天然存在）与 “外源性污染”，通过工艺优化（如巴氏灭活、纳米膜过滤）降低外源性内毒素残留，保障临床用药安全。
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