英瀚斯生物深入了解客户的具体需求，并制定了经过测试的标准操作程序（SOP），以优化免疫组化实验的各个方面，包括组织固定方法、抗原活化条件、抗体滴度选择、孵育时间和洗涤条件等。组织切片的制备：客户可以提供新鲜组织，由我们负责进行组织固定和石蜡包埋；也可以提供冷冻或石蜡包埋的组织或细胞样品进行分析。抗体的选择：客户可以自行提供检测所需的一抗，或者由我们从现有的抗体中筛选合适的抗体。检测所需的二抗由我们提供。Von Kossa染色用于检测钙盐沉积。南京茜素红染色
病理实验外包常见染色介绍：天狼星红染色（Sirius Red Staining）天狼星红染色是一种广泛应用于组织学研究中的染色方法，特别适用于显示胶原纤维的分布和结构。该染色技术利用了天狼星红染料对胶原纤维的高度亲和力，在偏振光下可以观察到不同类型的胶原纤维呈现出不同的颜色。染色原理：•染料特性：天狼星红是一种阳离子染料，它能够与胶原纤维中的负电荷基团结合，从而产生强烈的红色染色效果。•偏振光下的表现：在偏振光显微镜下，I型胶原纤维呈现亮黄色或橙红色，而III型胶原纤维则呈现绿色或黄色。这种颜色差异使得天狼星红染色成为区分不同类型胶原纤维的有效手段。•其他成分：除了胶原纤维外，细胞核通常被染成蓝黑色或淡蓝色，而肌肉和其他非胶原组织则保持无色或淡粉色。应用范围：•心肌梗死模型：天狼星红染色可以用于检测心肌梗死后的心脏组织中胶原纤维的沉积情况，评估心肌修复和纤维化的程度。•肺纤维化：通过天狼星红染色，研究人员可以定量分析肺组织中的胶原纤维含量，评估肺纤维化的严重程度。•肝纤维化：在肝脏疾病的研究中，天狼星红染色常用来显示肝组织中的胶原纤维沉积，帮助诊断和评估肝纤维化的进展。天狼星红染色 方法通过染色，可以区分细胞核和细胞质。
当H&E染色提示组织间质发生改变，例如怀疑存在纤维化、淀粉样变或特定细胞外基质成分沉积时，特殊染色技术便成为深化诊断的关键工具。例如，Masson三色染色通过使用不同颜色的酸性染料，能够将胶原纤维染成鲜艳的蓝色或绿色，而细胞质、肌肉纤维和角蛋白等染成红色，实现对纤维组织的精细定量和定位。这在评估肝硬化、肾小球硬化、心肌纤维化等慢性疾病的严重程度时，提供了至关重要的客观依据。另一种重要的特殊染色是刚果红（Congo Red）染色，**于检测淀粉样物质在组织中的沉积。在偏振光显微镜下，染上刚果红的淀粉样蛋白会呈现出特征性的苹果绿双折光现象，这是诊断系统性淀粉样变性的确凿证据。特殊染色是对H&E染色信息的补充和深化，它使得病理医生能够超越单纯的形态观察，直接识别和确认特定的化学成分或病理产物，从而在病因和病理生理学层面锁定疾病的本质。
苏木精-伊红（Hematoxylin and Eosin, H&E）染色无疑是病理诊断领域**基础、**重要、也是应用*****的技术。这种双重染色法的**在于其强大的结构显示能力：苏木精作为碱性染料，对带负电荷的细胞核内的核酸（DNA/RNA）具有高度亲和力，将其染成清晰的蓝紫色；而伊红作为酸性染料，则与细胞质内的蛋白质和细胞外基质中的胶原纤维等带正电荷的结构结合，呈现出浓淡不一的粉红色或红色。通过这种经典的对比，病理医生能够一目了然地观察到细胞的形态特征、核质比例、核仁结构、细胞排列模式、组织层次以及是否存在炎症细胞浸润、坏死或异型性增生等病理变化。无论是外科病理切片的初步筛查、尸检标本的组织学评估，还是冰冻切片的快速诊断，H&E染色都是奠定诊断基础的“黄金标准”。它就像一张组织结构的地图，指导医生在纷繁复杂的微观世界中，定位并圈定可疑的病灶区域，为后续的特殊染色和免疫组化分析指明方向，是实现准确病理诊断的第一步，其在医学诊断中的战略地位无可撼动。染色切片可以揭示动物模型的病理特征。
尽管病理染色技术已非常成熟，但在实际应用中仍面临一些挑战，并有巨大的发展空间。挑战包括：组织处理流程的变异性（如脱钙、固定对染色的影响）、IHC抗体的一致性和标准化、以及在数字化环境中如何更好地管理和分析海量的染色图像数据。未来的发展趋势将聚焦于提高染色的效率、特异性和自动化水平。例如，多重荧光免疫组化（Multiplex IHC/IF）技术允许在同一张切片上同时标记并分析多达5-8个甚至更多的生物标志物，这对于**微环境的复杂研究和PD-L1等多个免疫检查点蛋白的共表达分析至关重要。此外，质谱流式细胞技术与组织切片分析的结合，以及利用深度学习算法对染色切片进行自动诊断和量化分析，将进一步推动病理染色技术向更高通量、更精确、更智能化的方向发展，**终实现对疾病更深层次的理解和更个性化的***。甲苯胺蓝染色常用于检测肥大细胞颗粒。天狼星红染色 方法
Oil Red O染色用于检测脂质沉积。南京茜素红染色
随着分子生物学的发展，**免疫组织化学（IHC）染色** 在病理切片分析中占据了**地位。IHC 利用特异性的抗原-抗体结合原理，将目标分子在组织中的定位可视化。常用的方法是使用与目标蛋白结合的一抗，再通过带有酶（如 HRP）的二抗显色。DAB 显色产物在显微镜下呈棕黄色，常与苏木精复染以增强对比度。IHC 可检测**标志物（如 p53、Ki-67、HER2）、炎症因子（如 TNF-α、IL-6）、细胞分化标志物等，既有助于临床诊断，也能为科研提供定量或半定量分析。南京茜素红染色
